固相酶联免疫测定法检测NS1抗原在登革病毒感染早期诊断中的应用

目的探讨固相酶联免疫测定(ELISA)法检测NS1抗原在登革病毒感染早期诊断中的应用价值。方法选取登革病毒感染早期患者血清171份,非登革病毒感染发热患者血清11份,正常人血清10份,采用ELISA法检测全部192份血清的登革病毒NS1抗原和IgM抗体;采用逆转录-聚合酶链反应-限制性内切酶酶切片段长度多态性分析(RT-PCR-RFLP)技术对发病5 d内的125份血清进行扩增和鉴定分型;并采用C6/36细胞微量培养法对发病第1、2天的41份血清进行登革病毒分离培养。结果登革病毒感染患者发病2 d内、3～5 d以及6～10 d血清NS1抗原的检出率分别是92.7%(38/41)、83.3%(70/84)、10.9%(5/46);IgM抗体的检出率分别是2.4%(1/41)、51.2%(43/84)、97.8%(45/46);非登革病毒感染的发热患者及正常人血清中,有1例疟疾患者血清登革病毒IgM抗体呈阳性,NS1抗原无一例阳性。RT-PCR在登革病毒感染患者发病第1、2天和3～5天的检出率分别是85.4%(35/41)、83.3%(70/84);登革病毒感染患者发病第1、2天血清的病毒分离培养阳性率分别是80.0%(16/20)、38.1%(8/21),总分离率58.5%(24/41);RT-PCR-RFLP分型鉴定技术及间接免疫荧光法(IFA)均证实2006年广州流行株为登革Ⅰ型病毒。结论ELISA法检测登革病毒NS1抗原操作技术成熟,且具有敏感性高、特异性好的特点,对登革病毒感染的早期诊断和疫情的早期控制具有重要意义,适合于基层医疗机构常规应用。

双特异抗体在固相酶联免疫测定中的应用初探

目的 了解双特异抗体在固相酶联免疫方法中对抗原或抗体的固相化是否有优化作用。方法 通过血型糖蛋白A（GPA），将抗GPA，抗HIVp24抗原的双特异抗体间接包被到固相上，建立检测HIVp24抗原的“间接”双抗夹心ELISA方法，并把“间接”双抗夹心EISA方法对HIVp24抗原的检测结果与抗HIVP24抗原单克隆抗体直接包板的“直接”双抗夹心EISA方法进行比较。结果 用双特异抗体建立的“间接”双抗夹心ELISA方法对HIVp24抗原的检测下限为3.2ng/ml，抗HIVp24单克隆抗体直接包板的“直接”双抗夹心EISA方法对HIVp24抗原的检测下限为6.3ng/ml。结论 结果表明双特异抗体对ELISA方法的检测效果有改善作用。

抗体或抗原的固相化方法研究进展

抗体成抗原的固相化是固相免疫测定的前提．应用最广的固相化方法是被动吸附，但其有难以避免的缺陷，蛋白A：抗体、链亲合素：生物素化抗体等间接非共价吸附方法的出现，大为提高了抗体或抗原固和化的有序性和均一性。共价吸附一般是利用聚苯烯表面的羧基、氨基等基因在水溶性碳二亚胺或戊二醛等存在下与抗体或抗原等生物分子的氨基反应而成，尤为适用于多肽等分子量相对较小的生物分子的固相化。

人精液免疫抑制因子的固相酶联免疫测定法

本工作首次建立了人精浆免疫抑制因子-DF_2的固相酶联免疫测定法,并用于测定正常人精浆DF_2的含量。结果表明,本法灵敏度1μg/ml,方法稳定,操作简便。53例正常中国人精浆DF_2平均含量为1.32±0.72mg/ml,为今后免疫不育及性传播性疾病研究提供了有价值的技术与基础数据。

