癌胚抗原(CEA)固相包被管法免疫放射分析

采用了两株CEA单克隆抗体(McAb),一株用于固相包被,另一株用于标记制备125I-CEAMcAb,研制了一步法CEA免疫放射分析(IRMA)试剂盒。本方法的灵敏度为0.5μg/L,批内变异系数<10.0％,批间变异系数<15.0％,回收率为97.4％～108.9％,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应。正常参考值<10.0μg/L。

癌胚抗原(CEA)固相包被管法免疫放射分析

采用了两株CEA单克隆抗体(McAb),一株用于固相包被,另一株用于标记制备125I-CEAMcAb,研制了一步法CEA免疫放射分析(IRMA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.5μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为97.4%～108.9%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.

基于固相抗体模式时间分辨荧光免疫分析测定雌三醇

采用二步标记法,借助二乙烯三胺五乙酸酐,将Eu3+标记到雌三醇完全抗原上,基于固相抗体竞争反应模式,建立了时间分辨荧光免疫分析测定雌三醇的新方法。在优化的条件下,方法的线性范围为0.005—1000ng·mL-1,检出限为4pg·mL-1。该方法用于检测血清中雌三醇的含量,结果令人满意。

睾酮固相放射免疫分析方法的建立

目的建立一种睾酮固相放射免疫分析方法,实现睾酮液相放射免疫分析药盒的固相包被管分离。方法利用本公司专利技术纯化出亲和纯驴抗兔抗体,将其包被于聚苯乙烯试管上,兔抗-睾酮抗体能与驴抗兔抗体结合而被间接包被上,从而制备出睾酮抗体包被管,再采用标准抗原与标记抗原竞争包被在聚苯乙烯试管上定量抗体的技术思路,建立睾酮固相放射免疫分析方法。结果睾酮抗体包被管中亲和纯驴抗兔抗体包被浓度为20μg/m L,兔抗-睾酮抗体包被滴度为1∶5万;本方法的反应条件为37℃温育1h,测量范围为0.1~20 ng/m L,灵敏度为0.02 ng/m L,批内变异为4.37%~6.84%,批间变异为6.31%~9.03%,回收率为93.6%~104.1%,稀释实验测定值与理论值呈线性相关,相关系数为r=0.999;与合格睾酮液相放射免疫分析药盒的相关性方程为Y=1.05X+0.01,相关系数r=0.982;睾酮抗体包被管、125I-睾酮标记物以及睾酮标准品在37℃存放1周稳定性良好。结论本方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。

共价结合和物理吸附制备固相抗体在RIA技术应用中的对比分析

目的:探讨异硫氰酸荧光素(FITC)-抗FITC磁性微粒子系统与试管固相包被系统制备固相抗体在RIA应用中的方法学技术参数。方法:以FITC标记抗体,抗FITC抗体共价结合磁性微粒子为分离剂,与试管固相包被法,用相同的校准品、125I标记物通过检测FT3、sTSH进行技术研究及样本对比分析。结果:FT3两种方法的灵敏度和精密度分别为:0.18pmol/L、0.43pmol/L,批内变异(n=10):8.96%、16.26%,批间变异(n=10):15.26%、18.83%。sTSH两种方法的灵敏度和精密度分别为:0.06μIU/ml、0.04μIU/ml,批内变异(n=10):7.6%、6.92%,批间变异(n=10):8.55%、14.23%。FT3磁性微粒子法测值与PR法测值r=0.9825,FT3试管固相包被法测值与PR法测值r=0.9102;sTSH磁性微粒子法测值与试管固相包被法测值r=0.9987。结论:FITC磁性微粒子系统应用于FT3、sTSH检测,降低反应时间,共价结合提高均一性。

不同组合CD3、CD28抗体对CIK细胞诱导培养的探索研究

目的探索利用CD3、CD28抗体对人外周血单个核细胞(PBMC)体外激活转化增强作用,采用不同包被方法及抗体浓度,以期获得一种更有效的包被方法。方法利用人外周血单个核细胞分离技术、体外细胞培养技术及流式细胞术(FMC),以CD3抗体固相包被、CD28抗体不同浓度固相包被或悬浮加入,计算经12d培养获得成熟CIK细胞的数量,测定不同包被方法刺激培养后的细胞表型的变化。结果培养后C组中CD4+细胞百分比明显低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。C组中CD8+细胞所占比例高于A、B组(P<0.05)。C组的T4/T8比值与A、B组差异有统计学意义(P<0.05)。B组NK细胞含量与C组差异有统计学意义(P<0.05)。CD25+细胞在C组中所占比例低于A组(P<0.01)。结论 CD3抗体固相包被及CD28抗体悬浮加入组合对人外周血细胞的刺激增强作用强于CD3抗体固相包被CD28+抗体固相包被组合。

游离甲状腺素化学发光免疫分析方法的建立

目的采用二抗-甲状腺素抗体固相两步包被法,使用鲁米诺-双氧水-辣根过氧化物酶化学发光体系作为检测体系,建立测定血清中游离甲状腺素的化学发光免疫分析方法。方法利用竞争法建立游离甲状腺素的检测体系,分别对该体系进行分析性能评估、2016年度内分泌室间质评,并与进口全自动发光试剂盒检测结果进行一致性检验。结果在4~64pmol/L的校准曲线范围内相关系数0.9995,最低检出限为0.54pmol/L,批内和批间精密度均小于7.0%,稳定性结果良好,不影响检测结果。2016年全国室间质评测定结果均在允许范围内,与进口西门子发光试剂盒有很好的临床符合性,两种试剂盒的样本测值差异不具有统计学意义。结论本方法利用二抗-甲状腺素抗体固相两步包被法,在节约包被原料的同时改善了精密度且提高了灵敏度,最后通过临床血样的一致性评价,与参比试剂盒具有同等的临床使用价值。