小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)活性区cDNA在毕赤酵母中分泌型表达

由小鼠骨组织提取总RNA ,采用RT PCR扩增得到小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)活性区域cDNA .将该cDNA片段克隆入表达载体pPIC9,重组载体转化巴斯德毕赤酵母GS115细胞 ,筛选Mut+表型 ,经甲醇诱导实现目的基因的分泌型表达 .Tricine SDS PAGE显示 ,表达产物约 2 6kD ,经Western印迹鉴定 ,表达产物可被RANKL抗体识别 .采用硫酸铵盐析、CM SephadexC 2 5层析纯化重组蛋白 .经测定 ,发酵液上清重组蛋白表达量约 11mg L .采用破骨细胞样细胞(osteoclastlikecell,OLC)诱导分化实验检测重组蛋白的生物活性 ,证实该重组蛋白可以促进OLC的生成 。

核因子KB受体活化因子配体、护骨素在不同月龄雄性大鼠股骨的表达

目的研究核因子KB受体活化因子(receptor activator of NF-KB,RANK)及核因子KB受体活化因子配体(receptoractivator of NF-KB ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegrin,OPG),在不同月龄雄性大鼠股骨表达的变化,探讨αD3对老龄大鼠RANK、RANKL、OPG表达的影响。方法将6周龄、6月龄、24月龄、24月龄+αD3组Wistar大鼠分为甲、乙、丙、丁4组,每组15只。其中丁组为24月龄+αD3组,按0.05μg/kg/d-1灌胃,隔天1次,每周3次。连续10周。取左侧股骨远中干骺端1/2,采用RT-PCR测RANKL、RANK及OPG的mRNA的表达。取右侧股骨做免疫组化。结果与6周组相比,6月和24月组RANKLmRNA分别增加6.2倍和7.3倍,(P<0.05),OPGmRNA值随月龄逐步增加(P>0.05)。24月龄+αD3组较24月龄组RANK降低(P<0.05)、RANKL/OPG比值亦降低(P>0.05)。免疫组化结果显示RANKL、OPG表达于软骨和成骨细胞胞浆和胞核。24月龄+αD3干预组OPG表达较24月组增强。结论股骨RANKL/OPG值随月龄增加,有利于骨的吸收和转换;αD3有促进骨形成降低骨吸收的作用,其机制可能与降低RANK、RANKL/OPG比值有关。RANKL、OPG表达于同一类型的细胞,二者共同调节骨的代谢。

咀嚼力对青龄期大鼠牙槽骨胰岛素样生长因子-1、骨保护素、核因子kB受体活化因子配体蛋白表达的影响

分析不同强度力学刺激对青龄期大鼠牙槽骨IGF-1、OPG、RANKL蛋白表达的影响,探讨力学信号在牙槽骨骨重建中的传导,揭示力学刺激对牙槽骨骨重建的调节机制。喂食不同硬度饲料,建立大鼠牙槽骨不同力学刺激动物模型。40只SD大鼠随机分为2组,一组软食喂养,一组硬食喂养。大鼠分别在喂养2月、4月时分两次处死,显微CT检测下颌骨第三磨牙区牙槽骨骨组织形态计量学指标,Western blot方法检测IGF-1、OPG、RANKL蛋白质表达。经显微CT检查发现,硬食组大鼠牙槽骨骨体积分数、骨小梁数量等均较软食组组显著增加,骨小梁分离度降低,P<0.05;大鼠牙槽骨中IGF-1和OPG蛋白表达硬食组较软食组同时上调,并且它们的表达量呈正相关;RANKL表达硬食组较软食组降低;IGF-1和RANKL表达量呈负相关;4月组结果与2月组结果相比,IGF-1、OPG和RANKL蛋白表达量均有变化,但差异不显著。结果显示较高的咀嚼力能够促进大鼠牙槽骨的生长,促进牙槽骨中IGF-1和OPG的表达,抑制RANKL的表达,表明力学刺激能够影响IGF-1和OPG/RANKL两种分子系统的表达水平,两种分子信号通路存在关联协同性。IGF-1和OPG/RANKL两种分子信号系统是调节骨重建力学信号传导通路。