血清降钙素原与感染性疾病的相关性分析

目的 :探讨血清降钙素原 (PCT)检测在感染性疾病中的临床意义 ,分析血清PCT水平与病毒或细菌感染的相关性。方法 :采用半定量固相免疫测定法测定 3 5 6例各种感染性疾病患者血清中的PCT水平。结果 :以血清PCT≥ 0 5 μg·L-1以上为阳性标准 ,并结合全身炎性反应综合征 (SIRS)参数 ,其对细菌感染 (含立克次体病 )诊断的敏感性为 98 7% ,特异性为 72 0 % ,阳性预测值为 49 4% ,阴性预测值为 99 5 % ,阳性拟然比为 3 5 3 ,阴性拟然比为 0 0 18,诊断符合率为 77 80 %。血清PCT阳性患者SIRS、多器官功能障碍综合征的发生率明显高于血清PCT阴性患者 (P <0 0 1) ,5例死亡患者血清PCT均阳性。结论 :血清PCT半定量检测可用于细菌与病毒感染的鉴别诊断 ,结合SIRS参数可提高诊断的敏感性和特异性 ,并为抗生素的使用提供可靠依据 ;PCT水平的高低反映了病情的轻重 ,可作为评估病情。

PCT早期鉴别诊断细菌和病毒感染及其在疾病控制中的应用

目的:分析早期细菌和病毒感染血清降钙素原(PCT)水平的差别,探讨血清PCT检测鉴别诊断早期细菌和病毒感染的价值,为PCT在传染病预防控制中的应用提供实验依据。方法:采用半定量固相免疫测定法测定28例细菌感染者、42例病毒感染者以及20例正常对照血清中的PCT,将检测结果分成4个水平,PCT<0.5 ng/ml,0.5 ng/ml≤PCT<2.0 ng/ml,2.0 ng/ml≤PCT<10.0 ng/ml和PCT≥10.0 ng/ml,分析PCT水平与细菌病毒感染之间的关系。以PCT≥0.5 ng/ml为阳性诊断标准,计算诊断试验的灵敏度和特异度。统计学处理采用SPSS14.0中的χ2检验。结果:细菌感染、病毒感染和健康组的PCT水平分布存在显著性差异(χ2=42.6,P=0.00);细菌感染组显著高于病毒感染组(χ2=26.1,P=0.00)和健康组(χ2=28.3,P=0.00),但病毒感染组与健康组之间没有显著性差异(χ2=4.8,P=0.09)。PCT试验的灵敏度为82.1%,特异度为95.0%。结论:血清PCT半定量检测是一个较好鉴别早期细菌与病毒感染的指标,建议在疫情调查中作为早期细菌与病毒感染的筛查指标。

新生儿败血症血前降钙素原的临床研究

目的 比较新生儿败血症及败血症性休克血前降钙素原(PCT)与C反应蛋白(CRP)的变化，探讨血浆中前降钙素原作为新生儿败血症诊断指标的敏感性、可靠性及对预后评估的作用。方法 采用半定量固相免疫测定法测定108例新生儿败血症(40例并败血症休克)的血浆PCT水平，并比较CRP水平。结果 新生儿败血症惠儿血清PCT阳性检出率明显高于正常对照组；其中败血症性休克组尤为明显；败血症性休克患儿发生率及死亡率随PCT值升高而升高；PCT与血清CRP水平呈正相关；PCT的敏感性(87.5%、特异性(82.4％、阳性预期值(74.5％)和准确性(84.3％)最高。结论 新生儿败血症及败血症休克时PCT升高较早，且随病情的加重持续升高。PCT对新生儿败血症及败血症休克诊断指标的敏感性、可靠性及对预后评估优于CRP。

ELISA试剂预温控制与常规操作实验结果的比较

温育是ELISA试验中必需的步骤，也是影响ELISA检测结果最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原-抗体结合反应在固相载体上进行，必须在一定的温度条件下反应一定的时间才能使液相中的抗原或抗体与固相中的特异性抗体或抗原充分结合。ELISA试验中抗原-抗体结合的合适温度为37℃，但在常规实验中，从室温操作完毕再将微孔板放入37℃恒温箱中时，孔内的温度从室温升至反应平台的37℃需要一定的时间，这样会使抗原-抗体在37℃条件下反应的时间相对缩短，有可能直接影响检测结果。

检测抗血吸虫抗体的改良目视ELISA法

酶联固相免疫测定(ELISA)检测抗血吸虫抗体,1980年即在国内报道,该法简易方便,特别适用于不具备ELISA比色条件的防治工作现场的应用。由于该法尚存在着显色底物磷苯二胺(OPD)作用后显色深浅不易判别或底物隣朕甲苯胺(OT)

