回旋引导受体1在丙戊酸钠诱导神经干细胞分化过程中的表达和作用

目的探讨丙戊酸钠(VPA)诱导神经干细胞(NSCs)向神经元分化过程中回旋引导受体1(Robo1)的表达及作用。方法分离培养SD大鼠海马NSCs,正常NSCs和应用VPA处理NSCs各提取自10只SD大鼠。应用VPA处理后,免疫荧光技术检测NSCs向神经元标志物β-微管蛋白Ⅲ(Tuj1)阳性神经元分化的比例;利用基因芯片技术检测正常NSCs和VPA处理后NSCs中差异表达mRNA并进行生物信息学分析;通过Real-time PCR、Western blotting检测VPA诱导NSCs分化过程中Robo1 mRNA和蛋白的表达情况;Real-time PCR检测诱导分化后NSCs中Robo1 mRNA的动态变化;应用小干扰RNA下调NSCs中Robo1,Western blotting检测Robo1蛋白的表达情况,Real-time PCR和免疫荧光技术检测NSCs中神经元特异性标志物Tuj1和微管相关蛋白2(MAP-2)表达情况。结果应用VPA处理NSCs可促进其向神经元分化;VPA处理组与对照组相比,Robo1 mRNA和蛋白的表达显著上调;NSCs诱导分化过程中Robo1表达水平逐渐上升;干扰Robo1表达后,VPA诱导NSCs分化过程中Robo1上调受到抑制,VPA诱导NSCs向神经元分化的比例减少。结论VPA或通过上调Robo1的表达促进NSCs向神经元分化。