胎衣不下奶牛miRNA-185靶向调控血管内皮生长因子A表达的研究

【目的】通过体内和体外试验检测miRNA-185及血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)在胎衣正常排出和胎衣不下(RFM)奶牛胎盘组织中的差异表达情况及VEGFA在奶牛母体胎盘组织中表达分布,验证及明确miRNA-185和VEGFA与奶牛胎衣不下发生密切相关并存在靶向调节关系,为深入研究miRNA-185在奶牛胎衣不下发生过程中的作用提供理论依据和试验基础。【方法】采用实时荧光定量PCR法检测胎衣正常排出及胎衣不下奶牛母体胎盘组织中miRNA-185及VEGFA基因表达情况,采用荧光原位杂交技术(FISH)检测VEGFA在母体胎盘组织的表达分布及mRNA的差异表达情况;采用双荧光素酶明确miRNA-185与VEGFA的靶向调节关系,采用实时荧光定量PCR及Western blotting检测体外转染miRNA185 mimics、miRNA-185 inhibitor及miRNA-185 NC后VEGFA mRNA及蛋白的差异表达情况。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,与胎衣正常排出奶牛相比,胎衣不下奶牛体内miRNA-185及VEGFA的表达水平均极显著下调(P<0.01);荧光原位杂交结果显示,VEGFA mRNA主要在奶牛子宫内膜上皮细胞中表达。VEGFA是miRNA-185的靶向调节蛋白。与阴性对照组相比,转染miRNA-185 mimics后VEGFA的mRNA及蛋白表达水平均极显著下调(P<0.01),转染miRNA-185 inhibitor后VEGFA的mRNA及蛋白表达水平均极显著上调(P<0.01)。【结论】胎衣不下奶牛母体胎盘组织内miRNA-185及VEGFA表达显著降低,VRGFA主要在子宫内膜上皮细胞中表达,miRNA-185可通过靶向调控VEGFA的表达参与奶牛胎衣不下的发生发展。

中风停颗粒对急性脑梗死大鼠NLRP3炎症小体及MMP-9、血管内皮生长因子A、表皮生长因子表达的影响

目的:探讨中风停颗粒对急性脑梗死(ACI)大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)炎症小体、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)及表皮生长因子(EGF)表达的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组和中药组,每组20只,中药组每只大鼠每次给予中风停颗粒0.51 mL/100 g,每日灌胃2次;空白对照组、模型组每只大鼠每次给予生理盐水0.51 mL/100 g,每日灌胃2次。连续干预7 d取材。以大脑中动脉线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型,采用Zea-longa 5分法评估大鼠神经功能,蛋白质印迹法检测大鼠脑组织NLRP3表达,酶联免疫吸附测定法检测血浆MMP-9、VEGF-A、EGF表达。结果:与模型组比较,中药组大鼠神经功能评分降低(P<0.05);与空白对照组比较,模型组、中药组大鼠脑组织NLRP3表达增强(P<0.05),血浆MMP-9、VEGF-A水平升高(P<0.01),EGF水平降低(P<0.01);与模型组比较,中风停颗粒组大鼠脑组织NLRP3表达水平降低(P<0.05),血浆VEGF-A、EGF水平升高(P<0.01),MMP-9水平降低(P<0.01)。结论:中风停颗粒可抑制ACI大鼠NLRP3炎症小体表达水平,减轻炎症反应,改善MMP-9、VEGF-A、EGF表达。

