不同性别脑出血与凝血因子ⅩⅢAPro564Leu基因多态性的关系

目的探讨人凝血因子ⅩⅢA亚单位(FⅩⅢA)Pro564Leu基因多态性与不同性别原发性脑出血的关系,FⅩⅢAPro564Le在两性间的突变频率。方法应用聚合酶链反应和限制性片断长度多态性技术,对54例男性和26例女性原发性脑出血患者及55例男性和25例女性健康对照者FⅩⅢA第12号外显子Pro564Leu基因多态性进行检测。结果男性脑出血组Leu564等位基因频率(23.15%)明显高于男性对照组(4.55%)(P<0.01),女性脑出血组Leu564等位基因频率(23.08%)亦高于对照组(6.00%)(P<0.05),男性脑出血组与女性脑出血组之间、男性对照组与女性对照组之间FⅩⅢAPro564Le基因型和等位基因频率分布无显著差异(P>0.05)。结论 FⅩⅢAPro564Leu突变可增加男性及女性脑出血的危险性。男女脑出血发病率不同可能与Pro564Leu多态性无关。

凝血因子ⅩⅢA基因Arg77Cys错义突变和Arg174stop无义突变致凝血因子ⅩⅢ缺陷的分子机制

本研究以凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)基因突变为研究的切入点,从分子水平研究这些突变致病的机制。构建野生型FⅩⅢA重组表达质粒,用定点突变方法获得含有2种突变(Arg77Cys及Arg174stop)的FⅩⅢA重组表达质粒。分别将上述重组质粒通过脂质体介导的基因转移方法转染到COS-7细胞表达;用发色底物法检测转染细胞中FⅩⅢ活性,荧光定量RT-PCR、Western blot及酶联免疫吸附实验(ELISA)检测转染细胞中人FⅩⅢA的RNA表达水平和蛋白表达量。结果表明:含有2种突变(Arg77Cys及Arg174stop)的FⅩⅢA重组质粒转染组FⅩⅢA mRNA相对表达丰度分别为0.82±0.21和0.76±0.17,与野生型FⅩⅢA重组质粒转染组(1.06±0.51)比较没有显著性差异(p>0.05)。野生型FⅩⅢA重组质粒转染细胞裂解物中FⅩⅢ活性为(61.6±30.4)%,浓缩的细胞培养上清液中FⅩⅢ活性为(24.0±2.9)%,而2种突变型FⅩⅢA重组质粒转染细胞裂解物及培养上清液FⅩⅢ活性明显减低。转染细胞裂解物的Western blot分析显示,含Arg77Cys错义突变的FⅩⅢA重组蛋白在培养细胞内含量明显减低,仅见1条微弱的条带。ELISA证实,野生型FⅩⅢA重组质粒转染细胞裂解物中FⅩⅢA∶Ag量为(32.8±14.5)%,浓缩的细胞培养上清液中FⅩⅢ∶Ag量为(13.2±2.3)%。而2种突变型FⅩⅢA重组质粒转染细胞裂解物及培养上清液中FⅩⅢA∶Ag水平极度减低,低于ELISA检测低限。结论:FⅩⅢA Arg77Cys错义突变和Arg174stop无义突变未导致FⅩⅢA mRNA水平的显著减低,但都可以导致FⅩⅢA蛋白水平的表达异常。在本研究先天性FⅩⅢ缺陷症患者中FⅩⅢA重度缺乏可能是FⅩⅢA Arg77Cys错义突变和Arg174stop无义突变的共同作用所致。

凝血因子ⅩⅢ检测的研究进展

凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)作用于凝血过程的末端,能够稳定纤维蛋白,避免凝块过早降解,对于维持止血至关重要。FⅩⅢ缺乏症是一种罕见的出血性疾病,可导致危及生命的出血,因此FⅩⅢ的检测方式对于遗传性和获得性FⅩⅢ缺乏症的诊断具有重要意义。实验室常规的凝血试验无法检测并诊断FⅩⅢ缺乏,故而需要有针对性的进一步评估。目前国内可用于FⅩⅢ缺乏症的实验室诊断的测定大致包括凝块溶解度测定、FⅩⅢ活性测定、FⅩⅢ抗原测定、分子遗传分析、凝胶电泳(SDS-PAGE)、FⅩⅢ自身抗体检测。其中,灵敏度较差的凝块溶解度测定方式,目前仍在我国和许多国家广泛应用。本文总结了目前常见的FⅩⅢ检测方式及检测原理,讨论了不同方法的优点和局限性,介绍了国际推荐的检测流程,有助于临床依据实际情况选用合理科学的检测方式,从而提高诊断水平。

