胰岛素对骨骼肌细胞固醇调节原件结合蛋白1c的调节作用

目的研究胰岛素对骨骼肌细胞固醇调节原件结合蛋白1c(SREBP-1c)的调节作用。方法将诱导分化完成的大鼠骨骼肌L6肌管细胞分为对照组、胰岛素组、磷酸酰基醇3激酶抑制剂wortmannin+胰岛素组、单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)抑制剂compound C+胰岛素组、高脂对照组、高脂+胰岛素组、高脂+wortmannin+胰岛素组和高脂+compound C+胰岛素组。Western blot检测SREBP-1c、苏氨酸蛋白激酶(Akt)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、AMPK-mTOR通路相关蛋白的表达。结果与对照组相比,胰岛素组SREBP-1c、p-Akt、p-AMPK、p-mTOR蛋白表达升高(P<0.05);与胰岛素组相比,wortmannin+胰岛素组SREBP-1c表达降低(P<0.05);与高脂对照组相比,高脂+胰岛素组SREBP-1c、p-mTOR蛋白表达降低,p-Akt、p-AMPK蛋白表达升高(P<0.05);与高脂+胰岛素组相比,高脂+compound C+胰岛素组SREBP-1c表达升高(P<0.05)。结论骨骼肌细胞生理状态下,胰岛素对SREBP-1c的上调作用可能主要通过Akt-mTOR通路;胰岛素抵抗状态下,胰岛素治疗对SREBP-1c的下调作用可能主要通过AMPK-mTOR通路。

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝X受体α和固醇调节元件结合蛋白-1c的表达及意义

目的观察肝X受体α(LXRα)和固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)在大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的表达变化,以探讨二者在NAFLD形成过程中的作用及可能机制。方法建立高脂饮食诱导NAFLD大鼠模型后,采用逆转录聚合酶链反应(RT-RCR)和Western blot法动态观察NAFLD大鼠肝组织中LXRα和SREBP-1c表达变化。结果与对照组相比,NAFLD组大鼠肝组织中LXRα和SREBP-1c基因和蛋白表达,从第2周开始增加,12周时升高最显著(P<0.01),与脂肪肝进展程度一致。结论LXRα和SREBP-1c的表达变化与NAFLD的形成密切相关。

固醇调节元件结合蛋白-1c在肝脂肪合成中转录调节

固醇调节元件结合蛋白 -1c(SREBP -1c)是脂肪合成基因的重要转录调节因子 ,又称脂肪细胞决定和分化因子 1(AdipocyteDetermi nationandDifferentiationfactor -1,ADD1) ,它是动物肝脏中主要的转录物 ,主要调节动物脂肪合成和葡萄糖代谢相关基因的表达。研究发现 ,SREBP -1c的过度表达与肝脏等非脂肪组织的脂质积聚相关。SREBP -1c调节体内的脂肪合成主要是通过改变自身的mRNA水平来实现的 ,即生脂酶的转录调节是由SREBP- 1cmRNA的数量控制的。另一方面 ,LXRs、胰岛素、胰高血糖素等因素对SREBP- 1c的转录有调节作用。

炎症上调固醇调节元件结合蛋白1致C57BL/6J小鼠肝脏脂质积聚

目的:研究炎症是否通过影响核转录因子固醇调节元件结合蛋白1(sterol regulatory binding protein1,SREBP1)而致C57BL/6J小鼠肝脏脂质的异常聚集。方法:将8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组(n=6)和炎症组(n=6)组,2组均喂以高脂饮食,炎症组小鼠皮下注射酪蛋白建立慢性炎症模型,对照组注射相应量磷酸盐缓冲液,18周后处死,测定血清中炎症介质水平及肝脏中的脂质水平,油红O染色观察肝脏脂质沉积情况,实时定量PCR和Western blot检测肝脏肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein1,MCP1)及脂肪酸合成相关基因SREBP1、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase alpha,ACCα)、脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FAS)的基因和蛋白水平。结果:与对照组相比,炎症组血清中的炎症因子细胞白介素-6(interleukin-6,IL-6)(t=3.866,P=0.003)和血清淀粉样蛋白A(serum amyloidA,SAA)(t=15.207,P=0.000)水平以及肝脏中炎症因子MCP1(t=2.56,P=0.028)和TNF-α(t=11.169,P=0.000)的mRNA水平均显著上升,Western blot结果亦显示炎症组小鼠肝脏中TNF-α和MCP1蛋白水平高于对照组。炎症状态下,肝脏甘油三酯(triglyc-eride,TG)和游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)含量显著高于对照组[(0.21±0.07)mg/mg vs.(0.40±0.14)mg/mg,t=2.98,P=0.014;(3.80±0.58)nmol/mg vs.(5.38±1.38)nmol/mg,t=2.596,P=0.027]。油红O结果显示,炎症使脂质积聚更显著。SREBP1(t=6.161,P=0.000)及其下游与FFA和TG合成相关的基因ACCα(t=14.937,P=0.000),FAS(t=6.976,P=0.000)的mRNA水平在炎症组均显著上升,Western blot结果亦显示炎症组小鼠肝脏中ACCα、FAS的蛋白水平高于对照组。结论:炎症可能通过上调SREBP1,加重脂质在肝脏的聚集。

