“固本健脑法”防治老年性痴呆理论探源

老年性痴呆(AD)正日益成为世人关注的问题。临床研究证实,根据对AD主要病机为"先后天之本脾肾亏虚、脑髓失养,兼有痰瘀"的认识而创立的"固本健脑法"确有疗效。对该治法理论进行系统梳理和阐述,认为学习记忆与脑(髓)直接相关,但其根本在于五脏;"固本健脑"之"本"即"先后天之本",且蕴"以人为本"。

固本健脑法对老年健忘大鼠海马组织中AGEs/RAGE信号通路的影响

目的:比较固本健脑法、补脾健脑法、补肾健脑法对老年健忘大鼠海马组织中AGEs/RAGE信号通路的影响。方法:腹腔注射D-半乳糖及Na NO2建立老年健忘大鼠模型,分别灌胃固本健脑方、归脾丸、六味地黄丸和石杉碱甲;并设空白组和模型组,灌以生理盐水。给药结束后,取大鼠海马组织,采用免疫组化法检测AGEs的含量,Western blot检测RAGE、NF-κB p65的表达,ELISA检测IL-1β、TNF-α的含量。结果:与空白组比较,模型组、西药组、补脾组、补肾组、固本组上述指标的表达均上调;与模型组比较,西药组、补脾组、补肾组、固本组上述指标的表达均下调;与固本组比较,西药组、补脾组、补肾组上述指标的表达下调;补脾组、补肾组、西药组组间比较,差异无统计学意义。结论:固本健脑法、补脾健脑法、补肾健脑法均能在一定程度上改善老年健忘大鼠的记忆功能,但固本健脑法作用最佳,固本健脑法改善记忆功能的分子机制与AGEs/RAGE信号通路密切相关。

固本健脑法对老年健忘模型动物海马脑区c-fos基因表达的影响

目的:观察补脾、补肾、固本3种治法对老年健忘模型动物海马脑区c-fos基因表达的影响。方法:连续40天腹腔注射D-半乳糖和NaNO2复制老年健忘大鼠模型;分别以补脾健脑方、补肾健脑方、固本健脑方作用于模型动物,连续20天;给药结束后,采用RT-PCR法对动物海马脑区c-fosmRNA水平进行半定量分析。结果:正常组c-fosmRNA表达低于模型组(P<0.01),说明造模因素造成了c-fos表达增强,产生下游基因表达,保护神经细胞。3个治疗组均高于模型组(P<0.01),说明补脾、补肾、固本3种治法都有上调c-fosmRNA表达的作用。结论:补脾、补肾、固本3种治法减轻神经细胞损伤、改善学习记忆功能,与其促进c-fos基因的表达有关。c-fosmRNA的表达对记忆能力的影响似乎具有双向性,在一定范围内表达能提高学习记忆能力,在另一范围内表达则降低学习记忆能力。

固本健脑法治疗轻度认知障碍的理论探讨

轻度认知障碍以老年人出现记忆或某项认知功能减退为特征,其根本病机是脾肾亏虚,脑失所养,神机失用。固本健脑法为其治疗法则。

固本健脑法对Alzheimer病模型大鼠海马区树突棘及P-tau的影响

目的:本课题在成功建立AD大鼠模型基础上,观察固本健脑法治疗AD的作用及机制。方法:12月龄衰老大鼠行脑立体定位手术于双侧海马注射Aβ_(1-42),制备复合AD大鼠模型,并用固本健脑液灌胃干预,以安理中组为对照。4周后,高尔基染色法观察大鼠海马区神经元树突棘形态及密度;Western Blot法检测大鼠海马区Caveolin-1、P-tau(Thr231、Ser396位点)蛋白表达改变。结果:高尔基染色法结果显示:固本健脑液高、低剂量组神经元细胞及树突棘形态明显改善,数目及密度显著增加(P<0.01)。Western Blot法检测结果显示:固本健脑液高、低剂量组可使Caveolin-1的表达不同程度的升高,而tau磷酸化水平下降,差异有显著性(P<0.01)。结论:固本健脑法能显著改善AD大鼠海马神经元树突棘形态及密度,显著提高AD模型大鼠海马区Caveolin-1的表达,抑制tau蛋白过度磷酸化。

