脂肪酸合成相关的固醇调节元件结合转录因子1在肿瘤中的研究进展

脂肪酸合成增加是肿瘤细胞的第三大代谢表型,固醇调节元件结合转录因子1(sterol regulatory element binding transcription factor 1,SREBP1)是脂质代谢,尤其是脂肪酸合成相关的重要核转录因子。SREBP1在多种肿瘤中有异常高表达,并在肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭、耐药性及能量代谢等方面发挥着重要作用。本文就SREBP1的结构、功能,在肿瘤细胞中SREBP1的表达、作用及相关通路进行综述。

固醇调节元件结合蛋白-1c在肝脂肪合成中转录调节

固醇调节元件结合蛋白 -1c(SREBP -1c)是脂肪合成基因的重要转录调节因子 ,又称脂肪细胞决定和分化因子 1(AdipocyteDetermi nationandDifferentiationfactor -1,ADD1) ,它是动物肝脏中主要的转录物 ,主要调节动物脂肪合成和葡萄糖代谢相关基因的表达。研究发现 ,SREBP -1c的过度表达与肝脏等非脂肪组织的脂质积聚相关。SREBP -1c调节体内的脂肪合成主要是通过改变自身的mRNA水平来实现的 ,即生脂酶的转录调节是由SREBP- 1cmRNA的数量控制的。另一方面 ,LXRs、胰岛素、胰高血糖素等因素对SREBP- 1c的转录有调节作用。

胰岛素样生长因子-1通过细胞外信号调节激酶1/2通路下调转录因子基本转录元件结合蛋白表达抗心肌细胞凋亡

目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对大鼠心肌细胞凋亡保护作用的基因调控机制。方法体外培养新生大鼠心肌细胞,10nmol/L IGF-1刺激的同时,分别加入磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2和Raf-1 3条通路抑制剂(20μmol/L),通过RT-PCR及Western blotting方法观察IGF-1调节基本转录元件结合蛋白(BTEB)的基因表达及其通路调控。100μmol/L H2O2处理诱导心肌细胞凋亡,通过DNA梯度分析、Annexin V-FITC/PI双染色法、Caspase-3活性测定、Hoechest33258染色法观察用BTEB特异性siRNA人为下调BTEB基因表达后对心肌细胞凋亡的影响。结果大鼠心肌细胞经IGF-1刺激60min后,BTEB mRNA和蛋白表达均明显下降;与对照组相比,加入ERK1/2通路抑制剂PD98059组BTEB的mRNA和蛋白表达均明显增高(P<0.01);H2O2诱导的大鼠心肌细胞于下调BTEB表达后,DNA片段化改善,心肌细胞凋亡率下降(P<0.05),Caspase-3活性降低(P<0.05),凋亡小体减少,与IGF-1的抗心肌细胞凋亡效果相似。结论 IGF-1可以通过ERK1/2通路下调转录因子BTEB基因表达而发挥抗心肌细胞凋亡的作用。

冠状动脉综合征患者胆固醇调节元件结合蛋白-1、血小板活化因子水平变化及其临床意义

目的探讨冠状动脉综合征(ACS)患者血清胆固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)、血小板活化因子(PAF)的变化及其临床意义。方法选取青海省心脑血管病专科医院经冠状动脉造影检查确诊的120例ACS患者作为ACS组、120例健康体检对象作为对照组。对比两组研究对象的一般资料、血清SREBP-1、PAF水平;采用简单线性相关分析法分析血清SREBP-1、PAF与Gensini评分的相关性。结果ACS组的血清SREBP-1、PAF水平显著高于对照组(P<0.05)。重度狭窄组患者的血清SREBP-1、PAF水平显著高于轻度、中度组(P<0.05)。中度狭窄组患者的血清SREBP-1、PAF水平显著高于轻度组(P<0.05)。ACS患者的血清SREBP-1、PAF水平与Gensini评分均呈显著的正相关关系(r=0.539、0.557,P<0.05)。结论ACS患者的血清SREBP-1、PAF水平增高,可能与冠状动脉病变严重程度有关。

