四色法流式细胞术分析正常人T细胞亚群中IFN-γ和IL-4的表达

目的 :研究IFN γ和IL 4在正常人T淋巴细胞亚群中的表达情况。方法 :5 0例正常人的外周血在PMA、ionomycin和BFA存在的条件下在体外短期培养 ,进行细胞膜表面抗原和细胞内细胞因子染色 ,再用流式细胞仪对CD3 +、CD3 +CD8+、CD3 +CD8-细胞内的IFN γ和IL 4进行测定。并对分析方法中的一些测定条件进行了探讨。结果 :正常人 9 89%～ 3 3 3 9%的CD3 +CD8 细胞为Th1细胞 ,0 64 %～ 6 87%为Th2细胞 ,14 0 0 %～63 76%的CD3 +CD8+细胞为Tc1细胞 ,0 92 %～ 5 44 %为Tc2细胞 ;Th1、Tc1细胞百分比明显多于Th2、Tc2细胞 ,并且Tc1细胞百分比比Th1细胞多 ,而同时分泌两种细胞因子的Th0、Tc0细胞均较少。结论 :T淋巴细胞各个亚群产生IFN γ和IL 4的能力明显不同且正常人分泌细胞因子的能力有较大的个体差异。

四色法辨治成人湿疹体悟

文章通过查阅中医文献及6年专科临证发现,除瘙痒外无余不适的成人湿疹以阳证居多,皮损基底颜色均与红色相关,据程度可分为鲜红、淡红、暗红及近肤色。遣方用药上,鲜红为主者以朱仁康的皮炎汤为主加减;淡红为主者以《太平惠民和剂局方》消风散或艾儒棣教授的马齿苋汤加减;暗红为主者,以徐宜厚教授的益威止痒汤加减;近肤色为主者,以当归饮子为主加减,取得了较好的临床疗效。

四唑染色法测定白花前胡种子生活力方法研究

为探讨白花前胡(Peucedanum praeruptorum Dunn.)种子生活力的适宜测定方法,采用四唑(2,3,5-氯化三苯基四氮唑;2,3,5-Triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色法,设置不同浸种时间、不同染色浓度、不同染色时间的正交试验设计,来研究白花前胡种子的生活力测定条件。结果TTC法测定白花前胡种子生活力的最佳条件为在30℃环境下,浸种10 h,采用浓度1 g/L的TTC溶液在35℃环境里染色16 h。此法可作为白花前胡种子生活力测定的标准方法。

四唑染色法快速测定任豆种子生活力的研究

根据四唑 (2 ,3,5 - Triphenyl Tetrazolium Chloride,缩写 TTC)染色法测定种子生活力的原理 ,研究不同四唑溶液浓度 ,不同染色温度和不同染色时间对任豆种子生活力测定的影响 ,摸索出测定任豆种子生活力的最佳条件。结果表明 ,溶液浓度 ,染色温度 ,染色时间三者之间存在一定的关系 ,通过改变三之者中的一者或两者可以达到改变其它两者或一者的目的 ,因此 ,可根据实际需要来确定测定条件。比较四唑染色法测定任豆种子生活力的不同条件 ,本文提出 :温度为2 5℃ ,浓度为 0 .5 % ,染色时间为

四唑染色法快速测定小叶黑柴胡种子生活力研究

采用四唑染色法研究了染色温度、染色时间、TTC浓度对小叶黑柴胡种子生活力(染色效果)的影响,探讨测定小叶黑柴胡种子生活力的最佳方法,明确其生活力与发芽率之间的相关性。结果表明:影响小叶黑柴胡种子生活力测定值大小的因素依次为染色温度、染色时间、TTC浓度,得到生活力(X)与发芽率(Y)线性关系为Y=2.603X-1.617(r=0.985)。小叶黑柴胡种子生活力测定的最佳条件为温度35℃、染色时间3 h、TTC浓度0.2%,测得的生活力与发芽率呈显著正相关。