固本健脑法对老年健忘模型动物大脑皮层Na^+-K^+-ATP酶、血清SOD活性和MDA含量的影响

目的:固本健脑法对老年健忘模型动物大脑皮层Na+-K+-ATP酶、血清SOD活性和MDA含量的影响。方法:腹腔注射D-半乳糖和NaNO2,制造老年健忘大鼠模型,分别灌胃固本健脑方、补脾健脑方、补肾健脑方水煎液,并设正常对照组和模型对照组,均灌胃生理盐水,连续20d。灌胃结束后分别检测各组动物大脑皮层组织Na+-K+-ATP酶活性、血清SOD活性、血清MDA含量等指标。结果:模型组动物大脑皮层Na+-K+-ATP酶活性显著低于正常组、补脾组和固本组;模型组动物血清SOD活性明显低于正常组、补脾组和补肾组;模型组动物血清MDA含量明显高于正常组和各给药组。结论:固本法改善老年记忆的作用机制之一是调节大脑皮层Na+-K+-ATP酶活性,提高血清SOD活性,减低MDA含量。

固本健脑方改善记忆障碍动物模型记忆功能的实验研究

目的:观察固本健脑方对学习记忆障碍动物模型的治疗效果,探讨该方改善学习记忆作用的机制。方法:将健康雄性昆明小白鼠随机分成5组,即空白组(A)、模型组(B)、脑复康组(C)、固本健脑方低剂量组(D)和固本健脑方高剂量组(E),A组、B组灌服0郾9%的生理盐水,C组灌服24mg/ml浓度的脑复康混悬液,D组和E组分别灌服含生药1g/ml和2g/ml浓度的固本健脑方煎液,1次/d,共10d,分别造模后进行跳台法、穿梭箱法、Y型水迷宫法试验,比较各组动物正确反应次数、电击时间、主动逃避时间。结果:固本健脑方高、低剂量组动物行为学指标明显改善,疗效优于其他组(P<0郾05或P<0郾01)。结论:固本健脑方能够有效改善记忆获得、记忆巩固和记忆再现障碍。

固本健脑法对老年健忘模型动物海马脑区NR2A基因表达的影响

1材料与方法1．1实验动物清洁级健康雄性Wistar大鼠，雌雄各半，3月龄，体重200±20g，由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供，批号：0016152。适应性饲养1周后，用跳台法初筛，选成绩相似者，完全随机法分为正常对照组（15只），模型组（60只）。参考文献¨‘稍加改变。模型组大鼠腹腔注射D-半乳糖120mg·kg·d-1。（生理盐水配制成240mg·ml-1）和NaN0290mg·kg-1·d-1。（双蒸水配制成180mg·m1-1，连续40天，正常组大鼠腹腔注射2ml的生理盐水溶液。

固本健脑法对老年健忘大鼠模型海马组织中Aβ/RAGE信号通路的影响

目的:比较固本健脑法、补脾健脑法、补肾健脑法对健忘大鼠海马组织中Aβ/RAGE信号通路的影响,初步揭示固本健脑法改善记忆的部分分子机制。方法:腹腔注射D-半乳糖及Na NO2建立老年健忘大鼠模型,分别灌胃固本健脑方、归脾丸、六味地黄丸和石杉碱甲;并设空白组和模型组,灌以生理盐水。给药结束后,取大鼠海马组织,采用Western blot检测晚期糖化终产物受体(RAGE)、核转录因子p65(NF-κB p65)的表达,ELISA检测β-淀粉样肽1-42(Aβ1-42)、白介素-1β(IL-1β)的含量。结果:与空白组比较,模型组、西药组、补脾组、补肾组上述指标的表达均上调,固本组RAGE、NF-κBp65、IL-1β的表达上调,Aβ1-42则差异无统计学意义。西药组、补脾组、补肾组与模型组比较,上述指标的表达均下调,与固本组比较则上调;补脾组、补肾组、西药组组间比较,差异无统计学意义。结论:固本健脑法、补脾健脑法、补肾健脑法均能在一定程度上改善记忆功能,但固本健脑法作用最佳,固本健脑法改善记忆功能的分子机制与Aβ/RAGE信号通路密切相关。

固本健脑法对老年健忘模型大鼠海马脑区HSP70、NGF和NT-3表达的影响

目的:探讨固本健脑法改善模型大鼠学习记忆功能的作用机制。方法:腹腔注射D-半乳糖和NaNO2制造老年健忘大鼠模型,分别运用固本健脑方、补脾健脑方、补肾健脑方进行治疗,检测各组动物海马脑区HSP70、NGF和NT-3的表达。结果:固本法可增加模型大鼠海马CA,区NGF和NT-3表达水平。结论:固本法可致通过减轻神经元损伤,改善模型大鼠学习记忆功能。

