胃癌根治性手术前后四跨膜蛋白超家族1表达水平及病理特征变化研究

目的分析胃癌根治性手术前后四跨膜蛋白超家族1(TM4SF1)表达水平及病理特征变化。方法选取2020年1月—2022年10月在医院进行诊断且接受胃癌根治性手术患者100例,采集患者手术前后胃癌组织及胃黏膜组织,以免疫组织化学法测定TM4SF1表达水平,分析TM4SF1表达与临床病理的关系。结果胃癌组织TM4SF1阳性表达率(64.00%)低于癌旁组织(94.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色发现TM4SF1染色位于基底黏膜,其蛋白主要位于固有腺体表达,术前胃癌组织TM4SF1阳性表达率(64.00%)低于术后胃底黏膜组织(91.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。TM4SF1阳性组患者淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期~Ⅳ期、肿瘤Borrmannn分型Ⅲ型~Ⅳ型、浸润深度T3~T4占比率均低于阴性组(P<0.05)。结论胃癌组织TM4SF1表达过低,其低表达与肿瘤分期、浸润深度、肿瘤分型、淋巴结转移密切相关。

SLC1A5协同TM4SF1通过mTOR信号通路调控食管鳞癌细胞迁移

目的探讨氨基酸转运载体溶质载体家族1成员5(SLC1A5)在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其与临床病理特征的相关性,以及SLC1A5对ESCC细胞迁移的影响及潜在分子机制。方法采用TNM plot在线数据库分析SLC1A5基因在ESCC组织和正常组织中的表达情况。通过实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测ESCC组织和癌旁组织中SLC1A5 mRNA表达情况;采用免疫组化(IHC)法检测SLC1A5蛋白表达情况,并分析其与患者临床病理资料的相关性。分别构建SLC1A5过表达(SLC1A5-OE组)、四跨膜蛋白超家族成员1过表达(TM4SF1-OE组)、SLC1A5和TM4SF1共同过表达的Eca109细胞。采用细胞增殖试验、Transwell实验检测Eca109细胞的增殖、迁移和侵袭能力。通过免疫共沉淀(IP)实验证实SLC1A5和TM4SF1的相互作用;采用蛋白质免疫印迹(WB)法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白的表达水平。结果TNM plot数据库分析显示,ESCC组织中SLC1A5基因表达水平高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。ESCC组织中SLC1A5 mRNA表达高于成对的癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。IHC结果显示,SLC1A5蛋白在癌组织中高表达,并且与临床分期(P=0.036)、淋巴结转移(P=0.029)显著相关。细胞增殖实验结果显示,SLC1A5-OE组和对照细胞(Con组)增殖能力比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell实验结果显示,与Con组比较,SLC1A5-OE组细胞迁移及侵袭能力增强,差异有统计学意义(P<0.01)。IP结果表明,SLC1A5与TM4SF1存在相互作用。WB结果显示,相对于SLC1A5-OE组或TM4SF1-OE组,p-mTOR、p-S6蛋白表达水平在SLC1A5和TM4SF1共同过表达的细胞中最高。Transwell实验证实,共同过表达SLC1A5和TM4SF1的ESCC细胞迁移能力最强。结论ESCC中SLC1A5呈高表达,且与患者临床分期、淋巴结转移显著相关,SLC1A5可能通过与TM4SF1相互作用,激活mTOR信号通路,进而促进ESCC细胞迁移。

基于TGF-β1/ERK1/2信号通路分析TM4SF1与鼻咽癌细胞增殖、侵袭、凋亡和自噬的关系

目的探讨四跨膜蛋白家族成员1(TM4SF1)对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、凋亡和自噬的影响及机制。方法将CNE-2细胞分为si-TM4SF1组、si-NC组、LY3200882组、TGF-β1组、Control组。采用MTT法检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞侵袭能力;流式细胞仪检测细胞凋亡能力;单丹磺酰尸胺(MDC)检测细胞自噬能力;蛋白质印迹检测细胞中TGF-β1、ERK1/2、p-ERK1/2、LC3Ⅱ、LC3Ι、p62、Beclin1蛋白表达。结果和Control组相比,si-TM4SF1组和LY3200882组细胞中TM4SF1 mRNA表达、增殖、侵袭能力降低,细胞凋亡率和自噬小体荧光强度增加(P<0.05);和si-TM4SF1组相比,TGF-β1组细胞中TM4SF1 mRNA表达、增殖、侵袭能力增加,细胞凋亡率和自噬小体荧光强度降低(P<0.05)。和Control组相比,si-TM4SF1组和LY3200882组细胞中TGF-β1、p62蛋白及p-ERK1/2/ERK1/2比值降低,Beclin1蛋白及LC3Ⅱ/LC3Ι比值增加(P<0.05);和si-TM4SF1组相比,TGF-β1组细胞中TGF-β1、p62蛋白及p-ERK1/2/ERK1/2比值增加,Beclin1蛋白及LC3Ⅱ/LC3Ι比值降低(P<0.05)。结论低表达TM4SF1可能通过调控TGF-β1/ERK1/2信号抑制鼻咽癌细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡和自噬。

乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平变化及其临床意义

目的探讨乳腺癌患者血清癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)、四跨膜蛋白超家族成员1(TM4SF1)水平变化及其临床意义。方法选择女性乳腺癌患者100例(观察组)、体检健康的女性志愿者50例(对照组),采集空腹外周静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3。分析乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平与临床病理特征的关系,采用受试者工作特性(ROC)曲线分析血清CEACAM1、TM4SF1水平对乳腺癌的诊断价值。结果观察组血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3水平均显著高于对照组(P均<0.01)。乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平与组织分化程度、TNM分期、局部或远处转移有关(P均<0.05),而与年龄、肿瘤直径、病理类型、雌激素受体、孕激素受体无关(P均>0.05)。血清CEACAM1、TM4SF1水平单独和联合诊断乳腺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.770、0.787、0.872,血清CEACAM1、TM4SF1水平联合诊断乳腺癌的AUC大于二者单独(P均<0.05)。结论乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平升高,且其水平与组织分化程度、TNM分期、局部或远处转移有关;CEACAM1、TM4SF1可作为诊断乳腺癌的血清生物学标志物。

miR-323a-3p通过靶向结合TM4SF1而调控NSCLC A549细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:探究miR-323a-3p、四次穿膜蛋白超家族成员1(TM4SF1)在NSCLC组织和细胞中的表达及两者间的靶向调控关系,观察两者表达对A549细胞增殖、迁移、侵袭和裸鼠移植瘤生长的影响。方法:收集2014年1月至12月间青海省人民医院手术切除的20例NSCLC组织及其相应的癌旁组织,qPCR和WB法检测癌组织中miR-323a-3p、TM4SF1 mRNA和TM4SF1蛋白的表达。向A549细胞转染miR-323a-3p mimic,采用MTT法、Transwell法、WB法检测miR-323a-3p过表达对细胞的增殖、迁移和侵袭以及TM4SF1、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响。采用生物信息学预测工具StarBase和双荧光素酶报告基因实验分析miR-323a-3p与TM4SF1靶向关系。将si-TM4SF1转染至A549细胞,以及分别将miR-323a-3p mimic与pcDNA或pcDNA-TM4SF1共转染A549细胞,评估细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化;同时建立各组细胞的BALB/c裸鼠移植瘤模型,在14、21和28 d时测量并计算移植瘤体积。结果:与癌旁组织相比,NSCLC组织中miR-323a-3p表达水平明显下调,TM4SF1 mRNA和蛋白表达水平显著上调(均P<0.01)。miR-323a-3p过表达或抑制TM4SF1表达都会降低A549细胞的增殖、迁移、侵袭能力及cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达而促进p21蛋白表达,并且抑制A549细胞裸鼠移植瘤的生长(均P<0.01)。生物信息学StarBase工具预测和双荧光素酶基因报告实验结果显示miR-323a-3p能够靶向结合TM4SF1基因并调控TM4SF1的表达。上调TM4SF1表达后,miR-323a-3p过表达对A549细胞恶性生物学行为及cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达、移植瘤生长的抑制作用均被部分逆转(均P<0.01),对p21蛋白表达的促进作用也被逆转(P<0.01)。结论:miR-323a-3p通过靶向下调肺癌A549细胞中TM4SF1的表达抑制细胞的增殖、迁移、侵袭和裸鼠移植瘤生长。

复发性脑胶质瘤组织TM4SF1 mRNA、ZnT1 mRNA、miR-542-3p表达与细胞增殖侵袭恶性行为的关系及预测预后的效能

目的探讨复发性脑胶质瘤组织四跨膜超家族成员1蛋白(TM4SF1)mRNA、锌转运体1(ZnT1)mRNA、miR-542-3p表达与细胞增殖侵袭恶性行为的关系及预测预后的效能。方法选取2016年3月至2020年3月我院收治的169例复发性脑胶质瘤患者,根据6个月预后情况分为死亡组、生存组。比较2组基线资料、组织TM4SF1 mRNA、ZnT1 mRNA、miR-542-3p表达,并比较不同TM4SF1 mRNA、ZnT1 mRNA、miR-542-3p表达者脑胶质瘤WHO分级,采用Cox比例风险回归模型分析预后相关因素,受试者工作特征曲线(ROC)及ROC下面积(AUC)分析各指标预测预后的效能,卡普兰-迈耶(Kaplan-Meier,KM)生存曲线分析不同TM4SF1 mRNA、ZnT1 mRNA、miR-542-3p表达水平者生存率。结果死亡组距离首次手术时间、脑胶质瘤WHO分级、肿瘤切除程度、TM4SF1 mRNA、ZnT1 mRNA、miR-542-3p表达与生存组比较,差异有统计学意义(P<0.05);以2组TM4SF1 mRNA、ZnT1 mRNA、miR-542-3p表达均值为分界进行分层,TM4SF1 mRNA、ZnT1 mRNA、miR-542-3p高表达与低表达患者脑胶质瘤WHO分级比较,差异有统计学意义(P<0.05);Cox比例风险回归模型将距离首次手术时间、脑胶质瘤WHO分级、肿瘤切除程度控制后,TM4SF1 mRNA、ZnT1 mRNA、miR-542-3p仍与患者预后相关(P<0.05);TM4SF1 mRNA+ZnT1 mRNA+miR-542-3p预测预后的AUC为0.938,大于单一指标预测(P<0.05);TM4SF1 mRNA、ZnT1 mRNA、miR-542-3p高危患者患者生存率低于低危达者(P<0.05)。结论脑胶质瘤组织TM4SF1 mRNA、ZnT1 mRNA、miR-542-3p表达与细胞增殖侵袭恶性行为关系密切,是预后的主要影响因素,三者联合可为临床预测预后提供参考依据。