护骨素和核因子KB活化因子受体配体基因多态性与类风湿关节炎的相关性研究

目的探讨护骨素（OPG）基因rs2073618、rs3102735位点和核因子KB活化因子受体配体（RANKL）基因rs2277438位点单核苷酸多态性（SNP）及其外周血水平对类风湿关节炎（RA）患者疾病活动性及骨侵蚀的影响。方法采用连接酶检测反应方法检测101例RA患者OPG基因rs2073618、rs3102735位点和RANKL基因rs2277438位点SNP，ELISA法测定其外周血OPG和RANKL水平，采用Sharp评分评价其双手x线骨侵蚀。结果OPG基因rs2073618位点表达为纯合型RA患者（60例）比杂合型患者（40例）的关节压痛数（13±7比10±6，t=2．154，P=0．034）、关节压痛指数（19±11比13±9，t=2．318，P=0．023）、VAS评分（5．7±1．9比4．8±1．8，t=2．481，P=0．015）明显升高（P〈0．05）；RA患者OPG基因rs3102735位点SNP与其外周血OPG水平、病情活动性指标及Sharp评分无关（P〉0．05）。RANKL基因rs2277438位点表达为纯合型RA患者（62例）和杂合型（39例）间病情活动性指标比较差异无统计学意义（P〉0．05）；但杂合型RA患者外周血RANKL水平较纯合型明显升高（139±152比80±38，￡=2．152，P=0．038）、双手x线Sharp评分亦明显高于纯合型（68±66比40±45，t=2．194，P=0．032）。多元线性回归分析显示，RA患者Sharp评分与病程（卢=0．725，t=9．078，P〈0．01）、外周血RANKL／OPG比值（卢=0．166，t=2．104，P=0．039）、年龄（口=一0．179，t=2．274，P=0．026）呈直线相关（R。=0．570，F=33．137，P〈0．01）。结论OPG基因rs2073618位点SNP与RA患者的病情活动性有关，纯合型患者的病情更重；RANKL基因rs2277438位点SNP与RA患者骨侵蚀相关，杂合型患者外周血RANKL水平更高，骨侵蚀更重。

核因子κB受体活化因子配基在兔下颌骨牵引成骨过程中表达水平的变化

目的：研究骨保护素配体即核因子xB受体活化因子配基（RANKL）在下颌骨牵引成骨过程中不同时期的表达水平变化，探讨其在成骨过程中的机制。方法：在成年大耳白兔的一侧下颌骨前部行骨切开术，用牵引器延长一侧下颌骨4mm，另一侧下颌骨行骨切开，作为对照组，分别于牵引完成后的第1、7、14、21、28天处死一组动物，取牵引区新生骨痂行RANKL免疫组织化学显色，通过细胞图像分析仪测量牵引区新骨中RANKL表达情况，利用SPSS软件采用方差分析进行统计分析。结果：下颌牵引延长后牵引间隙均有新骨形成，免疫组织化学显色显示RANKL主要定位于骨髓基质细胞的胞质中，其中以稳定期的第1、14天的表达最强。在稳定期第1、14天，实验组较对照组RANKL表达的阳性细胞率及阳性面积百分比差异有统计学意义，以后逐渐下降，第28天仅有微弱表达。结论：RANKL可能在牵引成骨过程中特别是调控组织细胞应力信号传递的早期发挥破骨作用。

核因子κB受体活化因子对骨质吸收的影响

核因子κB受体活化因子(RANK)的研究多集中在它所参与组成的信号传导通路及其调节破骨细胞增殖分化作用的机制方面。RANK编码基因在转录、翻译最终形成有活性的RANK过程中受到多种因素的调节,其中任何一个环节的异常都会给破骨细胞的增殖分化带来影响,并最终导致出现以骨质吸收异常为特征的疾病。RANK与许多骨质破坏性疾病存在密切关系,近年在治疗这些疾病方面围绕RANK的研究逐步展开,并在体外试验中取得了很大进展,为进一步临床试验奠定基础。该文就近年RANK研究成果作一综述,并探讨控制异常骨质吸收的新途径。