降脂颗粒对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝X受体α和固醇调节元件结合蛋白1c表达的影响

目的:研究降脂颗粒(Jiangzhi Granule,JZG)对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liverdisease,NAFLD)大鼠肝X受体α(liver X receptorα,LXRα)和固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element-binding protein-1c,SREBP-1c)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠40只随机分成正常组、模型组、吡格列酮(pioglitazone,PIO)组和JZG组,每组各10只。正常组给予普通饲料,模型组、PIO组及JZG组给予高脂饲料(88%普通饲料+10%猪油+2%胆固醇)。造模4周后药物干预4周,留取肝脏组织,苏木精和伊红染色进行病理学观察,并检测肝组织三酰甘油(triacylglycerol,TAG)和游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)水平;腹主动脉采血,检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性;实时聚合酶链式反应法检测肝组织LXR-α和SREBP-1c mRNA表达;蛋白质印迹法检测肝组织LXRα和SREBP-1c的表达。结果:模型大鼠肝组织出现明显的大泡性脂肪变性,JZG可显著降低模型大鼠血清ALT和AST水平,JZG与PIO均可降低模型大鼠肝组织FFA、TAG含量及LXRα、SREBP-1c的表达水平。结论:JZG可调节模型大鼠脂肪酸代谢紊乱,其作用可能与下调肝组织LXRα和SREBP-1c的表达有关。

固醇调节元件结合蛋白-1c在大鼠非酒精性脂肪性肝炎中的表达及意义

目的观察高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)过程中肝组织固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)的表达变化,探讨SREBP-1c与NASH的关系。方法建立大鼠高脂饮食诱导NASH模型,用免疫组织化学染色与Western blot方法检测NASH形成过程中肝组织SREBP-1c表达变化,并测定受其调控的脂肪酸合成酶(FAS)活性及相关血清学指标变化。结果与对照组相比,NASH组大鼠血清FFA水平、肝组织SREBP-1c蛋白表达、FAS酶活性在第4周开始增加(P<0.05),12周时升高最为显著(P<0.01);而血清ALT和AST含量在8周时升高,12周时升高更加显著(P<0.01)。结论高脂饮食可诱导SREBP-1c表达增强,过度表达的SREBP-1c可引起受其调控的FAS活性升高,导致脂肪酸代谢失衡,与NASH的发生关系密切。

依泽替米贝通过SIRT1抑制血管平滑肌细胞源性荷脂细胞固醇调节元件结合蛋白1c的过度乙酰化

目的探讨依泽替米贝对血管平滑肌细胞源性荷脂细胞固醇调节元件结合蛋白1c乙酰化水平的影响及其分子机制。方法采用20 mg/L胆固醇∶β-环糊精混合物处理原代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞制备荷脂细胞模型,经30μmol/L依泽替米贝处理荷脂细胞24 h后,通过Western blot检测固醇调节元件结合蛋白1c的乙酰化修饰水平及脂肪酸合成酶表达的改变,免疫共沉淀技术检测固醇调节元件结合蛋白1c与SIRT1的相互作用,转染shRNA抑制SIRT1的表达研究SIRT1在依泽替米贝调节固醇调节元件结合蛋白1c乙酰化水平中的作用。结果血管平滑肌细胞经20 mg/L胆固醇∶β-环糊精混合物处理48 h后,固醇调节元件结合蛋白1c的乙酰化修饰水平升高,脂肪酸合成酶的表达增加,固醇调节元件结合蛋白1c与SIRT1蛋白的相互作用降低,但依泽替米贝处理后能够改善胆固醇∶β-环糊精混合物所引起的血管平滑肌细胞的这一系列改变。然而,若利用SIRT1 shRNA抑制细胞SIRT1的表达则能够废除依泽替米调节固醇调节元件结合蛋白1c过度乙酰化的作用。结论依泽替米贝通过SIRT1抑制血管平滑肌源性荷脂细胞固醇调节元件结合蛋白1c的过度乙酰化。