四甲基偶氮唑盐比色法测定原发性肝癌对化疗药物的敏感性

目的:探讨肿瘤药敏试验在肝癌化疗选药中的作用。方法:将12例患者的肝癌组织进行体外培养,以临床常用的9种化疗药物加以干预,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测化疗药物对癌细胞的抑制率。结果:9种化疗药物对肝癌细胞的抑制率差异有显著性(P<0.01),肝癌对多西他赛高度敏感,对泽菲、顺铂、卡铂、阿霉素、丝裂霉素、5-氟尿嘧啶中度敏感,对羟基喜树碱、健择低度敏感。结论:肿瘤药敏试验对肝癌化疗起重要作用。以MTT法检测相关化疗药物对肝癌细胞的抑制率,优选敏感药物组成化疗方案,可实现个体化治疗,从而提高疗效,减轻不良反应。

应用四唑盐比色法对义齿软衬材料的细胞毒性评价

四唑盐比色法(MTT assay)是通过比色测定细胞数量和活性的新方法.其敏感性与细胞计数法、同位素标记法相似.本文采用该法检测了三种义齿软衬材料(可见光固化、室温固化及热固化义齿软衬材料)对细胞的毒性作用.结果表明,3种材料的50%浓度浸渍液的细胞毒性程度为1～0级,100%浓度浸渍液的细胞毒性程度为2～0级,显示出较低的细胞毒性.

四甲基氮唑蓝比色法预测胃癌细胞药物敏感性的探讨

目的通过对比胃癌患者单药与联合用药体外敏感性,为临床筛选对胃癌相对敏感的化疗药物提供参考依据。方法采用临床常用的19种化疗方案对30例胃癌的新鲜标本进行四甲基氮唑蓝比色法体外敏感性测定。结果不同个体对化疗药物的敏感性差异较大,联合用药比单个药物的平均抑制率高。结论胃癌化疗联合用药敏感性大。四甲基氮唑蓝比色法是一种简便而快速的肿瘤体外药物敏感实验方法,可为胃癌临床个体化化疗方案的选择提供参考。

改良四胺银染色法用于卡氏肺孢子虫诊断的研究

在Grocott改良的果氏四胺银方法中,分别以5％过碘酸钠与5％铬酸作氧化剂,对感染卡氏肺孢子虫的小鼠肺涂片、大鼠及病人的肺切片进行染色。小鼠肺涂片的氧化时间分别为5,15与60min,温度为20℃;银浸时间90min,温度60℃。在较短氧化时间即15min以下时,卡氏肺孢子虫包囊显示淡褐色或深褐色,部分包囊内清晰可见一对括号状结构;但氧化时间较长时,包囊呈黑色且显示受损。在同一批次小鼠肺涂片氧化时间为5min时,过碘酸钠氧化较之铬酸显示较多的含括号状结构的包囊。在过碘酸钠氧化的大鼠或病人的肺切片中,也可见到该结构。实验结果表明以过碘酸钠作氧化剂进行银染反应优于铬酸,且可省略亚硫酸氢钠处理步骤,这将有利于临床应用。

四唑染色法快速测定茄子种子生活力的研究

根据四唑(2,3,5-Triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色法测定种子生活力的原理,研究不同浓度四唑溶液、不同染色温度和不同染色时间对茄子(Solanum melongena L.)种子生活力的影响,探索测定茄子种子生活力的最佳条件。结果表明,四唑溶液浓度、染色温度、染色时间三者之间存在一定的相关性,通过改变三者中的一者或两者可以达到改变其他两者或一者的目的,因此,可根据实际需要来确定测定条件。在比较四唑染色法测定茄子种子生活力的不同条件后,认为处理组合11(浸种温度20℃、浸种时间18 h、染色液浓度1.0%、染色温度35℃、染色时间18 h)为最理想的处理组合,是TTC法快速测定茄子种子生活力的适宜方法。