正畸保持期龈沟液骨保护素/核因子kappa B受体活化因子配体水平对牙槽骨改建状态的意义

目的:探讨正畸保持期牙周龈沟液中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子kappa B受体活化因子配体水平(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)的变化及相应牙周组织OPG和RANKL表达的变化,为预测保持期牙周骨组织状态是否稳定提供依据。方法:选择6周龄雄性Wista大鼠15只,按时间点(T1:基线,T2:加力14 d,T3:停止加力14 d)分为3组,每组5只。在每个时间点先采集龈沟液样本,应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测OPG和sRANKL(soluble receptor activator of nuclear factor kappaB ligand)浓度,然后处死大鼠,采用免疫组织化学检测牙周组织中OPG和RANKL表达。结果:龈沟液中sRANKL浓度在T2期明显上升(P<0.05),T3期则显著下降(P<0.05),与T1期几乎相当。龈沟液中OPG浓度在3个时间点的变化差异均无统计学意义(P>0.05);龈沟液中sRANKL/OPG的比值和牙周组织RANKL/OPG的比值变化近似,均在T2期明显增大(P<0.05和P<0.01),在T3期显著减小(P<0.05)。结论:在正畸加力至保持期,龈沟液中sRANKL/OPG的比值可以在一定程度上反映牙周组织中骨改建的状态。

金雀异黄素对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞骨保护素/细胞核因子κB受体活化因子/细胞核因子κB受体活化因子配体通路的影响

目的研究金雀异黄素(genistein,Gen)对人类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/细胞核因子κB受体活化因子(receptor-activator of nuclear factor kappa bata,RANK)/细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor-activator of nuclear factor kappa bata ligand,RANKL)通路的影响及机制。方法培养人RA-FLS,并分为对照组(RA-FLS细胞)、TNF-α组(RA-FLS细胞+TNF-α10 ng/ml)、TNF-α+Gen组(RA-FLS细胞+TNF-α10 ng/ml+Gen 50μM)、Gen组(RA-FLS细胞+Gen 50μM)。应用免疫印迹检测Gen作用RA-FLS的RANK、RANKL、OPG、雌激素受体(estrogen receptorα,ERα)表达情况,免疫荧光检测ERα细胞内分布情况。结果 Gen组、TNF-α组及TNF-α+Gen组细胞内RANK蛋白表达量较对照组无明显差异(P>0.05),但OPG及RANKL蛋白表达明显高于对照组(均P<0.05)。Gen组OPG/RANKL较对照组增高(P<0.05)。Gen组、TNF-α组及TNF-α+Gen组细胞内ERα蛋白表达量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光结果显示核内ERα表达量增加。结论 Gen可能通过与雌激素受体结合,转入核内发挥免疫调节作用,从而调节OPG/RANKL/RANK通路,发挥抑制骨破坏的作用。Gen可以上调人RA-FLS中OPG及RANKL,且对OPG的上调作用更强。

不同熔附金属全冠对种植体周围组织中炎症因子、黏附分子、OPG/RANKL表达的影响

目的:研究不同熔附金属全冠对种植体周围组织中炎症因子、黏附分子、OPG/RANKL表达的影响。方法:选取在本院接受熔附金属全冠修复的90例患者纳入研究,包括镍铬合金修复、钴铬合金修复、金合金修复各30例,分别纳入镍铬合金组、钴铬合金组和金合金组,检测龈沟液中炎症因子、黏附分子、OPG/RANKL的表达情况。结果:(1)炎症因子:镍铬合金组龈沟液中白细胞介素-6(IL-6)、NO以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)含量均高于钴铬合金组和金合金组,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)黏附分子:镍铬合金组龈沟液中可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、可溶性血管黏附分子-1(sVCAM-1)、E型钙粘附分子(E-cadherin)含量均高于钴铬合金组和金合金组,差异具有统计学意义(P<0.05);(3)OPG/RANKL:镍铬合金组患者的RANKL含量、RANKL/OPG比例低于钴铬合金组和金合金组,OPG含量高于钴铬合金组和金合金组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:钴铬合金和金合金熔附金属全冠对牙周组织的刺激较弱,龈沟液中炎症因子、黏附分子含量以及OPG/RANKL比例较低。