血管内皮生长因子A与小泛素相关修饰物特异性蛋白酶5在前列腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨血管内皮生长因子A(VEGFA)与小泛素相关修饰物特异性蛋白酶5(SENP5)在前列腺癌中的表达情况及临床意义。方法:使用GEPIA数据库,对VEGFA、SENP5基因的相关性及与前列腺癌病人的生存期进行分析;采用qRT-PCR、Western blotting从转录、蛋白质翻译水平检测肿瘤细胞中VEGFA、SENP5的表达情况;收集前列腺癌病人组织标本和临床资料,采用免疫组织化学法检测前列腺癌组织中VEGFA、SENP5的蛋白表达,分析其表达情况与肿瘤病人临床病理参数间的关系;使用STRING网站进行VEGFA、SENP5蛋白质互作网络图构建。结果:VEGFA与前列腺癌病人总生存时间有关(P<0.05),SENP5与病人总生存时间、无病进展生存时间均相关(P<0.05);与正常细胞相比,VEGFA与SENP5在前列腺癌细胞中mRNA、蛋白质均高表达(P<0.05);VEGFA与SENP5蛋白在肿瘤病理组织中可见淡黄色或棕黄色染色,VEGFA主要于细胞质中表达,SENP5主要于细胞核中表达;VEGFA强阳性表达与临床分期、有无远处转移相关(P<0.05),SENP5强阳性表达与Gleason评分、有无远处转移相关(P<0.05);VEGFA与SENP5间显著相关(P<0.01);SENP5可能通过SUMO1-HSP90AA1轴与VEGFA相互作用。结论:VEGFA、SENP5在前列腺癌中高表达,两者显著相关,且与肿瘤临床病理参数有关,可能是前列腺癌病人治疗的潜在靶点。

脑缺血后N-乙基马来酰亚胺敏感因子ATP酶失活致神经元自噬流障碍的病理机制

缺血性脑卒中是由脑血管梗塞引起的急性脑血管病,具有较高的发病率、致残率和致死率。研究发现,过度自噬或自噬不足均可导致细胞损伤。自噬包括自噬体的形成和成熟、自噬体与溶酶体融合、自噬底物在自噬溶酶体内的降解和清除,这些过程呈连续状态则称为自噬流。研究发现,脑缺血可导致自噬体与溶酶体间发生融合障碍,从而引发自噬流损伤。细胞内膜融合由3种核心组分介导,即N-乙基马来酰亚胺敏感因子(N-ethylmaleimide sensitive factor,NSF)ATP酶、可溶性NSF黏附蛋白(soluble NSF attachment protein,SNAP)及可溶性NSF黏附蛋白受体(soluble NSF attachment protein receptors,SNAREs)。当SNAREs介导自噬体与溶酶体融合后以非活性的复合体形式存留于自噬溶酶体膜,须被NSF再激活为单体后方可发挥新一轮的膜融合介导作用,而NSF是唯一可再激活SNAREs的ATP酶。新近研究表明,脑缺血可显著抑制NSF ATP酶活性,导致其对SNAREs再激活减少,这可能是自噬体与溶酶体间发生融合障碍并导致神经元自噬流损伤的病理机制。本文就NSF ATP酶失活导致SNAREs互作失调、自噬体与溶酶体融合障碍,以及蛋白水解酶向溶酶体的转运不足引发神经元自噬流障碍的病理机制进行阐述,并针对NSF ATP酶失活改善神经元自噬流的方法进行探讨,为提高脑卒中治疗提供参考并指明深入研究方向。

敲低线粒体转录因子A(TFAM)抑制人宫颈癌细胞及骨肉瘤细胞自噬及增殖、侵袭和迁移

目的研究线粒体转录因子A(TFAM)对宫颈癌HeLa细胞及骨肉瘤U2OS细胞的线粒体功能、自噬、增殖、侵袭、迁移的影响。方法HeLa、U2OS细胞转染TFAM小干扰片段(si-TFAM)下调TFAM表达,Mito-Tracker Red CMXRos染色结合激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位(MMP)、MitoSOX^(TM)Red标记法检测线粒体活性氧(mtROS)水平、实时定量PCR检测线粒体DNA(mtDNA)的表达,免疫荧光细胞化学染色检测自噬体数量的变化。Western blot法检测TFAM、微管相关蛋白1轻链3A/B(LC3A/B)、自噬相关基因2A(ATG2A)、ATG2B、ATG9A、锌指转录因子Snail、基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9的表达。CCK-8法、平板集落形成实验检测细胞增殖,Transwell^(TM)实验、划痕愈合实验检测细胞侵袭、迁移的变化。结果下调TFAM表达导致HeLa及U2OS细胞MMP减少,mtDNA拷贝数减少,mtROS产生量增加。LC3A/B蛋白含量较对照组明显下降,胞质内自噬体数量明显减少,自噬早期阶段蛋白ATG2B、ATG9A表达量明显减少。HeLa及U2OS细胞Snail、MMP2和MMP9蛋白表达均减少。干扰TFAM表达,抑制HeLa及U2OS细胞的增殖、侵袭、迁移能力。结论下调TFAM表达抑制线粒体功能,延缓自噬进程,降低宫颈癌细胞及骨肉瘤细胞的增殖、侵袭、迁移能力。