柴芪汤对非酒精性脂肪肝大鼠固醇调节元件结合蛋白-1c表达的影响

目的:观察柴芪汤对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝脏固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)m RNA及蛋白表达的影响,探讨其防治NAFLD的可能机制。方法:将32只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、柴芪汤组和罗格列酮组,每组8只,采用高脂高糖高盐饮食喂养8周复制NAFLD模型,造模第一天开始用药,给予柴芪汤[5.67g/(kg·d)]及罗格列酮混悬液[3 mg/(kg·d)]灌胃干预,8周后检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)及肝组织中TG含量;观察肝组织病理形态改变;Western Blot测定肝SREBP-1c蛋白表达;RT-PCR测定肝SREBP-1c m RNA表达。结果:模型组大鼠血清ALT、AST、TC、TG、HDL-C、LDL-C水平及肝组织中TG含量明显高于正常组(P<0.05),2用药组各项指标低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);但2组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2用药组SREBP-1c m RNA及蛋白表达水平较模型组降低,差异具有统计学意义(P<0.05),但2用药组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:柴芪汤能够改善NAFLD大鼠肝脏脂肪变,其干预效果与西药罗格列酮相似,抑制SREBP-1c m RNA和蛋白表达,从而降低NAFLD大鼠血清ALT、AST、TG、TC、HLD-C、LDL-C,这可能是柴芪汤治疗NAFLD的机制之一。

T0901317对apoE基因敲除小鼠肝脂质蓄积及肝固醇调节元件结合蛋白-1c表达的影响

目的本文研究肝X受体(LXR)激动剂T0901317对apoE基因敲除小鼠肝脏脂质蓄积及肝脏固醇调节元件结合蛋白1-c(SREBP-1c)表达的影响。方法52只雄性apoE基因敲除小鼠被随机分成4组:基础组(n=10)对照组(n=14)、LXR激动剂治疗组(n=14)、d.LXR激动剂预防组(n=14)。各组小鼠均被给予高脂/高胆固醇饲料喂养;基础组小鼠被赋形剂灌胃处理8周;对照组小鼠被赋形剂灌胃处理14周;LXR激动剂治疗组小鼠在前8周被赋形剂灌胃处理,后6周被T0901317灌胃处理;LXR激动剂预防组小鼠被T0901317灌胃处理14周。使用HE和油红O染色方法观察小鼠肝脏脂质蓄积情况;采用实时定量PCR和蛋白质印迹方法分别检测肝脏SREBP-1cmRNA和蛋白质的表达。结果实验结果显示LXR激动剂治疗组和预防组小鼠肝脏脂质滴较对照组明显增多,组织结构排列逐渐紊乱(P<0.05);LXR激动剂治疗组和预防组小鼠肝脏SREBP-1cmRNA和蛋白质表达上调(P<0.05)。结论LXR激动剂T0901317能增加高脂高胆固醇饲料喂养的apoE基因敲除小鼠肝脏脂质蓄积并上调SREBP-1c表达。

青蒿琥酯对非酒精性脂肪炎大鼠肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ和固醇调节元件结合蛋白-1c表达的影响

目的探讨青蒿琥酯对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)表达的影响。方法采用高脂饲料喂养的方法复制大鼠NASH模型,实验分正常组、模型组、易善复组、青蒿琥酯低剂量组、中剂量组和高剂量组。正常组每天予以标准饲料喂养,正常组和模型组给予同等剂量的生理盐水。给药治疗8周后,提取肝组织,运用免疫组化方法测定各组大鼠肝组织PPARγ、SREBP-1c蛋白表达情况;采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量;采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)含量;采用分光光度法测定谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)含量;光镜观察肝脂肪变、炎症及纤维化程度。结果与正常组相比,在模型组中不仅PPARγ蛋白表达(1.67±1.01)明显减少,而且SREBP-1c蛋白表达(3.27±1.03)明显增多(均P<0.01);青蒿琥酯低中剂量组与模型组相比,PPARγ蛋白表达增多,SREBP-1c蛋白表达明显减少,并且呈剂量依赖性(均P<0.05),青蒿琥酯高剂量组PPARγ为(3.21±1.02),SREBP-1c为(1.32±0.77),与模型组相比,差异均有高度统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,青蒿琥酯各剂量组能提高SOD和GSH-Px的含量,降低MDA的含量,并且呈剂量依赖性(均P<0.05);青蒿琥酯能明显改善大鼠肝组织脂肪变、炎症程度和肝纤维化程度。结论青蒿琥酯治疗大鼠NASH的机制可能与上调PPARγ和下调SREBP-1c的表达有关。

