壬基酚围产期暴露对子代大鼠的肝毒性及机制探讨

目的观察壬基酚(NP)围产期暴露对子代大鼠的肝毒性,并探讨其可能的机制。方法将成功交配的32只孕鼠随机分为4组,每组8只,NP低、中、高剂量组分别予以NP 50、100、200 mg/kg加玉米油灌胃,对照组予以等容量玉米油灌胃;单笼饲养,空腹灌胃自受孕第6天起至生产后第21天止。仔鼠出生第60天麻醉后内眦取血,剖取肝脏;电镜观察肝细胞超微结构,免疫组化法检测肝组织肿瘤坏死因子α(TNF-α),高效液相法色谱法检测血清NP。结果 NP低、中、高剂量组仔鼠肝细胞核内染色质聚集,核膜深染,胞质中有大量的脂滴,且大部分脂滴与溶酶结合,染色较深,且剂量越高表现越明显。仔鼠肝组织TNF-α阳性表达的积分光密度、血清NP水平对照组<NP低剂量组<NP中剂量组<NP高剂量组,P均<0.01;相关分析显示,仔鼠肝脏组织TNF-α阳性表达的积分光密度与血清NP水平呈正相关(r=0.92,P<0.01)。结论围产期接触NP可对子代大鼠造成肝脏损伤,可能与NP上调肝组织TNF-α表达有关。

乙酰柠檬酸三丁酯围产期暴露对子代小鼠认知能力的影响

研究不同剂量的增塑剂乙酰柠檬酸三丁酯(acetyl tributyl citrate,ATBC)围产期暴露对子代小鼠认知能力的影响及其机制。以C57BL/6小鼠为受试动物,小鼠合笼后,对受孕雌性小鼠进行随机分组,设置对照组、ATBC暴露组(2、20和200 mg·kg^(-1)·d^(-1)),在围产期每天进行灌胃暴露。通过Morris水迷宫实验和跳台实验对子代小鼠的认知能力进行检测,观察子代小鼠脑组织病理变化及胶质细胞激活情况。检测子代小鼠脑组织匀浆中神经递质5-羟基色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)等的含量或活性以及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白介素17(interleukin-17)的水平。结果显示,200 mg·kg^(-1)·d^(-1)的ATBC围产期暴露会导致子代小鼠认知能力下降,脑海马结构出现改变,胶质细胞活化程度增大,脑组织氧化应激水平上升,促炎症因子TNF-α和IL^(-1)7含量增加。研究表明,200 mg·kg^(-1)·d^(-1)ATBC围产期暴露可引起子代小鼠脑组织氧化应激,进而导致其认知能力下降。

邻苯二甲酸酯宫内暴露对子代小鼠致肥作用的研究

目的:研究围产期宫内暴露邻苯二甲酸酯(MEHP)对子代小鼠肥胖的程序化作用。方法:不同剂量MEHP(0.05、0.25、0.5mg/kg体重)灌胃处理孕鼠做为低中高剂量组,等体积橄榄油灌胃处理的孕鼠做为对照组。处理周期为孕鼠妊娠第12天直至新生鼠出生后第7天。每周监测仔鼠体重直至第8周,并检测8周龄仔鼠的肝重、脂肪垫质量、血脂和血糖水平。结果:3组剂量MEHP宫内暴露均引起新生仔鼠体重增加(P<0.001);成年后(8周龄)雌性仔鼠体重接近对照组,而低剂量组成年雄性仔鼠体重明显高于对照组(P<0.01),附睾和肾周脂肪垫质量明显增加(P<0.001和P<0.01),血清总胆固醇、甘油三酯和血糖水平明显上升(P<0.01、P<0.05、P<0.001)。中高剂量对成年雄性仔鼠的体重、体脂组成、血脂和血糖水平无明显影响。结论:MEHP可以增加子代雄鼠肥胖发生风险,它可能作为一种潜在的化学诱导因子诱发肥胖及相关疾病发生。

