固肺消积饮调控上皮-间质转化相关miRNA对肺癌A549细胞转移的抑制作用

目的探讨固肺消积饮对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑瘤作用及其通过调节上皮-间质转化(EMT)相关miRNA对肺癌A549细胞增殖、迁移能力的影响。方法①将40只Balb/c裸鼠随机分为对照组、顺铂组和固肺消积饮低、中、高剂量组,每组8只。各组均采用皮下接种法建立肺癌移植瘤模型,顺铂组于造模后第1,3,5天给予顺铂溶液1 mL腹腔注射,固肺消积饮低、中、高剂量组分别于造模后给予固肺消积饮13 g/kg、26 g/kg、52 g/kg灌胃14 d,观察各组皮下成瘤情况,计算移植瘤体积、瘤重和抑瘤率。②将40只SD大鼠随机分为4组各10只,空白组给予生理盐水灌胃7 d制备空白血清,固肺消积饮低、中、高剂量组分别给予固肺消积饮9 g/kg、18 g/kg、36 g/kg灌胃7 d制备固肺消积饮低、中、高剂量含药血清。取肺癌A549细胞,实验分为空白组、固肺消积饮低含药血清、固肺消积饮中含药血清、固肺消积饮高含药血清组,采用CCK-8法检测各组A549细胞增殖活性。取肺癌A549细胞,实验分为空白组和固肺消积饮高含药血清组,流式细胞仪检测A549细胞周期,Transwell小室实验检测A549细胞迁移能力,Western blot和RT-RCR法检测A549细胞中EMT相关标志物蛋白及mRNA表达情况;采用试剂盒法提取2组经处理的A549细胞外泌体,RT-PCR法检测外泌体中miR-21和miR-23a的mRNA表达量。结果固肺消积饮能够剂量依赖性地抑制移植瘤生长,其中固肺消积饮高剂量组移植瘤体积和瘤重均明显低于固肺消积饮低、中剂量组和顺铂组(P均<0.05),抑瘤率均明显高于固肺消积饮低、中剂量组和顺铂组(P均<0.05)。固肺消积饮中、高含药血清组培养48 h和72 h后细胞活力均明显低于空白组(P均<0.05)。与空白组比较,固肺消积饮高含药血清组细胞培养48 h后,分布于G1期的细胞百分比明显增高(P<0.05),S期的细胞百分比明显降低(P<0.05),迁移细胞数明显减少(P<0.05),细胞中E-cadherin蛋白及mRNA表达量均明显升高(P均<0.05),细胞中TGF-β、MMP-2、MMP-3蛋白及mRNA表达量和细胞外泌体中miR-21、miR-23a mRNA表达量均明显降低(P均<0.05)。结论固肺消积饮可有效抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移和EMT,并使细胞阻滞在G1期,其作用机制可能与下调外泌体miR-21和miR-23a的表达相关。

固肺消积饮联合GP方案治疗非小细胞肺癌的疗效分析

目的:探讨固肺消积饮联合吉西他滨+顺铂(GP)方案治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及对患者中医证候、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、微小RNA-23a(miR-23a)影响。方法:选取2020年4月—2022年4月本院收治的106例NSCLC患者为观察对象,随机分为对照组和观察组,各53例。对照组以GP方案治疗,观察组增加固肺消积饮治疗。评估比较两组患者临床疗效、中医证候积分、血清学指标、不良反应等。结果:观察组患者客观缓解率(ORR)为73.58%,高于对照组的54.72%,观察组疾病控制率(DCR)为84.91%,高于对照组的67.92%(P<0.05)。治疗后观察组患者胸闷气短、咳嗽咯血、疲乏无力、食欲不振等的中医证候积分均低于对照组(P<0.05)。治疗后观察组患者MMP-2、STAT3、miR-23a均低于对照组(P<0.05)。治疗期间两组不良反应发生率比较无统计学差异(P>0.05)。结论:固肺消积饮联合GP方案治疗NSCLC疗效显著,能够改善患者的中医证候,抑制MMP-2、STAT3、miR-23a表达,治疗安全性良好,可临床推荐。

固肺消积饮上调外泌体microRNA-186-5p表达抑制肺癌A549细胞迁移和侵袭

目的:研究外泌体途径在固肺消积饮抑制肺癌A549细胞迁移和侵袭中的作用,及microRNA-186-5p(miR-186-5p)在其中的作用机制。方法:制备固肺消积饮含药血清和无药血清,分别诱导A549细胞、转染miR-186-5p NC的A549细胞、转染miR-186-5p inhibitor的A549细胞,获得4种外泌体,即NC-Exo、XJD-Exo、XJD-miR-186-5p NC-Exo、XJD-miR-186-5p inhibitor-Exo。透射电镜观察外泌体形态;Western blot检测CD63、TSG101和Calnexin表达;荧光标记法检测A549细胞摄取外泌体情况;RT-qPCR检测外泌体中miR-186-5p表达。实验分为:A组(A549细胞+PBS)、B组(A549细胞+NC-Exo)、C组(A549细胞+XJD-Exo)、D组(A549细胞+XJD-miR-186-5p NC-Exo)、E组(A549细胞+XJD-miR-186-5p inhibitor-Exo)。Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;Western blot检测上皮-间质转化相关蛋白表达。结果:外泌体呈典型囊泡状,高表达表面标志物CD63和TSG101,低表达Calnexin,荧光标记的外泌体可被A549细胞大量摄取至胞浆内。NC-Exo、XJD-miR-186-5p inhibitor-Exo细胞miR-186-5p表达低于XJD-Exo、XJD-miR-186-5p NC-Exo细胞(P<0.05)。A、C、D组迁移、侵袭能力低于B、E组(P<0.05)。A、C、D组E-cadherin表达高于B、E组,N-cadherin、vimentin表达低于B、E组(P<0.05)。结论:固肺消积饮可通过上调外泌体miR-186-5p表达抑制肺癌A549细胞迁移和侵袭。