固本健脑法对老年性痴呆模型大鼠SorLA、VPS35的影响

目的:探讨固本健脑法干预老年性痴呆即阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用及机制。方法:12月龄衰老大鼠行脑立体定位手术于双侧海马注射Aβ1-42制备复合AD大鼠模型,并用固本健脑液灌胃干预,以安理申组为对照。4周后,Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习记忆能力,Westen Blot检测SorlA、VPS35、APP的表达,ELISA法检测Aβ1-42的表达。结果:通过大鼠双侧海马注射Aβ1-42,可诱导出大鼠AD样学习记忆能力减退模型。水迷宫检测显示固本健脑液中剂量能改善大鼠学习记忆能力。Westen Blot显示固本健脑液高剂量能提高海马区SorlA的表达量。ELISA显示给药后各给药组Aβ1-42含量降低,固本健脑液高剂量Aβ1-42含量最低。结论:固本健脑法可通过影响SorLA、VPS35的表达,影响APP的转运,减少Aβ1-42的生成,加速Aβ1-42的清除。

固本健脑方治疗血管性痴呆疗效观察

目的观察固本健脑方治疗血管性痴呆的临床疗效。方法60例血管性痴呆患者随机分为治疗组和对照组各30例。两组均常规活化脑细胞、增加脑血流、改善脑循环及对症治疗,对照组维持上述基础治疗,治疗组在此基础上口服固本健脑方,连用6周观察其用药前后智能量表（MMSE）、血液流变学指标、经颅多谱勒血流变化情况。结果治疗组智能量表（MMSE）、血液流变学指标、血脂水平、经颅多谱勒情况均优于对照组,两组比较有极显著差异（P〈0.01）。结论固本健脑方能有效改善和延缓脑组织老化,扩张脑血管,提高脑神经元的细胞活性,从而激发和提高脑的智能。

固本健脑安神方联合针灸对慢性失眠的治疗效果及对日间脑功能状态影响

目的:探讨固本健脑安神方联合针灸对慢性失眠的治疗效果及对日间脑功能状态影响。方法:选取我院于2021年1月份到2022年12月份期间收治的120例慢性失眠患者进行研究,根据患者就诊日期进行分组,其中60例奇数日期就诊的患者作为对照组(接受针灸治疗),另外60例偶数日期就诊的患者作为观察组(接受固本健脑安神方联合针灸治疗)。对比两组愈显率、总有效率、匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)量表评分、日间失眠症状反应量表(DISS)评分、过度觉醒量表(HAS)评分、不良反应发生率、生活质量评价量表(SF-36)评分。结果:(1)观察组愈显率为71.67%,对照组愈显率为53.33%,观察组明显高于对照组(P<0.05);观察组总有效率为95.00%,对照组总有效率为83.33%,观察组明显高于对照组(P<0.05)。(2)治疗前,对两组睡眠时间、入睡时间、睡眠质量、睡眠效率、日间功能障碍、睡眠障碍、睡眠药物评分以及总分进行对比(P>0.05);治疗后,两组上述评分均出现不同程度的降低,且观察组比对照组低(P<0.05)。(3)治疗前,对两组DISS评分及HAS评分进行对比(P>0.05);治疗后,两组上述评分均出现不同程度的降低,且观察组比对照组低(P<0.05)。(4)经过治疗,观察组出现恶心呕吐、头痛头晕、口苦、疲乏无力、肝肾功能异常等不良反应的概率为6.67%,对照组为3.33%,两组比较(P>0.05)。(5)治疗前,对两组生活质量评分进行对比无差异(P>0.05);治疗后,评分升高,且观察组比对照组高(P<0.05)。结论:固本健脑安神方联合针灸治疗慢性失眠可明显提升愈显率和总有效率,改善睡眠障碍情况,提高日间脑功能状态,同时改善过度觉醒状态,促使患者生活质量得以提高,且安全性较高。