固醇调节元件结合蛋白-1对血管紧张素Ⅱ介导的肾小球纤维化的影响

目的探讨固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)在血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)诱导肾小球纤维化过程中的作用。方法体外培养人肾小球系膜细胞株HMC,取第三代培养细胞用作实验研究,探讨Ang-Ⅱ对SREBP-1表达刺激的最佳浓度及作用时间。随后采用该时间点和剂量的AngⅡ,将细胞分组为:正常对照组、Ang-Ⅱ组、Ang-Ⅱ+fatostatin组、Ang-Ⅱ+氯沙坦组。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅲ型胶原(COLⅢ)、纤维连接蛋白(FN)、SREBP-1和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的mRNA相对表达量。蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测CTGF、COLⅢ、TGF-β_1、FN和SREBP-1的蛋白表达量。结果Ang-Ⅱ对SREBP-1表达刺激的最佳浓度及作用时间为100 nmol/L和3 h。与正常对照组相比,Ang-Ⅱ组能够促进HMC中CTGF、COLⅢ、FN的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。与Ang-Ⅱ组相比,Ang-Ⅱ+fatostatin组、Ang-Ⅱ+氯沙坦组中CTGF、COLⅢ、TGF-β_1、FN和SREBP-1均明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Ang-Ⅱ通过血管紧张素1型受体(AT1)激活SREBP/SREBP裂解激活蛋白(SCAP)信号途径,引起TGF-β_1表达增加,进而导致肾小球纤维化。

转化生长因子β_1对Ⅰ型胶原基因转录的调节

在肝纤维化形成进程中,早期以Ⅲ型胶原增加为主,随着病理的发展,胶原生成主要由Ⅲ型向Ⅰ型转变,这一现象为肝纤维化病理过程中的一个明显特征。研究Ⅰ型胶原生成增加的机制,已是肝纤维化研究的重要一环。转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGFβ1）在肝纤维化发生过程中,对Ⅰ型胶原蛋白的积聚起着关键的作用。因此,了解TGFβ1对Ⅰ型胶原基因表达的调节,可以更深入地认识肝纤维化的病理生物学机制,有助于对肝纤维化的发生发展进行防治。

沉默信息调节因子1调控胆固醇合成对大鼠视神经损伤后RGCs修复的作用机制

目的:探讨沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)调控胆固醇合成在视神经损伤修复中的作用机制。方法:制备视神经损伤的大鼠模型,随机数字法将70只大鼠分为正常组10只,白黎芦醇治疗组(实验组)30只和PBS缓冲液对照组(对照组)30只;再将实验组和对照组分别分为三组,每组各10只;将白黎芦醇或PBS分别注射实验组和对照组大鼠,观察视神经损伤后第7,14,21d处死大鼠。分离视网膜,观察各组大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGCs)的存活数量。分离术眼视神经,检测其胆固醇含量;RT-PCR法检测SIRT1、SREBP2和HMGCR的mRNA表达水平;Western blot法检测SIRT1、SREBP2和HMGCR蛋白表达水平。结果:损伤模型大鼠的视网膜RGCs的存活数量以及视神经胆固醇含量均明显减少(P<0.01);SIRT1、SREBP2和HMGCR的mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.05),并呈时间依赖关系。三组分三个时间点,随时间延长损伤均加重,而治疗组损伤程度较对照组明显减弱。而白黎芦醇治疗组的视神经胆固醇含量以及SIRT1、SREBP2、HMGCR的mRNA和蛋白表达水平,RGCs存活数量均明显回升(P<0.01),且呈时间依赖关系。结论:白黎芦醇通过上调SIRT1、SREBP-2及其下游调控基因HMGCR的表达,从而进一步促进神经元细胞的胆固醇合成以及视网膜神经节细胞的损伤后修复过程。

肝细胞中活化转录因子ATF6抑制SREBP1的转录活性

内质网膜定位的活化转录因子ATF6和SREBP1均是经过蛋白酶切水解激活,激活后的ATF6(N)和SREBP1(N)进入细胞核内,分别指导内质网膜未折叠蛋白聚集反应相关基因和脂肪酸合成相关基因的表达.研究发现,肝细胞内葡萄糖饥饿激活ATF6并抑制SREBP1的转录活性及其靶基因的表达.过表达ATF6(N)能够抑制SREBP1介导的转录及其下游基因的表达.免疫共沉淀实验显示,ATF6(N)在细胞核内结合SREBP1(N),这种结合在无糖状况下增强.不同功能区缺失分析表明,ATF6和SREBP1通过亮氨酸拉链(leucinezipper)功能区相互作用.在葡萄糖饥饿状况下,ATF6对SREBP1转录活性的抑制保证了细胞基本生命活动所需要的能量.

