同位素亲和标签(ICAT)系列技术及其在蛋白质组研究中的应用

近年来 ,大量的研究结果表明双向电泳技术由于不能对分子量极高或极低、等电点极酸或极碱和含量低的蛋白质以及膜蛋白质等进行有效分离 ,因此已不能适应目前蛋白质组研究深入发展的需要。同位素亲和标签(isotope-codedaffinitytag,ICAT)技术是最近发展起来的一种用于蛋白质分离分析的新技术 ,由于采用了一种全新的化学试剂 -ICAT试剂 ,同时结合了液相色谱和串联质谱 ,因此不但明显弥补了双向电泳技术的上述不足 ,同时还使高通量、自动化蛋白质组分析更趋简单、准确和快速 ,代表着目前蛋白质组分析技术的主要发展方向。最近针对磷酸化蛋白分析以及与固相技术相结合ICAT技术本身又取得了许多有意义的进展 ,已形成ICAT系列技术。

多同位素内标气相色谱-质谱法测定食品中4种氯丙醇含量

采用多同位素内标法，结合七氟丁酰基咪唑（HFBI）衍生化的气相色谱-质谱（GC—MS）联用技术，建立了食品中4种氯丙醇含量的检测方法。对比了不同来源HFBI衍生试剂的作用性能，对定量内标物和校正标准的选择进行了比较。结果表明：仅用2种同位素内标（3．氯-1，2．丙二醇-d5（或2．氯．1，3．丙二醇．d，）和1，3．二氯．2．丙醇-d5）校正，同样可达到准确测定食品中4种氯丙醇含量的要求；若采用3-氯-1，2-丙二醇（3-MCPD）为标准物定量测定2-氯-1，3-丙二醇（2-MCPD）时，所得2-MCPD结果偏低，仅为以2．MCPD为标准物定量结果（真实值）的52．1％-77．8％。在最佳条件下进行了方法学指标的系统验证。4种氯丙醇的最低检出限为2．5～10gg／kg：在100-2000ng范围内，氯丙醇与内标物峰面积的比值和质量呈线性关系俾z〉0．9990）。以酱油和方便面调料粉为基质，进行100、200、4001xg／kg-1．个水平的加标回收实验，4种氯丙醇的回收率均值为90．1％～107％，相对标准偏差（RSD）为3．37％～10．4％（n=6），均满足痕量分析的要求。

固相微萃取技术及其对监测水体中有机锡化合物的应用

固相微萃取是一种新型的、不断发展和完善的样品前处理方法,与其他技术联用可对多种样品基体中挥发、半挥发性有机化合物进行测定。目前,该技术在毒性金属有机化合物中的应用很少。本文结合固相微萃取在有机锡化合物分析中的应用对其原理、技术特点进行介绍,并对固相微萃取中的萃取涂层、衍生化试剂及其溶液酸度、萃取时间及样液盐度、反应体系温度等参数对有机锡化合物测定的影响作了综述。

红细胞血型系统IgG型不规则抗体固相凝集法检测试剂盒的研发

目的研发基于固相凝集技术的红细胞血型系统IgG型不规则抗体检测试剂盒并评估其性能。方法采用单克隆抗人-RBC抗体包被96孔微板,按100μL/孔加入红细胞悬液形成细胞单层,经过裂解后形成红细胞膜抗原分子单层,加入保护液冷冻干燥后制备成检测用的反应微板;用梯度倍比稀释的多克隆羊抗球蛋白试剂(IgG+C3d/4)与IgG抗-D致敏的O型红细胞反应,筛选构建最佳指示系统;用不同批次的试剂盒检测低效价的IgG抗-D和抗-E,评估试剂盒在保存期内的抗原稳定性;与微柱凝胶抗球蛋白卡、进口同类试剂盒检测不同效价的抗体以测试3者的灵敏度;与进口同类试剂盒对350例血样标本进行检测,以明确2者的检测效能是否一致。结果 20μg/mL的抗人-RBC抗体溶液能够很好的固定红细胞膜抗原分子单层;稀释16倍的多克隆羊抗球蛋白试剂与致敏红细胞构建的指示系统指示效果最佳;试剂盒中冻干的红细胞膜抗原在6个月的保存期内保持稳定;本研究的试剂盒检测灵敏度高于Capture-R Ready Screen试剂盒和抗球蛋白卡;试剂盒与Capture-R Ready Screen对血样标本检测的阳性一致性百分率为98.0%,阴性一致性百分率为99.66%,总一致性百分率为99.43%。结论成功研发了基于固相凝集技术的用于红细胞IgG型同种免疫性不规则抗体检测的试剂盒,该试剂盒具有灵敏度好、保存期长、性能稳定等优势,与进口同类试剂盒等效。

土壤液相和固相快速分离装置

公开号：CN101066513公开日：2007．11．07申请人：上海交通大学一种土壤液相和固相快速分离装置，属于环境科学技术领域。本发明包括：盒子，缓冲垫片，小管，大管，盖子；盒子上端开口，下端封闭，盒子的上端与大管的底部封闭端螺旋固连，丙烯塑料大管的上端开口，大管底部封闭端设有小孔；小管置于大管内，小管为两端中空，上部开口端由盖子封闭，底部开口；缓冲垫片置于大管内，并卡于小管底端，且形状与所述的大管横截面形状相适应。本发明利用实验室简单的设备、避免使用任何有毒化学试剂，批量高效的将土壤液态和土壤固态快速相分离，获得田间自然条件下的土壤溶液。