毛鸡骨草种子四唑染色法的研究

为完善毛鸡骨草种子质量检验方法,对其种子的生活力测定方法——四唑染色法进行了研究。通过考察种子预湿时间及方法、种子染色前处理、染色液浓度、染色温度、染色时间,确定了毛鸡骨草种子四唑染色条件。毛鸡骨草种子四唑染色方法为净种子经破除硬实后,于30℃恒温水浸种5h～6h预湿,剥皮,1.0%TTC溶液30℃黑暗染色5h～6h。结果表明,该方法对不同毛鸡骨草种子的染色率与发芽试验结果基本一致。毛鸡骨草种子的四唑测定稳定可靠,可代替发芽试验。

四唑染色法测定在不同贮藏处理下火力楠种子生活力

寻找贮藏火力楠(Michelia macclurei)种子的有效方法,设计在3个温度条件下共计12组贮藏处理进行试验。通过采用四唑(2,3,5-Triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色法,对不同的贮藏方式的火力楠种子生活力进行连续5个月测定。结果 TTC法测定火力楠贮藏在12组处理中,处理h(塑料瓶密封低温冷藏贮藏)的生活力最高,经过聚类分析,处理h和处理g(塑料瓶密封常温贮藏)可作为日常贮藏火力楠种子的有效方法。

浅谈四唑染色法在林木种子检验中的应用

在种子检验工作中用四唑染色法对种子的生活力进行测定,既能快速评价种子的潜在发芽能力,又能准确评定种子质量。

四唑盐比色法评价聚乳酸、聚乙醇酸及其共聚物的细胞毒性

目的评价聚乳酸、聚乙醇酸及其共聚物的细胞毒性。方法采用能快速评定细胞增殖率和细胞毒性的比色分析方法MTT比色法,分别检测对聚乳酸、聚乙醇酸细颗粒对小鼠胚胎成纤维细胞相对增殖率的影响,评价其细胞毒性。结果参照美国药典的评价标准,两类医用高分子材料均呈现较高的细胞相对增殖率,其细胞毒性为1级,即无细胞毒性。结论聚乳酸、聚乙醇酸无细胞毒性。

四唑染色法快速测定菊芋种子生活力的研究

为了研究不同四唑(TTC)溶液浓度、不同染色温度对菊芋种子生活力测定的影响。根据四唑染色法测定种子生活力的原理,对菊芋种子生活力的最佳条件进行了测定。结果表明,当菊芋种子在25℃蒸馏水中浸种,待种子完全吸胀后,于35℃黑暗条件下、TTC浓度0.5%,染色7 h,染色效果最好,可以很好地检测菊芋种子活力水平,估计种子潜在发芽能力,为菊芋种子生活力的快速测定提供参考。

乳酸脱氢酶法和四唑盐比色法对纳米银抗菌凝胶细胞毒性评价的比较研究

目的:采用两种体外细胞毒性方法评价纳米银抗菌凝胶的细胞毒性,旨在评估两种方法在纳米银抗菌凝胶毒性评价中的适宜性及优缺点,为该产品的细胞毒性研究提供技术支持。方法:采用乳酸脱氢酶(LDH)试验和四唑盐比色法(MTT试验)对抗菌凝胶进行细胞毒性评价。结果:MTT试验结果显示抗菌凝胶100%浸提液(0.1g/mL)和70%、60%、50%、40%、20%系列稀释液细胞相对存活率分别为:1%,2%,1%,27%,89%,96%;LDH试验结果显示抗菌凝胶100%浸提液(0.1g/mL)和70%、60%、50%、40%、20%稀释液的LDH总释放率为:2%,3%,10%,55%,28%,16%。MTT试验的IC50为0.048g/mL,抗菌凝胶IDH试验的LC50为0.051g/mL。结论:两种方法测得的细胞毒性随着试验样品浓度的降低均降低,两者的趋势一致,且其IC50浓度接近,两种方法从不同角度阐明了该产品的毒性,为临床合理用药提供数据支持。

四唑法测定几种草花种子生活力标准的研究

用四唑溶液测定一串红、万寿菊、百日草、翠菊、三色堇、鸡冠花6种花卉种子的生活力,找出6种花卉种子的生活力测定方法,包括制胚方法、染色时间、浓度,以及生活力高低测定的标准,绘制了6种花卉种子的四唑染色图谱。