Er,Cr:YSGG激光治疗对高糖环境下微螺钉周围炎症及对RANK/RANKL信号通路的影响

目的:探讨铒铬铱钪镓石榴石(Er,Cr:YSGG)激光治疗对高糖环境下微螺钉周围炎症治疗的疗效,并分析与RANK/RANKL信号通路的关系。方法:20只正常健康雄性新西兰兔随机分为A组(微螺钉周健康组)、B组(微螺钉周围炎症组)、C组(微螺钉周围炎症激光治疗组),皮下注射2%四氧嘧啶建立糖尿病模型,下颌双侧无牙区植入微螺钉种植体,3个月后,A组进行菌斑控制,B组、C组用丝线拴结于微螺钉种植体颈部基台处引入炎症,C组予以Er,Cr:YSGG激光治疗。记录菌斑指数、探诊深度、牙龈指数和龈沟液量;ELISA检测龈沟液炎性细胞白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;CBCT检查微螺钉种植体周围炎周围骨吸收状态;Western blot检测牙龈组织中核因子κB(NF-κB)/NF-κB受体性活化因子(RANK)/NF-κB受体活化因子配体(RANKL)通路相关蛋白表达。结果:CBCT检查显示与A组比较,B组微螺钉种植体周围牙槽骨有明显的炎性吸收,微螺钉种植体-骨界面愈合差,骨附着不足;与B组比较,C组一侧牙槽骨有少量新生纤维成骨。与A组比较,B组PI、PD、GI水平较高,龈沟液量较多,龈沟液中IL-1β、TNF-α和IL-6水平较高,牙龈中NF-κBp65、RANK、RANKL蛋白表达水平较高(P<0.05);与B组比较,C组PI、PD、GI水平较低,龈沟液量较少,龈沟液中IL-1β、TNF-α和IL-6水平较低,牙龈中NF-κBp65、RANK、RANKL蛋白表达水平较低(P<0.05)。结论:Er,Cr:YSGG激光治疗糖尿病兔颌骨微螺钉种植体周围炎的疗效显著,且在NF-κB/RANK/RANKL通路表达调控上可能发挥一定作用。

生骨胶囊对骨质疏松大鼠骨组织骨保护素及核因子KB受体活化因子配基表达的影响

目的:探讨生骨胶囊对骨质疏松大鼠胫骨组织中骨保护素(OPG)及核因子KB受体活化因子配基(RANK)表达的影响,分析其改善骨质疏松的作用机制。方法:建立36只骨质疏松大鼠模型,随机分为正常对照组、假手术组、模型组、生骨胶囊组、骨疏康颗粒组和尼尔雌醇片组,每组6只,生骨胶囊组予以生骨胶囊灌胃;其他组分别予等剂量生理盐水、骨疏康颗粒和尼尔雌醇片治疗。分别于给药后第3周和第6周每组随机抽取3只,处死大鼠取患处组织标本,采用染色后视野下的阳性表达部位的累积光密度和视野下样品面积的比值法测定大鼠骨组织中OPG和RANK的含量,对所得数据进行统计学分析。结果:生骨胶囊组大鼠在第3周及第6周末患处骨组织标本中OPG和RANK表达均优于其他组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:生骨胶囊可通过改善骨质疏松骨组织中OPG和RANK的表达,从而达到改善骨质疏松的作用。