奶牛SREBP1蛋白在乳腺上皮细胞的表达定位及对SCD1基因启动子的转录调控

【目的】固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)作为核转录因子,对于细胞脂肪合成酶基因的表达发挥着重要的调控作用。论文旨在奶牛乳腺上皮细胞中研究SREBP1对于SCD1基因启动子的转录调控作用,为进一步明确SREBP1对于靶基因的转录调控机制提供理论基础。【方法】以荷斯坦奶牛乳腺组织的c DNA为模板,采用分段克隆的方法获得SREBP1基因的编码序列,通过重组酶与pc DNA3.1载体进行重组环化构建pc DNA3.1-SREBP1表达载体,将构建的载体测序验证后提取质粒,转染奶牛乳腺上皮细胞。以EIF3K基因为内参基因,采用荧光定量PCR检测SREBP1基因m RNA的表达差异;采用免疫荧光的方法对SREBP1进行标记,以DAPI复染细胞核,激光共聚焦观察SREBP1蛋白的亚细胞定位;转染含有不同调控元件的SCD基因启动子,同时转染1.0μg pc DNA3.1-SREBP1作为处理,荧光素酶报告基因系统分析启动子活性;分别转染0.25、0.5和1μg的pc DNA3.1-SREBP1载体,分析p GL3-SCD 2和p GL3-SCD3启动子活性与SREBP1之间的量效关系。【结果】分段克隆得到的PCR产物分别为1 170、1 116、363和900 bp的片段,经过与pc DNA3.1载体重组后获得pc DNA3.1-SREBP1表达载体,经酶切和测序验证,发现除1个无义突变外,与标准序列完全相同,整个序列长度达到3 510bp;将pc DNA3.1-SREBP1载体转染乳腺上皮细胞后,Real-time PCR检测发现与转染空载体的对照组相比,SREBP1基因的m RNA表达倍数增强130.4倍(P<0.001);激光共聚焦观察发现,DAPI染色的细胞核呈蓝色,免疫荧光标记的SREBP1呈绿色,二者融合后呈现青色,共定位在乳腺上皮细胞核中;启动子活性检测发现,与p GL3-SCD1、p GL3SCD 2相比,SREBP1处理能够极显著增加p GL3-SCD3、p GL3-CD4启动子的活性(P<0.001),分别比对照组提高了1.0倍和0.7倍,进一步分析发现,在用0.25—1μg的pc DNA3.1-SREBP1处理后,与p GL3-SCD2的启动子活性持续下降相比,p GL3-SCD3的启动子活性从59.81上升到108.43(P<0.001),二者存在剂量效应关系,结合SCD2和SCD 3启动子上主要的结构差异SRE元件(5′-AGCAGATTGCG-3′),推测此序列可能是SREBP1调控SCD基因启动子转录的结合序列。【结论】克隆构建奶牛SREBP1基因表达载体,亚细胞定位SREBP1蛋白主要在乳腺上皮细胞核中,SREBP1可以与SRE调控元件结合促进SCD1基因启动子的转录。

三七多糖通过SREBF-1及ACCa改善2型糖尿病大鼠肝脏脂肪代谢的研究

目的:观察三七多糖是否对高脂高糖饮食诱导的2型糖尿病(Type 2 Diabetes,T2D)大鼠肝脏脂肪代谢有影响,并分析影响的可能机理。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组以及三七多糖治疗组,模型组以及三七多糖治疗组给予高脂高糖饮食6个月建立T2D模型,模型建立成功后三七多糖治疗组给予三七多糖57 mg·kg-1·d-1,模型组给予生理盐水灌胃参照,分别在治疗4周和8周后处死大鼠各半,观察其对脂肪代谢的影响。结果:肝脏病理学检测治疗4周后,空白组几乎没有脂肪颗粒,模型组大鼠肝脏有明显的脂肪沉积,三七多糖4周组肝脏脂肪颗粒沉积明显减少,治疗8周后,相较于4周组脂肪颗粒沉积进一步减少,但仍有一定的炎症反应;三七多糖治疗4周后大鼠CHOL、LDL-c、TG以及胰岛素抵抗指数明显低于模型组(P<0.05),HDL-c明显高于模型组(P<0.05),治疗8周后,相较于治疗4周后并没有进一步改善。大鼠SERBF-1以及ACCa m RNA 4周时即出现出明显的下降(P<0.05),8周时基本维持在4周的水平,大鼠SERBF-1以及ACCa蛋白表达4周时即出现出明显的下降(P<0.05),8周时基本维持在4周的水平。结论:三七多糖可以在短期内通过调节胰岛素抵抗指数,进而改善脂代谢相关酶SERBF-1c以及ACCa的表达,进而改善大鼠肝脏脂代谢。