遗传性凝血因子ⅩⅢ缺乏症2例及文献复习

遗传性凝血因子缺乏症(congenital factordeficiency,FCD)是一种极罕见的凝血障碍性疾病,其发病机制主要与凝血因子(factor,F)的A亚基基因(F13A1)和B亚基基因(F13B)突变有关,为常染色体隐性遗传性疾病^([1-2])。该疾病占罕见遗传性出血性疾病的4.7%,患病率约1/200万,男女均可罹患,近亲家庭出生的患儿更易发生^([3])。FCD常见临床表型为脐部出血、软组织血肿、伤口愈合时间延长、终身出血倾向及颅内出血等^([2])。本研究围绕南京医科大学附属儿童医院血液肿瘤科诊治的2例由F13A1基因突变导致的FCD患儿的临床资料展开,旨在通过全外显子测序明确遗传基因,深入分析其临床表型及基因突变特征。鉴于该疾病的罕见性,临床上极易漏诊或误诊。

获得性凝血因子ⅩⅢ缺乏伴静脉血栓病例及文献复习

获得性凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)缺乏罕见,可发生于消耗过多、合成减少或免疫抑制介导。该病多见于老年群体,临床出血症状重,可出现反复自发性出血,治疗困难,死亡率接近50%,常规凝血检查无异常,极易漏诊和误诊。本文报道1例获得性FⅩⅢ缺乏症伴深静脉血栓形成患者,诊断过程曲折,经免疫抑制治疗取得成功。通过病例分析及文献复习,为临床出凝血障碍疾病诊治提供临床诊疗思路。

凝血因子ⅩⅢ和细胞因子水平与脑卒中的相关性分析

目的探讨凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)和细胞因子在脑卒中患者血液中的变化及临床意义。方法以47例临床确诊的出血性脑卒中患者、183例临床确诊的缺血性脑卒中患者和50名体检健康者(对照组)为研究对象,检测各组FⅩⅢ、D-二聚体、抗凝血酶(AT)、纤溶酶原(PLG)水平,分析脑卒中与凝血系统指标的相关性。同时检测各研究对象白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,初步探讨细胞因子与脑卒中的相关性。结果出血性脑卒中和缺血性脑卒中患者的FⅩⅢ、PLG水平明显低于对照组(P<0.05),D-二聚体水平明显高于对照组(P<0.05),AT水平在2组间差异无统计学意义(P>0.05);出血性脑卒中患者D-二聚体水平高于缺血性脑卒中患者(P<0.05),FⅩⅢ、PLG、AT水平2组间差异无统计学意义(P>0.05)。出血性脑卒中和缺血性脑卒中患者IL-6、IL-10、TNF-α的水平均高于对照组(P<0.05);出血性脑卒中患者IL-6水平高于缺血性脑卒中患者(P<0.05),IL-10、TNF-α水平在2组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 FⅩⅢ、PLG、D-二聚体、IL-6、IL-10和TNF-α对脑卒中具有良好的辅助诊断价值,对早期诊断脑卒中、及早进行有针对性的治疗、降低脑卒中的致残率和致死率具有重要作用。

凝血因子ⅩⅢ基因多态性与肺血栓栓塞症的相关性研究

目的探讨FⅩⅢA亚基Val34Leu(100G/T)和B亚基His95Arg(8259A/G)多态性与肺血栓栓塞症(pulmonarythromboembolism,PTE)发生的相关性。方法采用病例对照研究。病例组为经核素肺通气/灌注扫描(V/Q)和/或螺旋CT肺动脉造影(computed tomography pulmonary angiography,CTPA)检查确诊的汉族PTE患者114例;对照组为与PTE患者同民族、性别、年龄相匹配的健康对照114人。应用酚-氯仿-异戊醇法提取基因组DNA。应用PCR-RFLP检测FⅩⅢA亚基Val34Leu(100G/T)和B亚基His95Arg(8259A/G)多态性。结果 FⅩⅢA亚基Val34Leu多态性等位基因G和T的频率在对照组和PTE组相同,分别为0.996、0.004;FⅩⅢB亚基His95Arg多态性等位基因A和G的频率在对照组分别为0.956,0.044,PTE组分别为0.987、0.013。基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律。FⅩⅢA亚基Val34Leu多态性,在PTE组和对照组均未检测到突变的纯合子TT基因型,各检测到1例突变的杂合子GT基因型,在2组间基因型分布相同。FⅩⅢB亚基His95Arg多态性,在PTE组和对照组均未检测到突变的纯合子GG基因型,AA、AG基因型在PTE组分布为111(97.4%)、3(2.6%),在对照组分布为104(91.2%)、10(8.8%),差异具有统计学意义(P=0.046)。相对于AA基因型而言,AG基因型有减低PTE发生危险的趋势OR=0.281(95%CI:0.046～1.050,P=0.046)。结论中国汉族人群中FⅩⅢA亚基Val34Leu多态性少见,该多态性可能对中国汉族人群PTE的发生影响很小。FⅩⅢB亚基His95Arg多态性,突变杂合子AG基因型有减低PTE发生危险的趋势。