基于“肠-脑轴”理论探讨固本健脑复方对AD模型大鼠肠道菌群、TLR4/NF-κB通路的影响

目的基于“肠-脑轴”理论探讨固本健脑复方对阿尔茨海默症(alzheimer’s disease,AD)模型大鼠肠道菌群、TLR4/NF-κB通路的影响。方法将50只雄性SD大鼠随机数字表法分为正常对照组(Control)、模型组(Model)、固本健脑复方低剂量组(TCM-low,TL)、高剂量组(TCM-high,TH)、阳性对照组(Psoitive control,PC),每组10只。采用双侧海马注射Aβ25-35建立AD模型,低剂量组、高剂量组分别给予1.035 g/kg/d、2.070 g/kg/d固本健脑复方水煎液灌胃,阳性对照组灌胃113.4g/kg/d双歧杆菌三联活菌肠溶胶囊水溶液,正常对照组、模型组灌胃等体积生理盐水,持续8w。Morris水迷宫检测动物学习记忆和能力,western blot检测海马Aβ、BACE1、TLR4/NF-κB通路相关蛋白表达,16SrRNA测序技术检测肠道菌群丰度,免疫组化检测大脑皮质大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)含量。结果与正常对照组相比,模型组动物逃避潜伏期延长,穿越平台次数下降(P<0.01),海马Aβ、BACE1、TLR4、p-NF-κB p65、IL-1β表达上升(P<0.05或P<0.01),优势物种为脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)_UCG_006、Colidextribacter等,大脑皮质E.coli含量上升(P<0.01);与模型组相比,低剂量、高剂量固本健脑复方干预可缩短逃避潜伏期,增加穿越平台次数(P<0.05或P<0.01),抑制海马Aβ、BACE1、TLR4、p-NF-κB p65、IL-1β表达(P<0.05或P<0.01),优势物种变为布劳特氏菌属(Blautia)、普雷沃氏菌(Prevotellaceae)_NK3B31_group、棒状杆菌属(Corynebacterium)、塞利单胞菌属(Sellimonas)等,降低大脑皮质E.coli含量(P<0.01)。结论固本健脑复方具有益生元样作用,可通过调节肠道菌群组成、TLR4/NF-κB通路,抑制Aβ生成,从而改善认知功能防治AD。

固本健脑方对AD大鼠肠道菌群和C/EBPβ/AEP信号通路的影响

目的探讨固本健脑方对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠肠道菌群及C/EBPβ/AEP信号通路的作用。方法50只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、固本健脑方高、低剂量组(以下简称固高、固低组)、益生菌组共5组,每组10只。正常组不处理,其余各组双侧大脑海马区注射Aβ25-35建立AD模型。固高组、固低组给予固本健脑方灌胃,益生菌组给予双歧杆菌三联活菌片灌胃,连续灌胃8周后用水迷宫试验检测大鼠的空间记忆能力;用HE染色检测各组大鼠神经元数量形态;用尼氏染色检测尼氏小体分布及数量;通过Western blot法检测大鼠海马C/EBPβ/AEP信号通路蛋白的表达,包括C/EBPβ、p-C/EBPβ、AEP;16SrRNA检测大鼠粪便菌群门水平和属水平的丰度和多样性。结果①水迷宫实验表明,在定向航行测试中,正常组的大鼠逃避潜伏期时间明显短于模型组,模型组的大鼠逃避潜伏期时间明显长于固高组、固低组和益生菌组,且运动轨迹杂乱无章。在空间探索实验中,与正常组相比,模型组大鼠穿越目标象限平台的次数明显减少;而与模型组相比,各给药组大鼠穿越平台的次数显著增加。②HE染色表明,正常组海马神经元数量最多,形态完整,而模型组数量明显减少,排列稀疏散乱,各治疗组较模型组而言,神经元细胞数量增多,且细胞排列相对整齐均匀。③尼氏染色实验表明,正常组的细胞胞核圆满,排列整齐,神经元尼氏体数量丰富。而模型组的胞核破裂不完整,排列分散,细胞内尼氏体数量稀少。与模型组相比,益生菌组和固高组、固低组神经元细胞数目受损较少,胞核形态明显改善,尼氏体排列相对有序均匀紧密。④Western blot显示,正常组的三个蛋白表达量均低于模型组,和模型组相比,固高组、固低组、益生菌组的C/EBPβ、p-C/EBPβ、AEP三个蛋白的表达量均下降。⑤16SrRNA实验表明,在门(phy⁃lum)水平上,模型组的脱硫杆菌门(Desulfobacterota)丰度高于空白组和药物组,在属(genus)水平上,与药物组相比,模型组的苏黎世杆菌属(Turicibacte-r)和布劳特氏菌属(Blautia)丰度相对降低,而和药物组比,模型组毛螺菌科NK4A136属(Lachn-ospiraceae NK4A136 group)、葡聚糖菌属(Colidextribacter)和脱硫弧菌属(Desulfovibrionaceae)的丰度相对增加。结论固本健脑方可改善由Aβ25-35诱导的AD大鼠学习记忆能力,其机制可能与其调节肠道菌群,发挥“肠-脑轴”机制,从而抑制C/EBPβ/AEP信号通路的表达有关。

