固相醛化抗原免疫吸附法精制抗血清

在法医血清学中,常用吸收法精制抗血清,用于吸收的抗原物质有人血清、红细胞、初乳、唾液或各种动物血等。由于这些抗原物质吸收时常因稀释或溶血等原因使抗血清的质量受到影响。曾有人对这种传统的精制方法做过一些改进,如用血痕纱布、干燥血粉、以白陶土为载体连接相应抗原作为吸收材料。本文采用戊二醛醛化的方法,将液体状态的抗原物质制成固相抗原用于吸附抗血清,取得了满意效果,现报告如下。

固相免疫吸附法在ABO正反定型/RhD血型检测中的应用

目的探讨固相免疫吸附法在ABO正反定型/RhD血型检测中的应用。方法通过应用新鲜红细胞试管法、微柱凝胶法及固相免疫吸附法同时测定557例临床样本的ABO正反定型/RhD血型,对检测结果进行分析,对固相免疫吸附法进行临床评价。结果固相免疫吸附法与试管法的符合率达100%,与微柱凝胶法的符合率也达100%。结论固相免疫吸附法可以用于ABO正反定型/RhD血型的测定。

精子抗原肽的合成及其在酶联免疫吸附法检测抗精子抗体中的应用价值

目的:以合成精子抗原肽为抗原建立酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测抗精子抗体(AsAb)。方法:通过PS3全自动合成仪合成精子肽P10G、YLPl2和SP17抗原肽,经反相高效液相色谱(HPLC)纯化和质谱鉴定,分别包板制备ELISA试剂盒,并检测血清标本。结果:成功合成3种目的肽,质谱分析结果主峰分子量与理论值基本一致,HPLC结果显示其纯度为97.5%、97.78%和95.5%。以3种合成肽为抗原建立ELISA检测AsAb,与商品化试剂盒比较,均显示极好的一致性(Kappa值>0.75)。结论:全自动固相多肽合成技术可用于高纯度的精子抗原肽合成,所合成的P10G、YLPl2和SP17抗原肽均具有较好的抗原活性,可作为ELISA的包被抗原用于AsAb检测。

酶联免疫吸附法测定红细胞内多聚谷氨酸化甲氨蝶呤浓度的方法建立及其初步应用

目的建立检测红细胞内多聚谷氨酸化甲氨蝶呤（methotrexate polyglutamates,MTXPG）的酶联免疫吸附测定法（ELISA）方法。方法将含有MTXPG的红细胞采用冻融法、化学裂解法、酶法、超声破碎法等方法裂解,加入血清与裂解液在抗坏血酸、巯基乙醇保护液作用下将MTXPG转化为甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）,转化液采用高氯酸、三氯乙酸及饱和硫酸铵溶液沉淀蛋白,最后将溶液p H值调整为3.0～9.0,采用ELISA检测MTX浓度。经方法学考核后,检测临床标本对方法准确性进行评价。结果发现冻融法与冻融法裂解红细胞显著优于酶法和化学裂解法（P〈0.05）,抗坏血酸配制的保护液明显优于巯基乙醇（P〈0.05）,转化液37℃孵育3 h时MTXPG转化完全,高氯酸、三氯乙酸、饱和硫酸铵溶液3种蛋白沉淀剂无明显差异（P〉0.05）,最适p H为6～8,最佳p H值为6.8。浓度在0.2～10.0 ng/m L范围内线性关系良好（r=0.9967）,回收率为96.6%～103.3%,RSD为8.0%～14.3%,日内差异为1.7%～11.7%,日间差异为7.4%～13.5%,RSD均小于15%。检测患者红细胞内MTXPG浓度为（64.75±28.45）ng/m L。结论建立的红细胞内MTXPG的ELISA法有良好的准确性和特异性,方法操作简单易行,可用于临床红细胞内MTXPG浓度的监测。

酶联免疫吸附试验

酶联免疫吸附试验（以下简称ELISA）：是酶免疫测定技术中应用最广的技术。基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体（聚苯乙烯微量反应板）表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。

血小板抗体检测和临床应用进展综述

血小板抗体与多种临床疾病相关,具代表性的有免疫性血小板减少症如胎儿/新生儿血小板减少症,血小板输注无效,和输血后紫癜等。血小板抗体的检测方法历经变化,从传统的固相凝集反应,酶联免疫吸附试验,简易致敏红细胞血小板血清学试验,血小板抗原单抗特异性固相化法,发展至针对血小板表面抗原特异性抗体的免疫荧光和流式细胞术检测等。本文就血小板抗体分类,检测方法,临床应用及血小板抗体相关疾病的个性化治疗进行了综述。

病毒性感染快速诊断的实验室技术(备忘录)

这个备忘录是:对病毒性感染快速诊断的实验室技术作出评价,尤其考虑到在发展中国家的应用。这些技术具有以下特点:(1)借助于免疫荧光及免疫过氧化物酶技术,检测病毒抗原,方法简单、可靠、快速;(2)酶免疫测定(EIA)又称为酶联免疫吸附测定(ELISA),可以检测病毒抗原及抗体,方法快速简便。