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题名国产免疫磁珠分离细胞的方法学研究及初步应用
被引量:5
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作者
庄俊玲
王良利
游泳
龚非力
邹萍
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机构
同济医科大学附属协和医院血液病研究所
同济医科大学免疫学教研室
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出处
《临床血液学杂志》
CAS
2000年第2期73-75,共3页
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基金
卫生部科研基金资助项目!(96-1-141)
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文摘
目的 :探讨以国产免疫磁珠进行细胞分离的方法 ,并评价直接包被法的特异性和敏感性及其在脐血和骨髓 CD+ 34 细胞分离中的应用。方法 :直接包被法、SPA法、生物素 -亲和素法。结果 :直接包被法、SPA法和生物素-亲合素法均可有效分离细胞 ,但以直接包被法最具优势 ,并证明其有较高特异性和敏感性。应用直接包被法分离脐血及骨髓中的 CD+ 34 细胞率为 5 1%~ 82 % ,台盼蓝拒染率为 82 %~ 88%。结论 :国产免疫磁珠有较好的分离效果 。
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关键词
国产免疫磁珠
细胞分离
CD^+34细胞
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Keywords
Domestic immunomagnetic beads Cell separation CD_(34)~ + positive cell
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分类号
R446.6
[医药卫生—诊断学]
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题名国产沙门氏菌免疫磁珠的制备及其应用
被引量:9
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作者
赵瑞雪
杜美红
李静雯
程小艳
万宇平
吴小胜
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机构
北京市理化分析测试中心
北京勤邦生物技术有限公司
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出处
《食品安全质量检测学报》
CAS
2018年第4期843-850,共8页
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基金
国家重点研发计划资助(2016YFF0203802)
国家重大科学仪器设备开发专项(2013YQ140371)
+1 种基金
北京市科技计划项目(Z161100000916001)
北京市自然科学基金项目(2162018)~~
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文摘
目的优化免疫磁珠制备条件,获得捕获性能高、成本低的国产沙门氏菌免疫磁珠,为国产沙门氏菌免疫磁珠的产业化制备奠定基础。方法采用亚微米级羧基磁珠及沙门氏菌多克隆抗体,利用碳二亚胺缩合法制备2 mg级免疫磁珠。以目标菌捕获率、磁珠表面抗体偶联率为评价指标,对4种粒径(100、300、500、1000 nm)的磁珠原材料进行筛选;以目标菌捕获率、磁珠表面抗体偶联率、免疫磁珠表面FITC荧光强度为评价指标,对磁珠与抗体不同的投料比(100:1、100:1.5、100:2、100:2.5、100:3)进行优化;同时,对国产沙门氏菌免疫磁珠与进口免疫磁珠(Dynalbeads~?沙门氏菌免疫磁珠、Bac Trace~?沙门氏菌免疫磁珠)的性能进行比较分析,考察了捕获率、免疫磁珠与目标菌的结合情况、特异性捕获能力等,并在实际样品中进行了应用检测。结果以粒径为300 nm的磁珠为原材料制备的免疫磁珠对浓度为10~2 CFU/mL的目标菌的捕获率为99%、抗体偶联率为34.64%,明显高于其他粒径的免疫磁珠;当投料比为100:2(磁珠:抗体)时,制备的免疫磁珠对浓度为10~2 CFU/m L的目标菌的捕获率为100%,偶联率为52.34%,优于其他投料比;针对不同浓度的鼠伤寒沙门氏菌(10~0~10~6 CFU/mL),国产免疫磁珠的捕获率高于进口免疫磁珠(国产:83%~100%;Dynalbeads~?:57%~74%;Bac Trace~?:9%~40%);在25 mL牛奶中添加(11.9±3.7)CFU鼠伤寒沙门氏标准菌株,国产沙门氏菌免疫磁珠的检出率高于进口免疫磁珠(国产:100%;Dynalbeads~?:70%;Bac Trace~?:40%)。结论优化了制备条件后所制备的国产沙门氏菌免疫磁珠的捕获能力强、价格低、能够实现大体积实际样品中痕量目标菌的100%检出,具有广阔的应用前景,本研究为沙门氏菌免疫磁珠的国产化应用提供了科学数据。
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关键词
国产沙门氏菌免疫磁珠
沙门氏菌
偶联率
捕获率
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Keywords
domestic anti-Salmonella immunomagnetic beads
Salmonella
rate of conjugation
capture efficiency
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分类号
TS207.4
[轻工技术与工程—食品科学]
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