糖尿病肾脏疾病患者转化生长因子调节元件结合蛋白β1对胆固醇1活化和功能的调控作用研究

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在DKD发病中的作用机制。方法 TGF-β1(2 ng/ml)和/或高糖(HG,24. 4 mmol/L)处理肾小球系膜细胞(GMC),Western blot检测胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)和脂肪酸合成酶(FAS),油红O确定GMC中脂滴形成;SD大鼠左肾灌注携带TGF-β1基因腺病毒载体(AdTGF-β1)和空载体(AdLacZ)。处死后取左肾,免疫组织化学检测SREBP-1和p-Smad3蛋白表达。结果与正常细胞对照组(Con)比较,TGF-β1作用于GMC后,mSREBP-1蛋白表达增加,且呈时间依赖性[(1. 06±0. 55)vs(1. 50±0. 44)vs(1. 59±0. 68)],[(1. 23±0. 52)vs(1. 34±0. 65)];TGF-β1+HG作用也增加了mSREBP-1的蛋白表达。与Con组比较,TGF-β1处理增加了GMC FAS的蛋白表达[(1. 18±0. 04)vs(1. 38±0. 11)vs(1. 40±0. 13),P<0. 05],油红O证实GMC出现脂滴,呈红染颗粒状;大鼠肾脏灌注AdTGF-β1免疫组织化学法发现,TGF-β1能明显增加SREBP-1和p-Smad3的蛋白表达。结论 TGF-β1是参与DKD的重要致病因子,其作用机制可能与诱导SREBP-1活化,引起GMC细胞内脂质沉积密切相关。TGF-β1可能为DKD的预防和治疗提供新方法。

SREBP1c/cm对PERK启动子转录活性及表达的差异性调控

目的探讨转录因子固醇调节元件结合蛋白(SREBP1c)及其活性形式(SREBP1cm)对人蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)的调控作用。方法构建人PERK启动子截短体报告基因载体,与内参质粒pRL-SV40共转入人胚肾细胞HEK293检测荧光素酶活性;用pc DNA3.1(-)-SREBP1c、pc DNA3.1(-)-SREBP1cm与PERK启动子转录活性核心区域共转293T细胞,双荧光素酶报告基因分析SREBP1c及活性形式SREBP1cm对PERK启动子转录活性的调控;RT-PCR和免疫印迹法检测SREBP1c、SREBP1cm对PERK mRNA和蛋白表达的影响。结果成功构建PERK启动子截短体报告基因载体,确定了PERK启动子转录活性核心区域;双荧光素酶报告基因分析结果显示SREBP1c抑制PERK启动子的转录活性,而SREBP1cm促进PERK启动子的转录活性。SREBP1c抑制PERK mRNA和蛋白的表达(P<0.05),SREBP1cm促进PERK mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论 SREBP1c和SREBP1cm对PERK启动子转录活性及其表达具有相反的调控作用。

