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体内遗传标记成团肠杆菌固氮质粒pEA9
1
作者
刘成君
Walter Klingmüller
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期455-458,共4页
用卡那霉素抗性(Kanr)基因对成团肠杆菌固氮质粒pEA9进行活体遗传标记。将来自质粒pEA9的3.0kb片段(nif ENX)克隆到pBR322载体中,再将卡那霉素抗性(Kanr)基因插入到3.0kb的片段中,构建成供体质粒pST5。将该质粒转化到含有待标记质...
用卡那霉素抗性(Kanr)基因对成团肠杆菌固氮质粒pEA9进行活体遗传标记。将来自质粒pEA9的3.0kb片段(nif ENX)克隆到pBR322载体中,再将卡那霉素抗性(Kanr)基因插入到3.0kb的片段中,构建成供体质粒pST5。将该质粒转化到含有待标记质粒pEA9的E.a.339菌株中,然后在AP培养基中消除供体质粒,筛选得到40个失去了pST5并保持卡那霉素抗性的克隆,分析表明它们不是质粒pEA9和pST5的共整合体,而是卡那霉素抗性基因通过两个质粒在nifENX区域内的DNA间的同源重组整合到了质粒pEA9上。
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关键词
固氮质粒pea9
成团肠杆菌
遗传标记
卡那霉素抗性
质粒
消除
同源重组
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职称材料
题名
体内遗传标记成团肠杆菌固氮质粒pEA9
1
作者
刘成君
Walter Klingmüller
机构
四川大学生命科学学院
德国拜罗伊特大学遗传研究所
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期455-458,共4页
文摘
用卡那霉素抗性(Kanr)基因对成团肠杆菌固氮质粒pEA9进行活体遗传标记。将来自质粒pEA9的3.0kb片段(nif ENX)克隆到pBR322载体中,再将卡那霉素抗性(Kanr)基因插入到3.0kb的片段中,构建成供体质粒pST5。将该质粒转化到含有待标记质粒pEA9的E.a.339菌株中,然后在AP培养基中消除供体质粒,筛选得到40个失去了pST5并保持卡那霉素抗性的克隆,分析表明它们不是质粒pEA9和pST5的共整合体,而是卡那霉素抗性基因通过两个质粒在nifENX区域内的DNA间的同源重组整合到了质粒pEA9上。
关键词
固氮质粒pea9
成团肠杆菌
遗传标记
卡那霉素抗性
质粒
消除
同源重组
Keywords
Enterobacter agglomerans
labelling
kanamycin resistance
curing
homologous recombination
分类号
Q933 [生物学—微生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
体内遗传标记成团肠杆菌固氮质粒pEA9
刘成君
Walter Klingmüller
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2002
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