凝血因子ⅩⅢ Val34Leu多态性与心脑血管疾病

凝血因子(F)是凝血途径最后一步的关键酶,在正常凝血过程中起着交联纤维蛋白的重要作用。近年的研究发现,位于Fa亚单位2号外显子上的34号密码子G→T突变,导致其所编码的缬氨酸转变为亮氨酸,即VaB4Leu多态性,与心脑血管疾病有明确的相关性。Leu34对防止脑梗死、心肌梗死的发生是一种保护因素,而对出血性卒中则可能是一种危险因素。

凝血因子Ⅷ/Ⅺ/ⅩⅢ多态性与人工关节置换术后凝血因子活性和深静脉血栓形成的相关性分析

目的探究凝血因子Ⅷ/Ⅺ/ⅩⅢ多态性与人工关节置换术后凝血因子活性及深静脉血栓形成的相关性。方法筛选100名健康志愿者和200例人工置换术后患者分别设为对照组和手术组,对FⅩⅢ/Val34Leu和FⅩⅢ/Pro564Leu基因型、突变率以及凝血因子Ⅷ/Ⅺ/ⅩⅢ活性进行检测,利用Logistic回归分析法对凝血因子Ⅷ/Ⅺ/ⅩⅢ多态性与人工关节置换术后凝血因子活性及深静脉血栓形成的相关性进行分析。结果手术组凝血因子Ⅷ/Ⅺ/ⅩⅢ活性较对照组均有所增强(P<0.05);手术组的凝血酶原时间、凝血酶时间、活化部分凝血活酶时间水平较对照组缩短(P<0.05),同时手术组的蛋白C含量上调(P<0.05),蛋白S含量、皮温和静脉血流速度下降(P<0.05)。Logistic回归分析结果表明,凝血因子Ⅷ/Ⅺ/ⅩⅢ是受试者术后凝血因子活性和深静脉血栓形成的影响因素。结论凝血因子Ⅷ/Ⅺ/ⅩⅢ多态性是人工关节置换术后凝血因子活性和深静脉血栓形成的影响因素,且具有正相关性。

凝血因子ⅩⅢ Val 34Leu多态性与血栓性疾病

凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)亦即纤维蛋白稳定因子,在机体生理性止血过程中起重要作用。既往对FⅩⅢ缺陷导致的出血性疾病方面研究较多,近年来发现FⅩⅢa亚单位2号外显子上的Val 34 Leu变异与血栓性疾病成负相关性,亦即ⅩⅢVal 34 Leu为血栓性疾病的一种保护因子。本文就该方面的研究进展作一综述。

免疫介导获得性因子ⅩⅢ缺乏症2例报道并文献复习

免疫介导获得性因子ⅩⅢ缺乏症是一种罕见的严重出血性疾病,常规止凝血检查(血小板计数、血小板功能、凝血五项和血管性假性血友病抗原等)结果均正常,因此临床上容易延误诊治。本研究报道我科2例免疫介导获得性ⅩⅢ因子缺乏症患者的临床特征及诊治经过,并进行相关的文献复习。

凝血因子ⅩⅢ基因突变与疾病的关系研究进展

凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)是凝血过程中最后一步关键酶。有活性的凝血因子Xa能催化可溶性纤维蛋白交联,形成不溶性纤维蛋白多聚体,从而稳定纤维蛋白凝块,使血凝块不易被纤溶酶降解。FX结构与功能有着密切的关系,FⅩⅢ基因突变可影响其结构,导致功能的改变,与疾病的发生密切相关。就FⅩⅢ结构、基因突变及其功能与疾病的关系进行综述。

凝血因子ⅩⅢ基因表达的调控及功能研究进展

凝血因子XⅢ(coagulation factor XⅢ,F XⅢ)是催化凝血过程的最后一个凝血因子,其不仅参与止血过程,而且与组织修复、伤口愈合、炎症、肿瘤、妊娠等病理生理过程密切相关。近年来通过基因分析和X-线结晶衍射图阐明了F XⅢ许多结构和功能的特性。本文就F XⅢ基因表达的调节及其功能进行综述。

获得性因子ⅩⅢ缺陷

1 病历摘要 患者周某,男,45岁。住院号98051。因左臀部瘀斑20余天于93.8.30步行入院。病人93年6月底发现左腹肿胀,在开平市人民医院确诊为“左肾纤维瘤”而接受“肿瘤摘除术”,术中。