固醇调节元件结合蛋白-1与阻塞性睡眠呼吸暂停代谢异常的研究进展

阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)是高脂血症、胰岛素抵抗、动脉粥样硬化、非酒精性脂肪性肝病的危险因素,其病理基础的核心是间歇性低氧(IH)。固醇调节元件结合蛋白(SREBP)是脂质生物合成的一类调控因子,主要在肝脏和脂肪细胞中表达,参与调节脂肪酸和胆固醇生物合成。近年来,SREBP-1在IH条件下表达上调对脂质合成的影响备受关注。现针对SREBP-1在IH下对OSA相关代谢性疾病的研究进展进行综述,为预防或延缓OSA相关代谢疾病的进展以及新的靶向治疗提供思路。

固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体(mGLUT1)的表达调节

目的探讨SREBP1c对mGLUT1表达的影响。方法采用分子克隆技术,将SREBP1c和mGLUT1cDNA分别克隆到表达载体pSVsport和pGL3b上。SREBP1c与mGLUT1克隆载体同时或单独转染NIH3T3细胞,然后应用荧光素酶活性测定法、RTPCR及Northernblot等方法测定SREBP1c对mGLUT1的启动子活性调节及mRNA表达的影响。结果实验结果表明,SREBP1c可激活mGLUT1启动子的活性,并且可增加内源性mGLUT1的mRNA表达水平。结论SREBP1c可增强mGLUT1的表达,可能介导胰岛素对mGLUT1的调节过程。

固醇调节元件结合蛋白-1c与肝脂肪变性

固醇调节元件结合蛋白-1c是一种核转录因子,可参与脂质生成相关基因表达的调控,增加肝脏脂质合成,与肝脂肪变性关系密切,并参与各种原因引起的脂肪肝的发生。一些药物可以通过抑制固醇调节元件结合蛋白-1c的表达而预防或改善肝脂肪变性,为脂肪肝的治疗提供了新的方向。

固醇调节元件结合蛋白1c的研究进展

固醇调节元件结合蛋白 1c(SREBP 1c)是一种重要的核转录因子 ,它主要调控脂肪合成和葡萄糖代谢相关酶基因的表达。SREBP 1c不但受到胰岛素 葡萄糖和瘦素等多种激素和营养物的调控 ,而且介导胰岛素对多种基因表达的调控。最近研究发现 ,SREBP 1c的过度表达与肝脏和胰岛等非脂肪组织的脂质积聚相关。实验研究提示 ,干预SREBP 1c的不适当表达可能是预防和治疗

固醇调节元件结合蛋白-1c基因54G/C多态性与新疆维吾尔族冠心病的相关性

目的:探讨固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)基因18号外显子54G/C基因多态性与新疆地区维吾尔族人群冠心病的相关性。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,对260例冠心病患者和256例健康体检者SREBP-1c基因18号外显子54G/C位点进行分析,同时进行血糖及血脂水平检测。结果:SREBP-1c基因18号外显子54G/C在冠心病组和健康对照组中基因型频率分别为:CC型0.146和0.051,CG型0.346和0.387,GG型:0.508和0.563,两组CC基因型差异具有统计学意义(P<0.05),且冠心病组C等位基因频率高于对照组(P<0.01),而GC和GG基因型差异无统计学意义。不同基因型间血糖、血脂水平差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:固醇调节元件结合蛋白-1c基因CC基因型和等位基因C与新疆维吾尔族人群冠心病有关联,并可影响患者的血糖、三酰甘油代谢。