老年骨质疏松症患者血清CXC类趋化因子配体12和血管内皮生长因子A蛋白表达与肌少症的相关性

目的探究老年骨质疏松症(OP)患者血清CXC类趋化因子配体12(CXCL_(12))和血管内皮生长因子-A(VEGF-A)蛋白表达及其与肌少症的相关性。方法选取2021年6月至2023年1月在应急总医院就诊的192例老年OP患者为研究对象,并按照其是否并发肌少症分为肌少症组与非肌少症组。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清CXCL_(12)、VEGF-A蛋白表达水平;采用Pearson法分析患者血清CXCL_(12)、VEGF-A水平与四肢骨骼肌指数(SMI)之间的相关性。通过logistic回归分析老年OP患者肌少症的影响因素,用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CXCL_(12)、VEGF-A蛋白水平对老年OP患者合并肌少症的诊断效能。结果192例老年OP患者肌少症发生率为36.98%(71/192)。肌少症组患者血清CXCL_(12)、VEGF-A水平均低于非肌少症组患者(P<0.05)。老年OP并肌少症患者血清CXCL_(12)、VEGF-A水平均与SMI呈正相关(r=0.583,P<0.001;r=0.643,P<0.001)。肌少症组患者年龄≥70岁、体重指数(BMI)<24 kg/m^(2)、有糖尿病史、合并慢性肾病患者占比及收缩压(SBP)、舒张压(DBP)均高于非肌少症组(P<0.05),上肢脂肪含量、血清25羟基维生素D 3[25(OH)D 3]水平、钙含量、L_(1-4)平均骨密度、股骨颈骨密度均低于非肌少症组(P<0.05)。且多因素logistic回归分析结果显示,年龄≥70岁、有糖尿病史、高SBP、高DBP均为老年OP患者合并肌少症的危险因素(P<0.05),高上肢脂肪含量、血清25(OH)D 3、CXCL_(12)、VEGF-A水平、钙含量、L_(1-4)平均骨密度、股骨颈骨密度均是保护因素(P<0.05)。血清CXCL_(12)、VEGF-A水平联合诊断老年OP患者合并肌少症的ROC曲线下面积大于两者单独诊断(Z=2.554,P=0.011;Z=2.466,P=0.014)。结论血清CXCL_(12)与VEGF-A水平可作为老年OP患者合并肌少症的辅助诊断指标,两者联合检测的诊断效果更好。

外周神经损伤后的保护因子Adcyap1--促进外周神经再生并缓解疼痛

外周神经损伤(peripheral nerve injury,PNI)导致运动障碍和神经病理性疼痛。在临床PNI的治疗过程中,如何促进神经再生并缓解疼痛,至关重要。然而,现有的神经病理性疼痛模型并不能准确地模拟临床PNI。另外,科学家通常单独研究PNI神经再生和神经病理性疼痛,缺乏对两者内在联系的探讨。本研究目的:建立新的PNI模型,研究神经再生和神经病理性疼痛之间的内在联系,寻找潜在的治疗靶点。