固肺消积饮对非小细胞肺癌患者PI3K/AKT信号通路及其下游血管内皮生长因子的影响

目的探究固肺消积饮对非小细胞肺癌患者PI3K/AKT信号通路及其下游血管内皮生长因子(VEGF)的影响并观察其临床疗效。方法选取2018年1月—2019年6月于我院治疗的非小细胞肺癌患者68例,采用随机数表法分为对照组和观察组,每组34例。两组患者均给予常规化疗,观察组加用固肺消积饮,观察并比较两组患者PI3K/AKT信号通路蛋白及其下游VEGF的表达水平、临床疗效、症状评分以及不良反应发生率。结果观察组患者血清PI3K/AKT信号通路蛋白及其下游VEGF的表达水平显著低于对照组(P<0.05);观察组患者的临床疗效明显优于对照组(P<0.05);观察组患者咳嗽咳痰、胸闷气短、乏力等症状评分显著低于对照组(P<0.05);两组患者的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论固肺消积饮可提高患者的化疗有效率,可能是通过PI3K/AKT信号通路抑制VEGF的表达,且未增加不良反应,安全性较高,值得临床推广应用。

固肺消积饮联合GP方案对肺癌患者碱性成纤维细胞生长因子的影响

目的:探讨固肺消积饮联合GP方案(顺铂+吉西他滨)对肺癌患者碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响。方法:收集2017年1月—2019年1月在我院治疗的118例肺癌患者临床资料,应用随机数表法均分为GP方案组和联合组。GP方案组给予GP方案进行治疗,联合组加用固肺消积饮进行治疗。评估两组的临床效果及毒副作用,分析治疗前后的bFGF和血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果:联合组治疗后总有效率与疾病控制率分别为84.75%(50/59)和100.00%(59/59),显著高于GP方案组的62.71%(37/59)和88.13%(52/59),bFGF和VEGF水平显著低于GP方案组,血小板、白细胞减少发生率显著低于GP方案组,差异显著(P<0.05)。结论:应用固肺消积饮联合GP方案对肺癌进行治疗,效果显著,明显降低bFGF和VEGF水平,且安全性较高,值得推广。

固肺消积饮治疗非小细胞肺癌作用机制的网络药理学分析

目的基于网络药理学方法探讨固肺消积饮治疗非小细胞肺癌的可能作用机制。方法利用TCMSP数据库,采用口服生物利用度筛选和药物相似性评价筛选固肺消积饮药物有效成分,并预测疾病靶点,构建成分-靶点网络图,并筛选核心网络图,用DAVID数据库进行基因富集分析,获得GO功能注释结果及KEGG通路分析注释结果,并在KEGG通路分析中获得参与相关通路的候选基因及功能。结果从TCMSP数据库筛选出固肺消积饮的149种活性成分,与肺癌相关的246个潜在靶标;成分-靶点网络图显示1502个成分-靶点相互作用,以其中相关程度值大于8的53种成分构建核心网络图;基因富集分析提示,42个靶点参与多条通路,其中大量靶点与PI3K-AKT通路及Ca^(2+)信号通路调控有关。结论固肺消积饮可能通过调控PI3K-AKT通路及C^(2+)信号通路而达到延缓非小细胞肺癌化疗耐药、降低化疗毒副作用、增加化疗敏感性的效果。

固肺消积饮联合支气管化疗灌注治疗老年局部晚期非小细胞肺癌27例

目的:观察固肺消积饮联合支气管化疗灌注治疗老年局部晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法:将51例老年局部晚期非小细胞肺癌患者随机分为治疗组(27例)和对照组(24例)。2组均行支气管化疗灌注治疗,治疗组在其基础上加用固肺消积饮治疗,对照组在其基础上加用六君子汤治疗。观察2组患者无进展生存期(PFS)、实体瘤疗效、中医证候疗效、卡氏评分(KPS)疗效,并观察治疗过程中所出现的消化道不良反应、骨髓抑制情况。结果:PFS治疗组为7.19个月,对照组为5.80个月,2组比较,差异有统计学意义(P <0.05)。治疗组瘤体的客观缓解率(ORP)、疾病控制率(PCR)及中医证候评分总改善率、KPS评分总有效率分别为29.63%(8/27)、85.19%(23/27)、88.89%(24/27)、92.59%(25/27),均高于对照组的16.67%(4/24)、54.17%(13/24)、54.17%(13/24)、45.83%(11/24),2组比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。在安全性方面,胃肠道不良发生、血红蛋白减少、血小板减少的总发生率治疗组分别为66.67%(18/27)、44.44%(12/27)、0(0/27),对照组分别为91.67%(22/24)、75.00%(18/24)、12.50%(3/24),2组比较,差异均有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。结论:固肺消积饮协同化疗灌注治疗老年局部晚期非小细胞肺癌能提高患者PFS,缩小瘤体,改善中医证候,提高生活质量,并减轻支气管化疗灌注所发生的毒副作用。