RANKL/RANK/OPG通路在口腔相关领域的应用研究

核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of Nuclear factor-kappa B Ligand,RANKL)、核因子-κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-kappa B,RANK)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)作为肿瘤坏死因子家族的成员,通过RANKL/RANK/OPG信号通路调节破骨细胞发生及成熟,调控骨代谢,其表达水平直接影响骨质代谢与重塑,现被广泛研究。RANKL/RANK/OPG通路在口腔颌面部形成及改建过程中发挥了关键作用,直接或间接反映出口腔骨破坏类疾病的发生与发展状态。该通路的失衡往往伴随RANKL的增加和(或)OPG的减少,RANKL/OPG的比值影响破骨细胞的成熟及功能,但部分疾病中相关因子的表达水平存在争议,且尚无能应用于临床疾病诊疗的阈值。本文就RANKL/RANK/OPG信号通路调节机制及其在牙周炎、种植、牙齿发育、正畸、颌面部骨缺损修复与再生等口腔相关领域的研究现状进行综述,以进一步探讨口腔中骨代谢及骨破坏类疾病的调节机制,并评价相关因子作为生物标志物的诊断和预后潜力,以期指导临床诊疗及探寻可能的免疫调节靶点。

脂联素对人成骨细胞护骨素和核因子kB受体活化素配体表达的影响

目的探讨脂联素影响骨代谢的可能作用机制。方法体外培养人成骨细胞，（1）分别加入0、3、10和30mg／L的脂联素作用48h；（2）加入0或30mg／L脂联素分别作用12、24、48h；采用荧光定量PCR和ELISA方法检测护骨素和核因子KB受体活化因子配体（RANKL）的表达。另将人成骨细胞与CD14＋外周血单个核细胞（PBMC）共培养，加入30mg／L脂联素作用14d，行破骨细胞标志酶抗酒石酸磷酸酶染色。结果0、3、10和30mg／L的脂联素作用48h，成骨细胞护骨素mRNA和蛋白表达分别为100％±9％、68％±7％、47％±8％、30％±5％与（9．2±0．3）、（6．6±0．4）、（4．1±0．4）、（2．6±0．4）ng／ml，RANKLmRNA和蛋白表达分别为100％±5％、165％±8％、213％±6％、316％±10％与（1．3±0．2）、（2．1±0．1）、（2．3±0．2）、（2．8±0．1）ng／ml。脂联素对护骨素表达的抑制和对RANKL表达的促进作用均呈剂量和时间依赖性（P〈0．05）。脂联素干预成骨细胞与CD14＋PBMC共培养体系可诱导破骨细胞生成。结论脂联素可通过抑制护骨素表达、诱导成骨细胞RANKL表达，诱导破骨细胞生成，这可能是脂联素影响骨代谢的作用机制之一。

1，25-二羟维生素D3对初诊类风湿关节炎患者核因子κB受体活化因子配体／骨保护素通路及相关细胞因子的影响

【摘要】目的探讨1，25-二羟维生素D3[1，25（OH），D，]对初诊RA患者NF—KB受体活化因子配体／骨保护素（RANKL／OPG）通路及相关绑胞因子的作埔及其渝疗RA潜在的机制？方法选取初诊RA患者l8例，符合1987年ACR分类标准。健康对照18辊，来自我院医务人员的健康志愿者，其性圳和年龄均j-jRA患者相匹配、允离RA患者PBMCs，加抗CD3和CI）28刺激，l，25（OH），D，和（或）甲氨蝶呤共培养，流式细胞仪微球捕获芯片技术（CBA）检测IL-4、IL-6、TNF-α、IL-17A、[FN-γ，ELISA检测细胞RANKL骨保护素水平。采用正态性柃验和方差齐性检验，满足正态性和方差齐性条件，采用完全随机两样书，检验和单因素方差分析进行统计学处理。结果RA组lJ0【清RANKL[（100＋22）pmool／L、TNF—di（5．91±2．53）1）pg/ml] IL-17[（43±6）vg／mt]、IL-61（16．6±12．0）pg／m1]水平显著高于对照组，2组比较差异打统计学意义（P〈O．05）；RA组RANKL、TNF-d、IL-17、IL-6水平经不同浓度1，25（01f），D，处理的效果差异存统计学意义（P〈O．05），各组组问经多重比较差异无统计学意义；1，25（OH），I）、降低RA组IL-17／IL-4、TNF-α、IL-17A、[FN-γ 的比值.结论1，25（OH）2D3作为一种免疫渊节剂，对于RA软骨/骨损伤可能具有治疗作用．