血清降钙素原检测在感染性疾病中的临床应用

目的观察血清降钙素原检测在感染性疾病患者中的诊断价值。方法 202例患有感染性疾病的患者均进行血清降钙素原的测定,主要通过半定量固相免疫测定法进行测定。结果 202例患者经血清降钙素原水平测定,其中血清降钙素原水平〈0.5 ng/ml的患者119例,占58.9%;血清降钙素原水平在0.5-2.0 ng/ml的患者53例,占26.2%;血清降钙素原水平在2.0-10.0 ng/ml的患者25例,占12.4%;血清降钙素原水平〉10.0 ng/ml的患者5例,占2.5%。而且血清降钙素原的检测表明：在细菌性感染疾病诊断方面其敏感程度为75.0%,在病毒性感染疾病诊断方面其敏感程度为29.8%,两者对比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论降钙素原水平的检测能够明显增加感染性疾病的诊断准确率,因为其高度灵敏性及高度特异性;而且能够对感染性疾病的类型及严重程度提供明确的诊断依据,在感染性疾病严重程度的诊断价值方面意义深远。

ELISA检测HIV抗体的影响因素及质量控制措施

酶联免疫吸附法（EusA）是一种固相免疫测定方法，具有简便、快捷、灵敏性高、特异性强、重复性好等特点。ELISA检测人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体是发现HIV感染的有效途径，也是多年来艾滋病初筛实验室检测HIV普遍使用的方法。其在操作中有一定的技术要求和影响因素，为消除检测过程中存在的干扰，强化实验室质量管理，提高HIV抗体检测水平，根据多年检测经验，

ELISA检测影响因素的分析

ELISA（enzyme linked immunosorbent assay）即酶联免疫吸附试验，属固相酶免疫测定方法。因反应时间短，快速简便，不需要特殊设备，同时采用酶联免疫法原理设计而成的试剂具有稳定性好、特异性强、灵敏度高等特点，ELISA方法在临床上已被广泛应用于各种抗原和抗体的检测。但由于ELISA自身存在的缺陷和操作中各环节对试验的检测结果影响较大，均可造成实验性误（漏）诊的发生。本文就ELISA检测的影响因素做如下分析。

SPRIA、ELISA、RPHA对检测血清HBsAg、抗—HBs、抗—HBc的结果比较

血清HBV感染标志的检测,对乙肝的诊断、预后及流行病学研究等具有重要意义,近年用于检测的方法主要有SPRIA(固相放射免疫分析)法、ELISA(酶标固相免疫测定)法和RPHA(反相被动血凝)法。本文报道上述三种方法检测HBsAg、抗-HBs及抗-HBc的比较结果。材料和方法一、材料: (一)试剂:SPRIA药盒:中国同位素公司北方免疫试剂研究所生产(在有效期内使用)。ELISA药盒为上海实业科华生化制品有限公司产品(在有效期内使用)。HBsAg诊断血球为北京生物制品研究所生产,批号90107。 (二)检测血清:本室日常健康体检者血清250例。 (三)检测仪器:FMJ-182A放免γ计数器、DG-3022酶标仪。

国产甲胎蛋白ELISA试剂的临床应用

临床上测定外周血中用胎蛋白(AFP)的含量作为早期发现,早期诊断原发性肝癌具有十分重要的意义,已被广泛应用。固相酶免疫测定(以下简称 ELISA),是近十多年发展起来的一项新技术,与放射免疫测定(RIA)灵敏度相仿,但更具有操作简便、快速、试剂保存时间长、不需复杂仪器、无放射性元素污染等优点。国外早已有高质量的检测 AFP 的 ELISA

银强化金标记免疫吸附剂试验的方法学研究

银强化金标记免疫吸附剂试验（ＳＥＧＬＩＳＡ）是一种新的非酶、非放射性免疫测定法，本文以兔抗ＢＳＡ抗体测定为模式，就它的原理、试剂制备和方法学最佳化等进行了研究，并与ＥＬＩＳＡ作了对比试验。

血前降钙素在新生儿败血症中的应用价值探讨

目的 探讨血清前降钙素(PCT)检测在新生儿败血症中的应用价值。方法 对58例疑似新生儿败血症患儿采用半定量固相免疫测定法测定血清PCT水平,PCT水平分为<0.5 ng/ml,0.5-2.0 mg/ml,2.0-<10.0 ng/ml和≥10 mg/ml 4个等级,血清PCT>0.5 ng/ml为阳性阈值。结果 败血症组PCT阳性44例,阳性率75.9％,对照组仅1例阳性,阳性率5.5％,两组有显著差异。结论 血清PCT是新生儿败血症的重要诊断标准,可作为败血症预后判断及治疗监测的指标。