柴胡人参药对对非酒精性脂肪性肝病大鼠法尼醇X受体和固醇调节元件结合蛋白-1c表达的影响

目的:观察柴胡人参药对对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠法尼醇X受体(FXR)蛋白和固醇调节元件结合蛋白(SREBP-1c)表达及胰岛素抵抗的影响。方法:雄性Wistar大鼠喂养高脂高糖饲料,造模8周后随机分为模型对照组(M)、西药组(R)和柴胡人参药对组(Y),分别给予生理盐水、罗格列酮和药对灌胃治疗4周,同时继予高脂高糖饲料喂养。检测大鼠空腹血糖(FBG)、血脂、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)、胰岛素(FINS)水平并计算胰岛素抵抗指数(IRI);取肝脏,计算肝重指数,检测肝组织甘油三酯(TG)水平;做肝脏HE染色,光镜下观察肝脂肪变性和炎症程度。用Western blot检测肝组织的FXR及SREBP-1c蛋白表达水平,用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测FXR mRNA的表达情况。结果:Y组大鼠血清TC、TG、LDL-C、FBG、FINS、IRI水平较M组显著降低(P<0.05或P<0.01),HDL-C水平未见明显变化(P>0.05)。光镜下观察见Y组大鼠肝脏脂肪病变较M组明显减轻,而R组脂肪变性改善程度不明显。Western blot检测结果显示:与M组比较,Y组大鼠肝脏FXR蛋白表达显著升高(P<0.01),SREBP-1c蛋白表达显著降低(P<0.05);Real-time PCR检测结果显示:与M组比较,Y组大鼠肝脏FXR mRNA表达显著升高(P<0.01)。结论:柴胡人参药对能够改善NAFLD大鼠肝脏脂肪变和炎症程度,激活FXR的活性,间接抑制SREBP-1c的蛋白表达,从而降低NAFLD大鼠血清TC、TG、LDL-C和肝脏TG含量,改善胰岛素抵抗,这可能是其治疗NAFLD的机制之一。

肉桂醛调节AMPK/SREBP1c信号通路对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝损伤的影响

【目的】探讨肉桂醛通过调节腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/胆固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)信号通路对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝损伤的影响。【方法】实验随机分为正常组,模型组,肉桂醛低、中、高剂量组及肉桂醛高剂量+Compound C(AMPK抑制剂)组,每组15只小鼠。除正常组,其他各组给予高脂饲料喂养构建NASH模型。干预治疗后,观察肝组织病理形态变化,检测血清生化指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)],肝组织氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)],AMPK/SREBP1c通路蛋白[磷酸化AMPK(p-AMPK)、AMPK、SREBP1c、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、磷酸化ACC(p-ACC)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(Scd1)]表达,及CPT1α、长链酯酰辅酶A脱氢酶(Lcad)、ACC1、脂肪酸合成酶(FAS)的mRNA表达水平。【结果】与正常组比较,模型组肝脏脂肪变性,脂质沉积和纤维化间质增多,ALT、AST、TG、TC,MDA含量,SREBP1c、Scd1蛋白表达,ACC1、FAS mRNA表达水平显著升高,SOD、GSH活性,p-AMPK、AMPK、p-ACC、ACC、CPT1蛋白表达,CPT1α、Lcad m RNA表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,肉桂醛低、中、高剂量组脂质沉积和纤维化间质减少,ALT、AST、TG、TC、MDA含量,SREBP1c、Scd1蛋白表达,ACC1、FAS mRNA表达水平显著降低,SOD、GSH活性,p-AMPK、AMPK、p-ACC、ACC、CPT1蛋白表达,CPT1α、Lcad mRNA表达水平显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;与肉桂醛高剂量组比较,肉桂醛高剂量+Compound C组上述指标均被逆转(P<0.05)。【结论】肉桂醛可能通过调控AMPK/SREBP1c通路,抑制氧化应激,改善肝脏脂肪变性,减轻NASH小鼠肝损伤。

固醇调节元件结合蛋白-1c基因多态性与冠状动脉粥样硬化的关系

目的:探讨固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)基因18号外显子54G/C多态性与湖北汉族人冠状动脉粥样硬化(ACD)的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法和基因测序技术,对166例ACD患者(ACD组)和122例健康人(对照组)SREBP-1c基因18号外显子54G/C位点进行分析,并测定血脂水平。结果:SREBP-1c基因18号外显子54G/C在ACD组和对照组中基因型频率分别为CC型6.63%和4.92%,GC型39.76%和28.69%,GG型53.61%和66.39%,差异无显著性意义(P>0.05);ACD组C等位基因频率高于对照组(26.51%vs19.26%,P<0.05)。不同基因型间血脂水平差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:等位基因C可能增加ACD发生的风险。