电离辐射对成骨细胞核因子κB受体活化因子配体和骨保护素mRNA及其蛋白表达的影响

目的研究电离辐射对成骨细胞RANKL和OPG表达的影响，探讨辐射导致骨损伤的分子机制。方法采用MC3T3-E1细胞诱导分化为成骨细胞，经0、2和4Gy137cs1射线照射后，采用实时定量PCR及Westernblot方法检测电离辐射对于成骨细胞RANKL和OPGmRNA及其蛋白水平表达的影响。结果4Gy照射可以导致成骨细胞RANKLmRNA（t=5．41，P〈0．05）及其蛋白（t=68．37，P〈0．01）表达水平上调；2和4Gy照射可以导致成骨细胞OPGmRNA（t=5．20、7．02，P〈0．05）及其蛋白（t=7．78、9．45，P〈0．05）表达水平下调。结论2和4Gy电离辐射可以导致成骨细胞中RANKL／RANK／OPG通路发生改变，促进破骨细胞的分化和成熟，进而促进破骨细胞的骨吸收作用。

基于RANKL/RANK/MMP-9通路探讨骨质疏松症的发生机制

骨质疏松症现已成为危害国民健康的重要公共问题,由骨质疏松症及其并发症引发的死亡率已排名第四,骨质疏松症形成的主要原因是骨形成与骨吸收的平衡被打破,核因子受体活化因子配体/核因子受体活化因子(RANKL/RANK)通路是骨代谢中与骨吸收相关的主要传导通路,金属蛋白酶(MMP-9)是RANKL/RANK通路的下游因子,在破骨细胞中表达。多项研究表明RANKL/RANK/MMP-9与骨质疏松症发生的机制相关,本文将从该通路与骨质疏松症的发病机制进行综述。

敲除小鼠足细胞核因子-κB受体活化因子基因对尿蛋白的影响

目的探讨核因子-κB受体活化因子（RANK）在足细胞损伤中的作用及其对蛋白尿的影响。方法用Cre-LoxP重组酶系统建立足细胞RANK特异性敲除小鼠（RANK-/-，KO组），琼脂糖电泳法鉴定其基因型。设野生型小鼠（wT）和普通C57小鼠（各6只）为对照组。用脂多糖（LPS）腹腔注射方法建立短暂蛋白尿小鼠模型。检测各组小鼠尿白蛋白，尿肌酐等指标；模型建立后48h处死小鼠取肾脏行病理检查。免疫组化法检测肾脏足细胞数量；电镜下观察足细胞足突融合情况；免疫荧光法检测整合素（integrin）β1及integrinβ3等相关蛋白表达变化；Western印迹法检测integrinβ1、integrinβ3及尿激酶型纤溶酶原激活物受体（uPAR）等相关蛋白的表达变化。结果3组小鼠均于造模后第2天出现明显蛋白尿，KO组小鼠尿白蛋白／肌酐比值明显低于对照组wT组及C57组[（23．70±9．90）比（107．56±22．32）；（23．70±9．90）比（132．13±14．26），P〈0．0011，差异有统计学意义。免疫组化结果显示，造模后3组小鼠足细胞数量均有减少，KO组小鼠足细胞减少程度比其他两组轻。电镜结果亦显示，造模后KO组小鼠足细胞足突融合程度较对照组轻。免疫荧光结果显示，与造模前组相比，造模后各组小鼠肾组织integrinpl表达均有下降，KO组较对照组下降幅度更大；integrinB3表达升高，KO组升高幅度较对照组较少（均P〈0．05）。Western印迹结果显示，与造模前组相比，造模后各组小鼠。肾组织integrinB1表达均下降，KO组小鼠下降幅度更大；各组小鼠integrinB3及uPAR表达均升高，KO组升高幅度较其余两组较小（均P〈0．05）。结论敲除小鼠足细胞特异性RANK基因后可以减少LPS诱导的蛋白尿，提示RANK参与了由足细胞损伤导致蛋白尿的发生，其机制与调节integfinpl，integrin β3及uPAR等分子的表达有关。