补肾祛寒化湿方联合甲氨蝶呤对强直性脊柱炎患者疾病活动度及血清核心结合因子a1水平的影响

【目的】探究补肾祛寒化湿方(由骨碎补、杜仲、川续断、羌活、干姜、薏苡仁、怀牛膝等组成)联合甲氨蝶呤对强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)肾虚督寒证患者疾病活动度及血清核心结合因子a1(Cbfa1)水平的影响。【方法】将90例AS肾虚督寒证患者随机分为试验组和对照组,每组各45例。对照组给予甲氨蝶呤治疗,试验组在对照组的基础上加用补肾祛寒化湿方治疗,疗程为3个月。观察2组患者治疗前后巴氏强直性脊柱炎疾病活动指数(BASDAI)评分、巴氏强直性脊柱炎功能指数(BASFI)评分和血清Cbfa1、Ⅰ型胶原蛋白C末端肽(CTX-Ⅰ)、Dickkopf1蛋白(DKK1)水平的变化情况,并比较2组患者的临床疗效和不良反应发生率。【结果】(1)疗效方面,治疗3个月后,试验组的总有效率为97.78%(44/45),对照组为82.22%(37/45),组间比较(χ2检验),试验组的疗效明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)疾病活动度方面,治疗后,2组患者的BASDAI评分和BASFI评分均较治疗前明显降低(P<0.05),且试验组对BASDAI评分和BASFI评分的降低幅度均明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。(3)血清学指标方面,治疗后,2组患者的血清Cbfa1、CTX-Ⅰ、DKK1水平均较治疗前降低(P<0.05),且试验组对血清Cbfa1、CTX-Ⅰ、DKK1水平的降低幅度均明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。(4)不良反应方面,治疗过程中,试验组的不良反应发生率为6.66%(3/45),对照组为11.11%(5/45),2组患者的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】补肾祛寒化湿方联合甲氨蝶呤治疗AS肾虚督寒证患者疗效确切,能够有效控制患者的疾病活动度,降低血清Cbfa1表达水平。

lncRNA EBLN3P调节miR-340-5p/线粒体转录因子A轴对非小细胞肺癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA EBLN3P调节微小RNA-340-5p(miR-340-5p)/线粒体转录因子A(TFAM)轴对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法:使用NSCLC细胞系为研究对象。将A549细胞分为Ctrl组、si-NC组、si-EBLN3P组、si-EBLN3P+NC inhibitor组、si-EBLN3P+miR-340-5p inhibitor组,应用MTT、EdU、Transwell检测细胞增殖、迁移、侵袭;双荧光素酶报告基因实验验证EBLN3P、miR-340-5p、TFAM 3者间的靶向关系;分别检测TFAM、miR-340-5p、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达。结果:EBLN3P在肺癌组织和细胞中表达上调;在NSCLC细胞中,TFAM表达上调,miR-340-5p表达降低。抑制EBLN3P表达可显著抑制NSCLC细胞增殖、迁移与侵袭,且E-cadherin蛋白表达上升,N-cadherin蛋白表达下降。EBLN3P、TFAM与miR-340-5p存在靶向关系。结论:EBLN3P在NSCLC组织与细胞中呈高表达,抑制EBLN3P表达可通过调节miR-340-5p/TFAM信号轴,抑制NSCLC细胞增殖、迁移与侵袭。

血清凝溶胶蛋白、轴突生长抑制因子A水平与急性脑出血患者NIHSS评分的相关性及动态监测指导意义

目的:探讨血清凝溶胶蛋白(GSN)、轴突生长抑制因子A(Nogo-A)水平与急性脑出血患者NIHSS评分的相关性,动态监测其水平在临床中的指导意义。方法:选取我院2020年7月-2023年2月140例急性脑出血患者为研究对象,根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分设为重度缺损组、中度缺损组、轻度缺损组,另选取50例健康体检者为对照组。对比4组入院时及入院3d、7d、14d时血清GSN、Nogo-A水平;分析入院时血清各指标与NIHSS评分的相关性;对比不同预后患者入院3d、7d、14d时血清各指标水平;分析入院3d、7d、14 d时血清各指标不同水平发生预后不良的危险度。结果:入院时及入院3d、7d、14d时血清GSN水平比较:重度缺损组<中度缺损组<轻度缺损组<对照组,血清Nogo-A水平比较:重度缺损组>中度缺损组>轻度缺损组>对照组(P<0.05);入院时血清GSN与NIHSS评分呈负相关,血清Nogo-A与NIHSS评分呈正相关(P<0.05);入院3d、7d、14d时预后良好患者血清GSN水平高于预后不良患者,血清Nogo-A均低于预后不良患者(P<0.05);入院3d、7d、14d时血清GSN高水平患者发生预后不良的危险度较低;入院3d、7d、14d时血清Nogo-A高水平患者发生预后不良的危险度较高。结论:血清GSN、Nogo-A水平与急性脑出血患者与神经损伤程度密切相关,临床中动态监测血清GSN、Nogo-A水平对评估病情及预后具有重要临床意义。

