一种简便的固相单抗富集CD4^+细胞方法

目的 探索建立一种富集CD4 + 细胞的方法 ,藉以提高免疫细胞化学法计数Th1/Th2细胞的准确性。方法 取 2 1份健康人外周抗凝血 ,无菌条件下分离单个核细胞 (PBMC) ,用CD4McAb包被 2 4孔细胞培养板 ,加入PBMC ,温育后吸弃未结合细胞 ,继而吸打使结合于板上的细胞脱落 ,收集细胞 (阳性选择 ) ;用CD8McAb、CD16McAb、WuBMcAb包被 2 4孔细胞培养板 ,加入PBMC ,温育后吸取未结合细胞 (阴性选择 )。用生物素 链霉亲和素免疫细胞化学法检测富集前及用两种选择方法富集所得细胞中CD4 + 细胞 ,计算百分率、活细胞率和CD4 + 细胞回收率。结果 富集前 2 1份样品的PBMC中CD4 + 细胞百分率 4 3.7%± 3.1% ,经阳性选择和阴性选择后CD4 + 细胞百分率分别为 90 .9%± 2 .8%和 76 .2 %± 2 .5 % ,经卡方检验 ,x2 >x20 .0 0 1,差异有非常显著性 ,阳性选择富集的CD4 + 细胞纯度显著高于阴性选择。经阳性选择和阴性选择后 ,CD4 + 细胞回收率分别为 6 4 .3%± 4 .9%和 6 9.7%± 5 .2 % ,经卡方检验 ,x2 >x20 .0 0 1,差异有非常显著性 ,阴性选择法的细胞回收率明显高于阳性选择法。富集后活细胞率保持在 95 %以上。结论 所建立的固相单抗方法可有效富集CD4 + 细胞并保持很高的活细胞率 ,其中阳性选择是首选方法 ;CD4 + 细?

血小板特异性抗体检测对免疫性血小板减少症的鉴别诊断价值分析

分析免疫性血小板减少症(ITP)经血小板特异性抗体测定辅助病变诊断以及病情鉴定价值。方法 应用血小板抗原单克隆抗体固相化检测(MAIPA)测定ITP组50例、系统性红斑狼疮者(SLE组)34例、类风湿性关节炎(RA组)42例、健康体检(对照组)54例者GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/ⅠX抗体情况,分析荧光强度、阳性情况及诊断效能。结果 ITP组、RA组GPⅡb/Ⅲa抗体荧光强度高于GPⅠb/ⅠX抗体,SLE组GPⅠb/ⅠX抗体荧光强度高于GPⅡb/Ⅲa(P<0.05);GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/ⅠX抗体测定联合手段,测定敏感度以及阴性预测值,数值分别是91.56%、66.41%,相对比单一指标存在差异(P<0.05)。结论 ITP的临床诊断方式,对于患者进行血小板抗体GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/ⅠX的联合测定方式,对于诊断病变准确度高,指导早期合理干预,应用价值突出。

常用血小板抗体检测方法的临床应用比较

目的选用国内外常用的单克隆抗体固相血小板抗体技术(MASPAT)、抗原捕获酶联免疫吸附技术(MACE)、固相红细胞黏附技术(SPRCA)和微柱凝胶技术(MGIA)检测血小板抗体,对4种方法的结果进行比较研究,为临床开展血小板抗体检测提供有价值的参考。方法选择80例输注血小板达3次及3次以上者和15例正常献血员(对照组),以MASPAT法为参比方法,使用MACE、SPRCA和MGIA检测标本血小板抗体。结果 MACE法、SPRCA法与MASPAT法结果差异无统计学意义(P>0.05),MGIA与MASPAT法结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MACE与SPRCA法敏感度与特异度均高于MGIA法,而SPRCA法较MACE法实验时间短,不需特殊仪器,且能进行血小板交叉配合实验,适于临床广泛应用。

临床患者首次进行血小板交叉配型试验的结果分析

目的对临床患者首次进行输注前血小板交叉配型进行分析研究。方法 2010年6月-2016年3月在北京市通州区中心血站首次进行血小板交叉配型试验的所有患者,每位患者分别与随机选取的5名ABO同型献血者捐献的血小板进行交叉配型试验,有阴性、弱阳性和阳性3种试验结果,利用统计学软件进行结果分析。结果共统计了276例患者首次进行血小板进行交叉配型试验的1 380个配型试验,其中配合血小板只有317份,配合率22.97%。男性患者首次交叉配型试验配合血小板所占比例(25.60%)高于女性患者(19.84%),(P<0.05)。不同血型组血小板交叉配型试验结果无显著差异(P>0.05)。不同年龄组血小板交叉配型试验结果有显著差异(P<0.05),60岁以上的老年患者的不配合率(79.76%)高于其他年龄组,且平均配型次数也多于其他年龄组。不同疾病组血小板交叉配型试验结果存在显著差异(P<0.05),再生障碍性贫血患者首次配型阴性结果比例(18.9%)低于其他疾病组。结论不同性别、年龄、疾病患者的首次血小板交叉配型试验结果有差异,临床应根据患者情况及早进行输注前血小板交叉配型,以提高血小板阴性配合率,便于患者输注相合血小板提高输注疗效。