固本健脑方调节健忘大鼠海马组织中AGEs/RAGE信号通路的探讨

目的:基于晚期糖基化终末产物(AGEs)/高级糖基化终产物受体(RAGE)信号通路,探讨固本健脑方对老年健忘大鼠海马脑区神经炎性反应的调控作用。方法:腹腔注射D-半乳糖(120 mg·kg-1)及Na NO2(90 mg·kg-1)建立老年健忘大鼠模型,分别ig固本健脑方(16.7 g·kg-1),归脾丸(16.3 g·kg-1),六味地黄丸(12.5 g·kg-1)和石杉碱甲(100μg·kg-1),并设正常组和模型组,ig等体积生理盐水。给药共20 d后,取海马组织,采用免疫组化法检测AGEs蛋白的表达,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测RAGE及核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白的表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL^(-1)β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠海马组织AGEs蛋白,RAGE及NF-κB p65蛋白的表达,IL^(-1)β及TNF-α含量均明显上调(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组明显下调大鼠海马组织AGEs蛋白,RAGE及NF-κB p65蛋白的表达,IL^(-1)β及TNF-α含量(P<0.01);与固本健脑方组比较,其余给药组上述指标的表达上调(P<0.05);归脾丸组、六味地黄丸组、石衫碱甲组组间比较,差异无统计学意义。结论:上述方药均能在一定程度上改善老年健忘大鼠的记忆功能,但固本健脑方作用最佳,其分子机制与AGEs/RAGE信号通路密切相关。

固本健脑法对AD大鼠模型海马Aβ1-42及SorLA、SNX27 mRNA表达的影响

目的:观察固本健脑法对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马Aβ1-42含量及SorLA、SNX27 mRNA表达的影响。方法:84只12月龄Wistar大鼠随机分为正常组、空白对照组、模型组、固高组、固中组、固低组和西药组,除正常组、空白对照组外,各组行双侧海马注射Aβ1-42复制AD模型。经4周治疗,以Morris水迷宫检测学习记忆能力、ELISA法检测Aβ1-42含量,Real time-qPCR法检测SorLA、SNX27 mRNA表达。结果:与模型组比较,各用药组学习记忆能力显著提高(P<0.01,P<0.05),Aβ1-42表达显著降低(P<0.05,P<0.01),SorLA、SNX27 mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:固本健脑法可能通过上调模型大鼠海马SorLA、SNX27 mRNA水平,降低海马Aβ1-42含量,从而改善AD模型大鼠学习记忆能力。

固本健脑方对老年健忘动物模型行为学指标的影响

健忘是亚健康状态的主要表现之一，也是老年性痴呆（AD）的最早期症状和必要特征。随着年龄的增长，记忆力减退与痴呆的关系越来越密切。由于AD的病理变化只能抑制而难于逆转，对其进行预防较之于治疗就更有意义。从治疗健忘入手，将防治AD的“关口前移”，可以达到防微杜渐的效果。课题组曾以补脾。肾（固本）为原则组成固本健脑方，对老年健忘模型动物进行了实验研究，

固本健脑法对老年健忘大鼠学习记忆功能的影响

目的建立老年健忘大鼠模型,观察固本健脑法、补脾健脑法、补肾健脑法的疗效差异。方法腹腔注射D-半乳糖及NaNO_2建立老年健忘大鼠模型,造模成功后随机分为四组,给药组分别灌胃固本健脑方、归脾丸、六味地黄丸及石杉碱甲,模型组与空白组均灌以等体积生理盐水。给药结束后,使用跳台及水迷宫检测其学习记忆能力。结果与空白组比较,在跳台法实验中,模型组潜伏期缩短,5min错误次数增多;在水迷宫实验中,模型组逃避潜伏期延长,游泳总路程增多,穿越平台次数及目标象限停留时间减少,第1次抵达目标范围的时间延长;固本组、补脾组、补肾组、西药组与空白组比较结果同上,与模型组比较则相反;补脾组、补肾组、西药组与固本组比较,结果与模型组、空白组二者相比较一致;补脾组、补肾组、西药组组间比较,差异无统计学意义。结论固本健脑法、补脾健脑法、补肾健脑法都可以在一定程度上改善老年健忘模型大鼠的学习记忆功能,但以固本健脑法作用最佳。