四神丸方的化学成分及入血成分分析

目的采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术对四神丸方的化学成分及入血成分进行初步鉴定和分类归属。方法将SD大鼠分为空白组和给药组,给药组大鼠灌胃给予四神丸方水提液,分别采集空白及含药血浆。采用Hypersil GOLD VANQUISH色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.9μm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,体积流量0.3 mL·min^(-1),柱温35℃;采用电喷雾离子源(ESI),正、负离子扫描模式,进行色谱分离和质谱数据采集。将精确相对分子质量、碎片离子信息和相对保留时间与对照品图谱比对、与自建数据库匹配并结合文献报道,鉴定四神丸方化学成分;在此基础上比对空白血浆和含药血浆,分析四神丸方入血成分。结果从四神丸方中共鉴定出181种化学成分,主要包括黄酮类、生物碱类、木脂素类等成分。从血浆样本中共鉴定出49种原型入血成分,主要包括黄酮类、生物碱类等成分。结论全面、准确、快速地识别鉴定了四神丸方及其含药血浆中多种化学成分,各类成分归属到了方中各味药材,为四神丸方质量控制、药效物质基础研究及临床应用提供参考。

基于UPLC四神丸方中19种有效成分定量测定以及提取工艺优化研究

目的建立四神丸方(汤剂)19种成分同时定量分析的UPLC法,并对其提取工艺进行优化。方法采用Accucore RP-MS C_(18)色谱柱(150 mm×2.1 mm,2.6μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长245 nm,建立19种成分的含量测定方法。以层次分析法获得的综合评分为评价指标,进行Box-Behnken设计-响应面试验,并对得到的最优提取工艺进行验证。结果建立了四神丸方(汤剂)中19种成分的UPLC含量测定方法,方法学考察结果均符合要求。四神丸方(汤剂)最佳提取工艺为加水14倍量,浸泡30 min,提取3次,每次48 min。结论建立的含量测定方法准确可靠,为该制剂质量控制和药效物质基础研究提供参考。优化的提取工艺合理可行,为四神丸方(汤剂)工业生产提供依据。