子宫内膜巨噬细胞通过调控血管内皮生长因子A的表达影响胚胎着床

目的研究小鼠子宫内膜巨噬细胞(macrophages,Mφ)对血管内皮生长因子A(VEGFA)表达的影响,探讨其在胚胎着床过程中的作用。方法取第3.5(雌鼠交配后次日晨阴道见栓为第0.5)孕鼠30只,随机分为3组,实验组(E)、对照组(C)和空白组(B)。E组向左侧宫腔内注射消除巨噬细胞的药物:氯膦酸二钠脂质体(clodronate liposomes,CL),右侧注射磷酸缓冲盐脂质体(PBS liposomes,PL);C组向双侧宫腔内注射PL;B组向双侧宫腔内注射等体积灭菌PBS溶液。注射后48 h,获取第5.5小鼠子宫和卵巢,统计各单侧子宫的胚胎着床数。采用免疫组化技术检测子宫内膜、卵巢内Mφ数量,并观察着床位点和非着床位点VEGFA的表达变化。流式细胞学方法检测子宫F4/80+CD11b+Mφ相对百分比,观察注射CL对子宫Mφ的选择性抑制作用。结果流式细胞学和免疫组织化学方法均显示,E组左侧子宫注射氯膦酸二钠脂质体后,与E组右侧和C、B组比较,局部巨噬细胞被显著抑制(P<0.05),抑制率达74%。各组卵巢Mφ数量间则未见明显差异。E组左侧子宫的胚胎着床部位宫腔未闭合,平均胚胎着床数为2.20±1.81个,显著低于E组右侧5.10±1.91个(P<0.05)。在着床位点,伴随子宫Mφ受到抑制,子宫内膜的VEGFA蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论子宫内膜中的Mφ为胚胎着床所必需,其机制可能是通过调控VEGFA的表达,影响宫内膜容受性及胚胎着床。

降钙素经ERK-MAPK信号通路调控成骨细胞核心结合因子a1mRNA表达

目的研究降钙素对成骨细胞核心结合因子a1(cbfa1)mRNA表达情况以及细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在这一过程中的作用。方法取24 h内新生SD大鼠颅骨培养成骨细胞,分别加入不同浓度降钙素(0.01、0.1、1 ng/mL)和一定浓度ERK特异性抑制剂U0126进行干预,应用RT-PCR技术检测成骨细胞cbfa1 mRNA的表达情况;应用Western Blot-ting技术检测phos-ERK 1/2蛋白表达情况;采用Independent-Samples检验法分析比较各组间总体均值差异。结果加入0.01、0.1、1 ng/mL的降钙素干预后,成骨细胞表面cbfa1mRNA的表达随降钙素浓度的增加而增强,且中、高浓度组与空白对照组比较差异具有非常显著意义(P<0.01),此外降钙素刺激了phos-ERK1/2蛋白的表达。U0126可阻断以上所有效应。结论降钙素可上调成骨细胞cbfa1mRNA的表达,且ERK-MAPK信号通路参与了此过程。

血管内皮生长因子A在肾脏发育及肾脏疾病中的作用

肾脏血管系统对于正常肾功能的维持非常重要,血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)与肾脏血管系统的发育和多种肾脏疾病密切相关。研究表明,肾组织中VEGF-A表达下调可引起肾髓质微血管密度降低,造成肾组织局部缺氧,反馈性导致促红细胞生成素增多,造成红细胞增多症;而VEGF-A过表达则可导致肾脏纤维化、肾囊肿形成,促进肾脏疾病进展。因此,调控VEGF-A的表达可能影响肾脏疾病的发生与发展。本文对VEGF-A在肾脏血管系统发育和肾脏疾病中的作用进行综述,为肾脏疾病提供新的治疗策略。