凝血因子ⅩⅢVal34Leu多态性的研究进展

凝血因子ⅩⅢ(F ⅩⅢ)是参与凝血过程的最后一个凝血因子,也称纤维蛋白稳定因子。F ⅩⅢ-a亚单位基因第2外显子第34位核苷酸一个常见的G→T点突变,使距离凝血酶激活位点仅3个氨基酸残基的缬氨酸变为亮氨酸,即F ⅩⅢVal34Leu多态性,被认为是血栓性疾病的保护性遗传因素,但似乎可增加脑出血的危险性。本文综述了F ⅩⅢVal34Leu多态性与冠心病、脑梗死、外周动脉疾病、静脉血栓、脑出血、偏头痛、早期流产及先兆子痫等疾病的关系。

凝血因子ⅩⅢ与儿童急性白血病的相关研究进展

在过去的30年中,随着诊断和治疗药物的不断发展,急性白血病(acute leukemia,AL)患儿的结局有了显著改善[1]。但是,AL仍是一种异质性很强的疾病,在现有的治疗基础上继续对儿童AL进行更精确的风险的分类,将有助于个性化治疗的应用,并且可能开发出针对风险的更高效的治疗方法。

慢性鼻窦炎伴鼻息肉鼻黏膜中纤维蛋白交联和降解相关调控基因表达异常

目的研究慢性鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP)患者以及合并哮喘(asthma,AS)患者(CRSwNP+AS)鼻黏膜中纤维蛋白沉积及其相关调控基因的表达情况。方法利用免疫荧光染色评估鼻黏膜中纤维蛋白的沉积情况;利用实时荧光定量聚合酶链式反应检测纤维蛋白交联和降解相关调控基因的表达,以及糖皮质激素治疗后的基因表达变化。结果与对照组相比,CRSwNP鼻黏膜中有显著的纤维蛋白沉积,且呈交联状态,CRSwNP+AS组有更明显的纤维蛋白沉积。基因表达检测显示,促进纤维蛋白交联的基因-凝血因子ⅩⅢA1(factorⅩⅢA chain 1,F13A 1)和抑制纤维蛋白降解的基因-纤溶酶原激活物抑制物1(plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1)在CRSwNP和CRSwNP+AS组的表达均升高,并且F13A1在CRSwNP+AS组的表达较CRSwNP显著更高;促进纤维蛋白降解的基因-组织型纤溶酶原激活因子(plasminogen activator tissue type,PLAT)在CRSwNP+AS组的表达显著低于CRSwNP和对照组;尿激酶型纤溶酶原激活因子(plasminogen activator urokinase,PLAU)的表达在两种类型的CRSwNP中均上调。CRSwNP+AS患者经糖皮质激素治疗,可显著下调F13A1、上调PLAT的表达。结论CRSwNP患者鼻黏膜中存在大量纤维蛋白沉积,可能与纤维蛋白交联和降解相关基因的表达失调有关,合并AS患者鼻黏膜中F13A1和PLAT的表达失调更为明显。

5例儿童遗传性凝血因子ⅩⅢ缺陷症的临床资料分析

目的探讨遗传性凝血因子ⅩⅢ缺陷症(FⅩⅢD)的临床特征及诊疗要点。方法回顾性病例总结。分析2017年8月至2020年10月在首都医科大学附属北京儿童医院、广州市妇女儿童医疗中心、上海交通大学医学院附属新华医院3家三甲医院诊治的5例遗传性FⅩⅢD患儿的临床资料。结果5例遗传性FⅩⅢD患儿,男2例,女3例,均无阳性家族史,中位诊断年龄5岁(13天~12岁)。首次出血:4例(80%)生后脐部渗血,1例(20%)皮肤出血;并发症:1例因牙龈出血致牙齿脱落,1例球结膜出血致脱垂。5例血小板计数及常规凝血检测均正常。4例行FⅩⅢ定性检测,结果均为阳性。5例均存在F13A1基因突变:3例为纯合突变,2例为复合杂合突变;其中5个位点既往无报道:c.1347delC(p.T450Lfs*15);c.1352_1353del(p.H451Rfs*29);c.2015G>A(p.G672E);(c.799-1G>T);chr6:6224294-6224944。5例均曾接受新鲜冰冻血浆替代治疗,且可有效止血:1例规律预防治疗,4例接受按需治疗。随访时间为10月~4年,5例均存活。结论遗传性FⅩⅢD以出生时脐部出血、日常生活中皮肤黏膜反复出血为主要表现,出血症状轻重不一;对常规出凝血检测正常但反复出血的患儿需要进行FⅩⅢ相关检测,而进一步完善基因检测有助于诊断;开展有效的替代治疗可以有效防控出血。