细胞因子信号转导抑制物-3及固醇调节元件结合蛋白-1c通路在脂肪变性HepG2／HepG2．2．15细胞中的变化

目的探讨HepG2和HepG2.2.15细胞脂肪变性对细胞因子信号转导抑制物-3（supressors of cytokine signaling-3，SOCS-3）、固醇调节元件结合蛋白-1c（sterol regulatory element binding proteins，SREBP-1c） mRNA和蛋白表达的影响。方法油酸诱导HepG2和HepG2.2.15细胞脂肪变性，成功构建脂变的细胞模型，分为HepG2对照组、HepG2.2.15对照组、HepG2脂变组和HepG2.2.15脂变组。实时定量PCR法检测细胞中SOCS-3及SREBP-1c mRNA的表达情况，蛋白质印迹法测定细胞中SOCS-3及SREBP-1c蛋白的表达变化。统计学处理采用单因素方差分析和Tukey法。 结果SOCS-3 mRNA表达水平，HepG2.2.15对照组显著低于HepG2对照组，HepG2脂变组显著低于HepG2对照组，差异均有统计学意义（均P〈0.01）；HepG2.2.15脂变组较HepG2.2.15对照组也降低，但差异无统计学意义（P＝0.173）；细胞与脂变有交互作用（F＝25.547，P〈0.01）。SREBP-1c mRNA水平，HepG2.2.15对照组表达低于HepG2对照组，HepG2.2.15脂变组表达明显高于HepG2.2.15对照组，差异均有统计学意义（均P〈0.01）；HepG2脂变组与HepG2对照组差异无统计学意义（P＝1.000）；细胞与脂变有交互作用（F＝5.04，P〈0.05）。蛋白质印迹法检测结果显示，两组细胞脂变48、72 h后SOCS-3和SREBP-1c蛋白水平显著高于非脂变细胞。结论两组细胞脂变后SOCS-3和SREBP-1c蛋白的表达出现上调。细胞与脂变之间存在交互作用，HBV基因可以抑制脂变细胞SOCS-3 mRNA的表达，促进SREBP-1c mRNA的表达。

固醇调节元件结合蛋白1c激活大鼠Patatin样磷酯酶结构域蛋白3基因转录

目的探讨固醇调节元件结合蛋白1c（SREBP-1e）对Patatin样磷酯酶结构域蛋白3（PNPLA3）基因的转录调控作用。方法构建7周龄雄性体重匹配的禁食（24h）以及禁食后再喂食（48h）SD大鼠（自由饮食组3只，饥饿组3只，再喂食组4只）和高脂及小剂量链脲佐菌素诱导的2型糖尿病sD大鼠（正常对照组5只，2型糖尿病组6只）。用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和Western blotting法检测各组大鼠肝脏组织中SREBP一1c和PAPM3的表达水平。将大鼠PⅣP翻3启动子5’端上游-1000bp序列分成3段，分别构建荧光素酶报告载体（R—PⅣPM3．1、R—PM似3—2、R—PNPL43—3），转染人正常肝细胞株L02，比较3个载体基础荧光素酶活性以及SREBP-1e过表达诱导的荧光素酶活性。分析上述实验中荧光素酶活性最高的PNPLA3启动子片段可能的SREBP-1c结合位点（SRE），分别构建野生型和SRE突变型报告载体，比较两个载体荧光素酶活性。多组定量资料比较用方差分析，两组定量资料比较用t检验。结果与自由饮食组相比，饥饿组大鼠肝脏SREBP—lc、PNPLA3和脂肪酸合成酶FAS基因表达均下降，再喂食组三者表达显著升高，差异均有统计学意义（F=114．14，334．11，754．20，均P〈0．05）。与正常对照组相比，2型糖尿病组SREBP-1e、PNPLA3基因（t=-18．39，-30．07，均P〈0．05）及蛋白表达（t=4．58，6．81，均P〈0．05）均显著增高。R—PNPLA3-1报告载体基础荧光素酶活性较对照升高51．13倍（t=-28．93，P〈0．05），R一删PM3—2和R—PNPLA3—3无基础荧光素酶活性；在L02细胞中，转染SREBP-1c表达质粒的R—PⅣPL43—1组荧光比值较转染空质粒的组升高2．63倍（t=-7．64，P〈0．05），而R—PⅣPM3．2组及R—PNPLA3—3组转染SREBP-1e表达质粒荧光比值较转染空质粒组均无变化；PNPLA3启动子-100～-911）p存在SRE，SRE突变的报告载体（MUT—R—PNPLA３—1）荧光比值较野生型（R—PNPLA３-1）降低40．80％（t=4．99，P〈0．05）。结论SREBP-1c通过PNPLA３基因启动子－100～－91bp激活大鼠PNPLA3基因转录。