线粒体转录因子A在非小细胞肺癌中的表达及其与临床病理因素的关系

线粒体转录因子A(TFAM)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达鲜有报道。本研究通过免疫组化方法检测TFAM在70例NSCLC中的表达情况,并进行Kaplan-Meier生存分析。结果提示TFAM高表达与NSCLC淋巴结转移相关,且可以作为1个生物学标记用于预测肿瘤的预后,为NSCLC的治疗提供了新的思路。

血浆血管内皮生长因子A水平与海南黎、汉族慢性阻塞性肺疾病人群的相关性

目的:通过比较不同因素下海南黎、汉族慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血浆中血管内皮生长因子A(VEGFA)水平,分析两族人群COPD与VEGFA的关系及不同危险因素下VEGFA与COPD之间的相关性。方法:2014年7月～2015年3月在海南选取249例COPD患者(黎族109例,汉族140例),分别测定血浆VEGFA蛋白水平,分析种族、性别、是否吸烟等因素对血浆VEGFA表达的影响,以及海南黎族和汉族人群血浆VEGFA表达水平与COPD的相关性。结果:黎族COPD患者血浆中VEGFA蛋白表达水平比汉族低(P<0.05);引起黎族患者血浆VEGFA表达水平升高的原因包括呼吸系统感染、COPD急性发作期;导致汉族患者血浆VEGFA表达水平升高的原因则包括COPD、吸烟及被动吸烟、频发呼吸系统感染、呼吸系统疾病家族史、频繁诱发咳嗽、短期呼吸道感染和COPD急性加重期。COPD急性加重期患者血浆VEGFA水平高于稳定期。结论:COPD患者血中VEGFA表达水平较对照组升高,并且在黎族和汉族中存在差异,VEGFA升高的原因在两族人群中不同,但均与COPD疾病分期密切相关。

体外培养人肠上皮细胞株接受脂多糖联合热打击后白细胞介素6、肿瘤坏死因子a的释放

背景:对于肠上皮细胞遭受高热和肠道细菌以及由细菌产生的内毒素等多重打击后经历了怎样的分子生物学变化,一直缺乏切实、可靠实验依据。目的:观察脂多糖联合热打击对人肠上皮细胞损伤及炎症因子白细胞介素6、肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子a释放的影响。方法:体外培养人肠上皮细胞株(SW 480),将3×105细胞种入实验用培养皿。实验分组为:对照组(37℃),热打击组(43℃2 h),脂多糖刺激组(1 mg/L脂多糖6 h),热打击联合脂多糖刺激组(43℃+脂多糖)。采用WST-1法观察细胞毒效应和细胞存活率;同时采用ELISA法观察各组炎症因子白细胞介素6和肿瘤坏死因子a水平。结果与结论:与对照组相比,热打击组具有细胞毒效应,其细胞活率明显下降,细胞炎症因子白细胞介素6和肿瘤坏死因子a水平也有所增高。脂多糖组单独作用也具有细胞毒效应,细胞活力、细胞增殖率也明显下降,同时白细胞介素6和肿瘤坏死因子a水平明显升高。而热打击和脂多糖联合打击后,可观察到两者的协同作用。结果说明,热打击和脂多糖单独作用均可引起细胞损伤,增加炎症因子白细胞介素6和肿瘤坏死因子a表达,并且二者之间存在协同效应。实验结果为理解重症中暑病理过程中,肠道功能障碍、肠道细菌和内毒素移位进而引发多脏器功能衰竭的病理机制提供了客观的实验依据。

