固液双层培养方式下蔗糖质量浓度对马铃薯试管薯诱导的影响

以马铃薯品种费乌瑞它(Favorite)脱毒苗茎段为材料,采用先固体壮苗培养,再添加液体结薯诱导培养基的固液双层培养方式,研究了液体结薯诱导培养基添加量与蔗糖质量浓度对试管薯诱导的影响.结果表明:与对照(先固体壮苗培养,再移苗到液体结薯诱导培养基)相比,固液双层培养方式操作简便,更适合马铃薯试管薯的规模化生产;在固液双层培养方式中,适当增加液体结薯诱导培养基的添加量及其蔗糖质量浓度,可促进试管薯的形成,提高试管薯质量.

固液双层培养中不同处理方式对马铃薯试管薯诱导的影响

以马铃薯品种Favorite的脱毒试管苗为材料,以"固+固"培养(先固体壮苗培养,再转接壮苗到固体诱导结薯培养基)为对照,重点研究了固液双层培养(先固体壮苗培养,再添加液体诱导结薯培养基)中添加液体诱导结薯培养基后的不同处理方式(如在原固体培养基上扎孔、拨烂固体培养基等)对马铃薯试管薯诱导的影响.结果表明:相比固体壮苗培养,液体壮苗培养下的成苗率仅有53.13%,不宜用于下一步的试管薯诱导.当采用固液双层培养诱导试管薯时,不同的处理方式主要影响试管薯形成的大小,添加液体诱导结薯培养基后拨烂原固体壮苗培养基的处理方式,可促进液体培养基的吸收与利用,更有利于试管薯的生长发育,可显著提高大薯形成数量及其比例.

激素诱导下不同培养方式对马铃薯微型薯的诱导效应

以两个马铃薯普通栽培种“Atlantic”和“甘农薯2号”的无毒试管苗为材料,研究了离体条件下,GA3和IAA对匍匐茎发生和结薯的影响,及在此条件下固体培养、固液双层培养和液体培养3种不同培养方式对马铃薯微型薯诱导和发育的影响.试验结果表明:GA3和IAA在诱导匍匐茎发生和增加单株结薯数上有重要作用,尤以液体培养条件下的效果最为明显;激素诱导下3种培养方式对微型薯的诱导效率在单瓶薯数、单瓶薯重、薯块平均直径及结薯率等方面差异极显著,在单薯重上差异显著,其诱导效应依次为:液体培养>固液双层培养>固体培养.

不同培养方式和pH对草地早熟禾原生质体分裂和生长的影响

以3个草地早熟禾品种午夜Ⅱ号、新格莱德和橄榄球Ⅱ号继代培养20次的愈伤组织为材料,设置不同的pH水平,通过2种培养方式进行了原生质体培养,观测其原生质体的分裂和生长状况。结果表明:3个草地早熟禾品种原生质体最适宜的培养方式为固液双层培养,固液双层培养中液相pH为5.8(新格莱德pH6.0)时原生质体分裂率达最高值,午夜2号42.8%、新格莱德50.1%和橄榄球2号29.4%。基因型的差异对于原生质体培养成功与否有着密切的关系。

甘蓝型油菜小孢子培养子叶形胚发育成苗研究

甘蓝型油菜小孢子细胞诱导胚状体以子叶胚和非子叶胚如球形胚、心型胚和类似于胚的结构形态存在。子叶胚在成苗培养基上能够快速生长成植株,但是非子叶胚难以一次成苗,容易褐化死亡,因此减少非子叶状胚、培育高质量子叶胚是提高油菜小孢子再生成植株效率的关键步骤。为了提高甘蓝型油菜小孢子培养过程中诱导子叶胚的数目,对3个甘蓝型油菜品系分离得到的小孢子细胞在25℃下暗培养2周,之后转移到固液双层培养基上培养。通过对摇床的振荡周期、培养温度、固液双层培养基中活性炭的浓度以及6-BA不同梯度的处理,分析诱导子叶胚和非子叶胚发生的数目。结果显示,3个品系小孢子细胞在固液双层培养基上诱导得到的子叶胚数目显著高于液体培养基上诱导发生的数目。小孢子细胞在固液双层培养基上振荡培养1周所得子叶胚数目显著增加。降低小孢子培养温度至23℃,出胚总数和对照差异不显著,但子叶胚的数目显著增加。在固液双层培养基中的下层固体培养基中加入0.1%活性炭和0.25 mg/L 6-BA能够有效提高子叶胚的数目。此外,相比前人只用液体培养基培养的方法,本试验建立了两步培养方法(先液体培养后固-液双层培养)能有效获得子叶胚,从而快速生成植株,提高了甘蓝型油菜小孢子培养技术创制育种资源的效率。

提高甘蓝型油菜游离小孢子产胚率的研究

以 10个甘蓝型油菜基因型为材料进行游离小孢子培养 ,对如何提高可培养的基因型范围和产胚率进行了研究。结果表明 ,严格选择小孢子处于单核晚期的花蕾 ,在低温下分离小孢子 ,并采用含活性碳的NLN固液双层培养基 ,可大大提高产胚的基因型范围及产胚率。在固液双层培养基上 ,10个供试材料中有 7个获得了小孢子胚 ,产胚量最高的达 5 80个胚 /蕾。而在单层液体培养基上 ,仅有 4个基因型得到了胚 ,最高产胚量为 4 8个 /蕾。前者比后者平均产胚率提高 1～ 10倍。在小孢子胚发育至球形和早期鱼雷型阶段时 ,添加新培养液进行振荡培养 ,可提高胚胎发育的同步性 ,畸形胚大大减少。经过这些改进 ,使在含琼脂浓度较高的培养基上培养的子叶形胚直接发育成植株的频率大大提高。