血清CCL20、FAS、SREBP-1c联合检测在结直肠癌临床诊断及预后评估中的应用价值探讨

目的探讨血清趋化因子CC亚家族配体20(CCL20)、脂肪酸合酶(FAS)、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)联合检测在结直肠癌临床诊断及预后评估中的应用价值。方法选取2017年1月至2020年5月106例结直肠癌患者为研究对象,50例健康体检者为对照,均检测血清CCL20、FAS、SREBP-1c,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估CCL20、FAS、SREBP-1c的诊断价值,并随访预后结局,进行生存分析。结果结直肠癌组的血清CCL20、FAS、SREBP-1c水平均高于健康对照组(P<0.05)。血清CCL20、FAS、SREBP-1c诊断结直肠癌的灵敏度分别为80.00%、78.00%、76.00%,特异度分别为68.60%、81.40%、75.50%。血清CCL20、FAS、SREBP-1c水平与分化程度、临床分期有关联(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、大体分型、组织学分型无关联(P>0.05)。CCL20、FAS、SREBP-1c高水平组3年无进展生存率分别为41.67%、42.86%、41.11%,低于CCL20、FAS、SREBP-1c低水平组的68.18%、73.33%、81.25%(P<0.05)。CCL20、FAS、SREBP-1c高水平组无进展生存时间为33个月,短于CCL20、FAS、SREBP-1c低水平组的38、48、44个月(P<0.05)。结论血清CCL20、FAS、SREBP-1c可能与结直肠癌的发生发展有一定关联,可作为结直肠癌的辅助诊断筛查和预后随访指标,血清CCL20、FAS、SREBP-1c高水平可能预示着肿瘤进展和预后不良。

GLP-1下调非酒精性脂肪肝大鼠SOCS-3和SREBP-1c的表达

目的:探讨胰高血糖素样肽-l(GLP-1)对非酒精性脂肪肝大鼠SOCS-3和SREBP-1c mRNA表达的影响。方法:将雄性SD大鼠32只随机分为正常对照(NC)组、高脂(HF)组和HF+利拉鲁肽(Lira)组。HF组和HF+Lira组给予高脂饲料喂养16周,HF+Lira组高脂喂养12周后,给予Lira 600μg·kg^(-1)·d^(-1)腹腔注射4周。在16周末处死大鼠。全自动生化仪检测血清ALT、AST、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC);GPO-PAP法测定肝脏TG含量;酶联免疫法测定空腹胰岛素,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);光学显微镜下观察肝脏病理变化;RTqPCR法测定肝组织SOCS-3和SREBP-1c的mRNA表达水平。结果:与NC组相比,HF组血清ALT、AST、TG、TC、肝TG、FINS及HOMA-IR均明显升高(P<0.01);HF+Lira组与HF组相比,血清的ALT、AST、TG、TC、肝TG、FINS及HOMA-IR均下降,差异有统计学显著性(P<0.05)。HF组肝组织SOCS-3和SREBP-1c的mRNA表达水平较NC组显著增强(P<0.01);HF+Lira组较HF组SOCS-3和SREBP-1c的mRNA表达显著下降(P<0.05)。结论:Lira可能通过下调肝组织SOCS-3和SREBP-1c的mRNA表达,改善IR,减少肝脏TG沉积,从而对非酒精性脂肪性肝病起到治疗作用。

PGC-1β和SREBP-1c在猪脂肪细胞分化过程中的相互作用

为研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1β(PGC-1β)与SREBP-1c在猪前体脂肪细胞分化过程中的表达规律及其相互作用,分析二者功能上的联系,采用Western印迹及细胞免疫荧光技术检测PGC-1β与SREBP-1c在猪脂肪细胞分化过程中的表达,shRNA干扰和免疫共沉淀技术分别探讨了PGC-1β对SREBP-1c的调节作用及2种蛋白质在体内的结合活性.结果显示,PGC-1β与SREBP-1c蛋白的表达均随猪脂肪细胞分化逐渐增加,且在分化细胞的核和胞浆中均有分布.干扰PGC-1β显著下调了SREBP-1c和脂肪细胞分化标记基因C/EBPα的表达(P<0.05),同时降低了细胞内甘油三酯的积累.免疫共沉淀证明,PGC-1β与SREBP-1c蛋白在猪脂肪细胞分化过程中存在结合作用.以上结果表明,PGC-1β能够促进猪脂肪细胞分化并对SREBP-1c有调节和结合作用,推测二者的结合可能与其对脂肪细胞的分化调节机制相关,将对PGC-1β调控脂肪细胞分化的功能和机理研究提供新途径.

