回阳固本汤促进异基因造血干细胞移植后自然杀伤细胞重建的机制研究

目的:探讨回阳固本汤对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后自然杀伤细胞(NK细胞)重建与NK细胞活性的影响及其分子调控机制。方法:(1)临床研究。选取2021年7月至2022年9月于该院行allo-HSCT的患者40例,根据治疗方式分为对照组(n=20)与HYGB组(n=20)。对照组患者仅采用allo-HSCT单独治疗,HYGB组患者于allo-HSCT前采用回阳固本汤干预4周。allo-HSCT治疗后对两组患者进行疗效评估,检测两组患者外周血NK细胞计数、外周血NK细胞标志分子CD56与CD16的表达,分离两组患者外周血NK细胞,体外培养测定细胞活性,检测磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路蛋白表达情况。(2)体外细胞实验。从健康体检者外周血中分离培养NK细胞,分为对照组(阴性对照)、HYGB组(回阳固本汤干预)与LY294002组(回阳固本汤+PI3K抑制剂LY294002干预),测定三组细胞活性与凋亡情况。结果:(1)对照组患者造血重建良好率为90%(18/20),复发率为10%(2/20),非移植相关死亡率为5%(1/20);HYGB组患者造血重建良好率为100%(20/20),复发率为5%(1/20),未出现死亡,两组患者疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05)。但HYGB组患者急性移植物抗宿主病(aGVHD)发生率(10%,2/20)显著低于对照组(45%,9/20),外周血NK细胞比例及CD56、CD16表达量显著高于对照组,NK细胞体外增殖活性高于对照组,凋亡率低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,HYGB组患者NK细胞内PI3K/Akt通路显著激活,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与HYGB组相比,LY294002组NK细胞增殖活性降低,凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05),LY294002逆转了回阳固本汤在体外促进NK细胞活性的效果。结论:回阳固本汤通过激活PI3K/Akt通路促进allo-HSCT后NK细胞重建与活性维持。