BPDE-DNA加合物体外生成实验研究

目的:探讨体外合成苯并(a)芘与DNA形成加合物的条件。方法:以一定比例混合苯并(a)芘丙酮溶液、DNA溶液、S9混合液、于37℃孵育24 h后,紫外分光光度计扫描DNA图谱,得出DNA结构改变的信息;同时用HPLC检测反应体系中的苯并(a)芘含量、苯并(a)芘代谢物及DNA加合物酸水解后的产物。确定BPDE-DNA加合物生成,质谱验证生成物的结构。结果:反应后DNA紫外最大吸收峰红移;HPLC检测发现孵育后反应体系中苯并(a)芘含量降低,反应管有新的物质生成;质谱分析生成物的分子量同于目标产物。结论:一定条件下体外可合成苯并(a)芘-DNA加合物。

双壳类水产品中(+)-anti-BPDE-DNA加合物HPLC/FD检测

目的建立检测双壳类水产品中（＋）-反-7，8-二羟基-9，10-环氧苯并（a）芘（BPDE）-DNA加合物的高效液相色谱荧光法（HPLC／FD）。方法用组织基因组DNA提取试剂盒提取6种双壳类水产品组织中的DNA，0．1mol／LHCl、90℃酸解4h，乙酸乙酯充分萃取酸解产物——苯并（a）芘一四醇。以CenturySILC18-BDS色谱柱（150mmX4．6mm，5Ixm）分离；洗脱流动相：V（甲醇）／V（水）=55／45；流速：1．0mL／min；进样量：20μL；激发波长：265nm，发射波长：395nm；荧光检测苯并（a）芘-四醇的含量。结果该方法的检测限为0．3ng／mL，在0．5～100ng／mL范围内呈良好的线性关系（，=0．9960）；日内相对标准偏差（RSD）为2．8％～4．2％，日间RSD为3．2％-5．8％；双壳类水产品中（＋）-anti—BPDE—DNA含量为13．44～152．7μg／kg，RSD为3．0％-6．5％．加标回收率为86．9％-91．6％，RSD为3．1％～7．3％。结论该法简便、快速、灵敏度高，可用于双壳类水产品中（＋）-anti—BPDE—DNA加合物的检测。