有氧运动及其联合饮食干预影响非酒精性脂肪肝患者血浆SREBP-1c、RBP4水平的研究

目的:探讨有氧运动、饮食控制对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清SREBP-1c、RBP4水平的影响。方法:将NAFLD患者共53例随机分为对照组(C)、运动组(E)、饮食控制组(D)和运动+饮食控制组(ED);另有12例健康自愿者组成健康对照组(N)。E组运动处方干预,D组饮食干预,ED组运动联合饮食干预。实验前后分别检测身体形态(BMI;WHR)和血液生化指标(SREBP-1c;RBP4;TNF-a等)。结果:1WHR指数实验后E组、DE组较实验前显著下降(P<0.05);实验后DE组较C、E组显著下降(P<0.05)。2血浆TG及LDL/HDL实验后E组、DE组较实验前显著下降(P<0.05);实验后DE组血浆TG、E组和DE组LDL/HDL较C组显著降低(P<0.05)。3血浆FINS水平及HOMA-IR实验后E、DE组较实验前显著下降(P<0.05);实验后HOMA-IR指数E组和DE组较C组显著下降(P<0.05)。4E组RBP4、D组SREBP-1c和DE组TNF-α、RBP4、SREBP-1c血浆水平实验后较实验前显著下降(P<0.05);实验后E组SREBP-1c水平和DE组血浆RBP4、SREBP-1c水平较C组显著降低(P<0.05)。结论:116周有氧运动、饮食控制以及有氧运动联合饮食控制,NAFLD患者血浆SREBP-1c、RBP4、TNF-α水平分别呈不同程度降低,IR缓解,脂质代谢紊乱改善,有利于NAFLD转归。2有氧运动联合饮食控制对NAFLD的干预效果更佳。

高脂喂养大鼠肾小管上皮细胞SREBP-1、TGF-β1、α-SMA的表达和细胞外基质沉积

目的:探讨高脂喂养对大鼠肾脏小管上皮细胞SREBP-1、TGF-β1、α-SMA表达和细胞外基质(ECM)的影响。方法:高脂饲料喂养大鼠12周后,油红O检测肾脏脂质沉积,Masson染色检测肾小管间质细胞外基质沉积,免疫组化、Western blot和原位杂交检测SREBP-1、TGF-β1、α-SMA和FN的表达。结果:高脂喂养后大鼠体重明显增加,血糖、甘油三酯和胰岛素均升高,油红O检测显示大鼠肾小管上皮细胞内出现明显脂滴。SREBP-1蛋白和mRNA在肾小管上皮细胞内表达,高脂组高于正常对照组,分别是正常组的1.88倍和1.85倍;TGF-β1和α-SMA也定位于肾小管上皮细胞胞浆并出现上调。Masson染色显示高脂喂养大鼠肾间质ECM沉积增多,纤维粘连蛋白FN检测也显示模型组表达强于对照组。结论:高脂饮食喂养可能通过上调肾脏小管上皮细胞SREBP-1表达使细胞内脂滴沉积,并进一步诱导TGF-β1、α-SMA合成而导致细胞外基质堆积。

罗格列酮对高脂喂养大鼠肾小管上皮细胞SREBP-1、TGF-β_1表达和细胞外基质沉积的影响

目的:探讨高脂饮食对大鼠肾小管上皮细胞固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达和细胞外基质(ECM)沉积的影响以及罗格列酮的干预治疗。方法:给予Wistar大鼠高脂饲料喂养并进行罗格列酮灌胃治疗3个月,进行血液生化检测。油红O检测肾脏脂质沉积情况,Masson染色检测肾脏细胞外基质沉积,SREBP-1、TGF-β1和FN蛋白表达检测采用免疫组织化学和Western blotting,原位杂交用于检测SREBP-1mRNA的表达。结果:罗格列酮有效避免了高脂饮食导致的大鼠血糖、血胰岛素和血甘油三酯的升高;高脂喂养组大鼠肾脏小管上皮细胞内出现了明显脂滴,小管外间质细胞外基质沉积增多,罗格列酮干预减少了脂滴和基质沉积;SREBP-1蛋白和RNA在高脂喂养组均呈高表达,明显强于正常对照组,经罗格列酮处理表达有显著下降,蛋白前体和成熟片段分别下降了27.39%和27.32%;致纤维化因子TGF-β1和细胞外基质成分之一的纤维黏连蛋白(FN)在高脂喂养大鼠肾脏的高表达均被罗格列酮干预治疗所避免,TGF-β1表达在罗格列酮干预组较高脂组降低了19.14%。结论:罗格列酮可有效避免高脂饮食造成的大鼠肾小管上皮细胞SREBP-1、TGF-β1高表达、脂质沉积和细胞外基质堆积。