梗死心肌侧枝血管形成与缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子A表达水平的关系及临床意义

目的：探讨冠状动脉慢性完全闭塞（chronic total occlusion,CTO）后梗死心肌中侧枝血管形成与缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor 1-alpha,HIF-1α）及血管内皮生长因子A（vascular endothelial growth factor A,VEGF-A）表达水平的关系及其临床意义。方法：连续收集经冠状动脉造影明确为完全闭塞病变者214例,结合患者的临床表现及（或）影像学资料,确诊为CTO者89例。采用ELISA法检测HIF-1α和VEGF-A的蛋白水平;提取外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,用定量PCR法测定PBMC中VEGF-A的mRNA水平。采用JMP9.0和SPSS18.0统计软件进行统计学处理。结果：比较各组糖尿病患者比例,Rentrop 2级组（11/31,35.5%）和3级组（3/20,15.0%）显著低于0-1级组（18/38,47.4%）,P〈0.05;比较各组的空腹血糖水平,Rentrop 2级组（6.67±1.41）mmol/L）和3级组（5.48±1.26）mmol/L）显著低于0-1级组（7.24±1.39）mmol/L）,P〈0.05;比较各组患者中临床心衰（NYHAⅡ-Ⅳ级）的比例,Rentrop 2级组（12/31,38.7%）和3级组（3/20,15.0%）显著低于0-1级组（20/38,52.6%）,P〈0.05;比较各组HIF-1α和VEGF-A的蛋白水平,Rentrop 2级组[（85.5±27.7）pg/mL,（139.5±42.1）pg/mL]和3级组[（103.3±30.2）pg/mL,（162.6±43.3）pg/mL]显著高于0-1级组[（42.0±16.1）pg/mL,（76.5±32.2）pg/mL],P均〈0.01;比较各组HIF-1α和VEGF-A的mRNA水平,Rentrop 2级组（1.31±0.46）和3级组（1.38±0.44）VEGF-A的mRNA相对表达水平显著高于0-1级组（1.00±0.28）,P〈0.01。结论：慢性持续缺血、缺氧所导致的HIF-1α和VEGF表达增加在促进冠状动脉侧枝循环的建立、增加心肌血供、改善预后、减少临床心功能不全的发生率方面具有重要意义。

活血除痹汤对硬皮病小鼠皮肤血小板衍生生长因子A和转移生长因子-β表达的影响

目的观察活血除痹汤对硬皮病小鼠皮肤血小板衍生生长因子A(PDGF-A)和转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法 30只小鼠随机分为空白组、模型组和中药高、中、低剂量组,每组6只。除空白组外,其余各组小鼠均予皮内注射盐酸博来霉素0.1 m L,连续3周,建立硬皮病小鼠模型。第4~7周,空白组和模型组予等量蒸馏水灌胃,中药高、中、低剂量组分别给予活血除痹汤44.8、22.4、11.2 g/(kg·d)灌胃,每日1次。观察各组小鼠皮肤及肺组织病理学改变,HE染色测量皮肤厚度,免疫组化检测皮损组织PDGF-A、TGF-β和Ⅰ、Ⅲ型胶原(COL-Ⅰ/COL-Ⅲ)的蛋白表达。结果模型组小鼠真皮明显增厚,胶原纤维明显增粗,并有炎性细胞浸润;肺组织可见肺泡间隔增厚,有成纤维细胞形成并伴大量单核细胞浸润;与模型组比较,中药各剂量组皮肤厚度、真皮胶原纤维膨大增厚程度及肺泡间隔增粗程度均有所减轻。模型组PDGF-A、TGF-β、COL-Ⅰ及COL-Ⅲ蛋白表达均较空白组明显增加(P<0.01);中药各剂量组上述指标阳性表达均较模型组明显降低(P<0.01)。PDGF-A、TGF-β表达与COL-Ⅰ、COL-Ⅲ表达呈正相关。结论活血除痹汤可能通过抑制PDGF-A、TGF-β的表达,抑制胶原表达和成纤维细胞的生成,达到治疗硬皮病的作用。

核心结合因子a1在小鼠牙齿发育过程中的表达

目的 :观察Cbfa1蛋白在小鼠牙胚发育过程中的表达情况。方法 :用自制的Cbfa1多克隆抗体 ,采用免疫组化染色观察其时空表达特性。结果 :Cbfa1蛋白在帽状期牙胚中表达较广泛 ,在钟状早、中期牙胚表达于内釉细胞、成釉细胞以及紧靠成牙本质细胞层的牙乳头细胞 ,而在钟状晚期 ,Cbfa1在牙乳头表达为阴性 ,成牙本质细胞层弱阳性 ,成釉细胞为阳性或强阳性。结论 :Cbfa1可能在小鼠牙胚发育 ,尤其是在成牙本质细胞和成釉细胞分化过程中具有重要作用。