围产期PFOS暴露对幼鼠海马BDNF/TrkB/CREB信号通路影响

目的探讨观察母孕鼠围产期全氟辛烷磺酸盐(perfluorooctane sulphonate,PFOS)暴露对幼鼠海马组织BDNF/TrkB/CREB信号通路关键基因表达的影响。方法 20只昆明种雌性小鼠随机分为对照组和低、中、高剂量组,从孕鼠怀孕第2 d开始(gestation day2, GD2)到幼鼠出生后21 d(postnatal day21,PND21)分别给予低、中、高剂量组孕鼠PFOS剂量为0.1、1.0、5.0 mg/(kg·bw)灌胃染毒,对照组给予等体积的0.05%Tween-20水溶液。灌胃量为0.1 ml/10 (g·bw)。PND 21 d处死幼鼠,收集脑组织,分离海马及皮层。HE染色观察脑组织常规病理改变,实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,QPCR)检测海马组织中BDNF、TrkB、CREB、Syn1及Syp的mRNA表达水平。结果与对照组相比较,低、中、高三个剂量组对幼鼠的死亡率和体质量的影响差异无统计学意义(P>0.05)。但是在高剂量组幼鼠海马组织出现空泡,海马BDNF、TrkB、CREB mRNA水平显著降低,分别由对照组的(0.98±0.11)、(1.03±0.09)、(1.08±0.12)下降到(0.22±0.21)、(0.71±0.14)、(0.37±0.26),并在中、高剂量组引起了幼鼠突触相关蛋白Syn1和Spy的mRNA水平显著降低,分别由对照组的(1.10±0.09)、(0.97±0.08)下降到中剂量的(0.41±0.23)、(0.71±0.17)和高剂量的(0.39±0.19)、(0.63±0.19),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PFOS损伤海马BDNF/TrkB/CREB信号通路可能是PFOS神经发育毒性之一。

电针“足三里”或“阳陵泉”对围产期尼古丁暴露新生鼠肺功能和组织形态的影响

目的:对比电针母鼠"足三里"与"阳陵泉"穴对围产期尼古丁暴露新生鼠肺功能与组织形态学干预效应的差异,探寻电针防护新生鼠肺发育不良的穴位效应规律。方法:将24只雌性SD大鼠随机分为生理盐水组(S组)、尼古丁组(N组)、尼古丁加足三里组(N+ST 36组)和尼古丁加阳陵泉组(N+GB 34组),每组6只。从受孕第6天开始,S组皮下注射0.9%氯化钠溶液(1 mg/kg);其余3组皮下注射等量尼古丁,至子代大鼠出生后第21天制备围产期尼古丁暴露模型。造模同时N+ST 36组和N+GB 34组分别电针"足三里"和"阳陵泉"穴,每天1次,至子代大鼠出生后第21天。采用小动物肺功能分析系统观察新生鼠吸气峰值流速(PIF)、呼气峰值流速(PEF)、呼气阻力(RE)、吸气阻力(RI)和动态顺应性(Cdyn)等肺功能指标变化;采用HE染色观察肺泡融合、破裂程度等肺组织形态学的变化。结果:与S组比较,N组PEF、Cdyn较低,PIF、RI、RE较高(均P<0.01),肺泡融合、破裂,肺泡壁增厚,肺泡数量减少,肺泡间距变大,肺泡直径较大(P<0.01);与N组比较,N+ST 36组PEF、Cdyn较高,PIF、RI、RE较低(P<0.05,P<0.01),肺泡融合、破裂程度有所改善,肺泡数量增多,肺泡壁变薄,肺泡间距正常,肺泡直径显著减少(P<0.01),而N+GB34组肺功能和肺形态各指标变化不明显(P>0.05)。结论:电针围产期尼古丁暴露孕鼠"足三里"较"阳陵泉"更能明显改善新生大鼠肺功能与肺组织形态。