丹蓝仙硼疗氟胶囊对氟中毒大鼠骨保护素/核因子κβ受体活化因子配体/核因子κβ受体活化因子系统表达水平的影响

目的 观察慢性氟中毒大鼠骨组织中骨保护素（OPG）、核因子κβ受体活化因子配体（RANKL）、核因子κβ受体活化因子（RANK）蛋白表达水平,探讨OPG/RAN KL/RANK系统与慢性氟中毒大鼠骨骼损伤的关系及丹蓝仙硼疗氟胶囊的拮抗作用.方法 将SD大鼠按体质量随机分为6组（组内雌雄各半）：氟中毒组、高剂量药物组、中剂量药物组、低剂量药物组、对照组、硼砂（阳性药物对照）组,每组12只.对照组饮用自来水,其余5个实验组饮用含氟水（50 mg/L）,而高、中、低剂量药物组另摄入丹蓝仙硼疗氟胶囊,剂量分别为0.8、O.4、O.2 g/kg,硼砂组另摄入硼砂,剂量为0.8 g/kg.6个月时用免疫组织化学方法检测OPG、RANKL、RANK蛋白在大鼠股骨干骺端的表达.结果 与对照组（173.79±5.23、174.17±5.O1、155.63±7.11）比较,氟中毒组大鼠股骨干骺端OPG、RANKL（156.83±5.80、157.74±6.70）表达增高,RANK（173.92±4.37）表达降低,差异有统计学意义（P均＜0.05）.与氟中毒组比较,高、中剂量药物组OPG、RANKL（169.67±5.07、168.08±5.05,170.78±5.01、168.41±7.19）表达降低,RANK（162.12±4.24、166.69±5.78）表达增高,差异有统计学意义（P均＜O.05）.与硼砂组（167.27±4.08、167.85±5.O1、166.14±3.95）比较,低剂量药物组OPG、RANKL（163.40±4.11、159.49±5.78）表达增高,RANK（171.54±8.06）表达降低,而高剂量药物组RANK（162.12±4.24）表达增高,差异有统计学意义（P均＜0.05）.结论 慢性氟中毒可引起成骨与破骨活动均增强的骨转换增高状态,并可通过改变OPG/RANKL/RANK系统表达影响骨吸收的程度.丹蓝仙硼疗氟胶囊能通过OPG/RANKL/RANK系统影响骨重建,对氟致骨损伤有拮抗作用.

miR-26a在血管钙化中的作用机制

目的探讨血管钙化过程中miR-26a表达差异及其作用机制。方法通过体内和体外实验构建血管钙化模型,利用分子生物学、病理生物学及细胞生物学检测方法,验证血管钙化过程中miR-26a表达差异及可能作用机制。结果与模型组和mimic NC组相比较,miR-26a mimic组碱性磷酸酶活性显著降低(P<0.05)。而inhibitor NC组和miR-26a inhibitor组碱性磷酸酶无显著变化(P>0.05)。与mimic NC组比较,miR-26a mimic组miR-26a、骨保护素(OPG)表达水平显著升高(P<0.05),而骨桥蛋白(OPN)、骨形态发生蛋白(BMP)-2和胶原蛋白(Collagen)Ⅱ表达水平显著降低(P<0.05)。与inhibitor NC组比较,miR-26a inhibitor组miR-26a、OPG、OPN、BMP-2和CollagenⅡ表达水平无显著差异(P>0.05)。结论miR-26a在血管钙化中的作用机制可能与OPG/核因子κB受体激活剂(RANK)/细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路有关。

RANK-RANKL-OPG信号通路在骨重建中的分子作用机制

骨是动态的活性组织,通过由骨吸收和骨形成所组成的骨重建来维持自身的平衡及结构的完整性。核因子kB受体活化因子--kB受体活化因子配体--骨保护蛋白通路是骨吸收和骨形成发生耦联的关键通路,其对于维持骨重建的平衡、成骨细胞的分化以及调控破骨细胞生成等过程起着重要的作用。此外,此通路的深入研究对于骨质疏松症、心血管疾病的临床治疗具有重要的指导意义。本文就RANK-RANKL-OPG信号通路在骨发生和吸收中的分子作用机制作一综述。