固相萃取-气质联用结合同位素峰形校正检索技术分析钩吻中的钩吻碱和钩吻碱子

目的：建立固相萃取-气质联用并结合同位素峰形检索技术（SPE-GC／MS-CLIPS）分析钩吻中的钩吻碱和钩吻碱子的方法。方法：样品采用1％盐酸超声提取，经PCx固相萃取小柱净化，再用氨化甲醇进行洗脱，洗脱液浓缩后用丙酮定容。供试液通过气相色谱质谱联用仪结合毛细管柱（HP-5MS0．25mm×30m×0．25μm），用全扫描模式（rrdz40～500）采集数据后，利用同位素-C峰形检索技术对目标峰进行校正分析。结果：根据钧吻植物的生物碱提取物所得到的质谱谱图，通过与NIST标准库的匹配与同位素峰形检索技术推算的分子式，确定了钩吻中的钩吻碱和钩吻碱子。该方法成功应用于钩吻中毒司法鉴定案例2例，共10批样品。结论：固相萃取一气质联用结合同位素峰形校正检索技术可以准确分析钩吻中的钩吻碱和钩吻碱子，能应用于钩吻的植物鉴定和钩吻中毒司法鉴定工作。

离子交换高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉和鸡肝中的高氯酸盐

建立测定鸡肉和鸡肝中高氯酸盐的离子交换高效液相色谱-串联质谱法。试样加^(18)O标记高氯酸根离子后采用1%乙酸溶液-乙腈提取,固相萃取柱净化后,经IC-Pak^(TM)Anion HR(4.6 mm×75 mm,6μm)色谱柱分离,以乙腈-100 mmol/L乙酸铵溶液为流动相,采用电喷雾离子源串联质谱,在负离子扫描方式下以多反应监测模式检测,内标法定量。结果表明:高氯酸盐在0.2~10μg/L质量浓度范围内线性关系良好,定量限为3.0μg/kg。在3个加标水平下的平均回收率为91.8%~96.0%,相对标准偏差为1.8%~6.5%。该方法操作简便、灵敏度高、抗干扰能力强、回收率和重复性良好,适用于鸡肉和鸡肝中高氯酸盐的测定。

食品中碱性橙类染料分析的前处理技术研究进展

碱性橙是一种碱性偶氮类工业染料,禁止作为食品添加剂。由于其易上色且不易褪色,常常被不法商贩非法添加到食品中,对消费者的健康产生严重影响。所以,建立对碱性橙的检测方法十分重要。前处理过程会直接影响到检测结果的准确性和可靠性,因此前处理过程中的提取、分离及净化过程尤为重要。本文在碱性橙的检测方法、提取试剂、提取方法及碱性橙前处理中固相萃取所用材料等方面进行了综述,并对样品前处理过程的优化做出了展望,以期为食品中碱性橙染料的安全监管提供参考意见。

酶联免疫快速检测技术应用的研究

近几年,随着人民生活水平的提高,畜产品作为食品在人民的生活中所占的比例越来越大,其质量安全也越来越受到人们的关注。为了确保可食性畜产品的质量安全,需要一种快速、简便、灵敏度高的检测技术,酶联免疫吸附试验具备这些优点。酶联免疫吸附试验3个基本构成条件为：1）抗原抗体的固相化,即使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。

植物疫害生物快速检疫检验技术研究与固相化检测试剂盒

重庆重大生物技术发展有限公司是重庆市高新技术企业，全国杀虫真菌生物农药定点生产企业。在相关部委项目资助下，经过三年的潜心研究，建立了生物特异基因序列筛选鉴定技术平台以及基于特异靶标的引物、探针鉴定筛选，检测样品快速制备的有害生物快速准确检测技术体系；研制出系列有害生物检测的固相化常温贮运系列检测试剂盒，检测成本低。

测定钩吻中的钩吻碱和钩吻碱子的方法

摘要：本发明公开一种测定钩吻中的钩吻碱和钩吻碱子的方法；旨在提供建立固相萃取-气质联用并结合同位素峰形检索技术（SPE-GC／MS-CLIPS）分析钩吻中的钩吻碱和钩吻碱子；其技术方案：采用固相萃取-气质联用结合同位素峰形校正检索技术分析钩吻中的钩吻碱和钩吻碱子；属于化学分析领域。

SPRIA、ELISA、RPHA对检测血清HBsAg、抗—HBs、抗—HBc的结果比较

血清HBV感染标志的检测,对乙肝的诊断、预后及流行病学研究等具有重要意义,近年用于检测的方法主要有SPRIA(固相放射免疫分析)法、ELISA(酶标固相免疫测定)法和RPHA(反相被动血凝)法。本文报道上述三种方法检测HBsAg、抗-HBs及抗-HBc的比较结果。材料和方法一、材料: (一)试剂:SPRIA药盒:中国同位素公司北方免疫试剂研究所生产(在有效期内使用)。ELISA药盒为上海实业科华生化制品有限公司产品(在有效期内使用)。HBsAg诊断血球为北京生物制品研究所生产,批号90107。 (二)检测血清:本室日常健康体检者血清250例。 (三)检测仪器:FMJ-182A放免γ计数器、DG-3022酶标仪。

化学发光免疫分析新进展

本文综述了2007年至今国内外化学发光免疫分析(Chemiluminescence immunoassay,CLIA)的理论研究成果及应用进展,分别从化学发光反应体系、基因工程试剂、新型固相材料、化学发光免疫分析联用检测技术以及多组分化学发光免疫检测技术等方面进行了阐述,并对化学发光免疫分析技术的发展趋势进行了展望。引用文献113篇。