圆形精子注射技术应用研究进展

圆形精子是成熟精子的前体细胞,具有单倍体的遗传特性,通过卵胞质内圆形精子注射(round spermatid injection,ROSI)技术可以使卵母细胞受精并发育成胎儿。1996年,第一例通过ROSI技术出生的婴儿诞生,但临床应用一直在成功与失败中反复交替。至今,ROSI技术尚未广泛应用于临床,主要原因在于ROSI技术出生效率低,且出生婴儿的安全性未得到充分验证。ROSI技术在解决部分非梗阻性无精子症患者生育生物学后代的问题上展现出广阔的应用前景。本文对ROSI技术的应用研究进展进行综述,以期更全面系统地认识ROSI技术,推动其在临床更高效、更安全地应用。

PLCζ对小鼠圆形精子细胞注射后卵母细胞受精及胚胎发育的影响

目的探讨PLCζ作为激活剂的可行性及对ROSI后卵母细胞受精及胚胎发育的影响。方法在体外构建重组质粒pCRII-TOPO-PLCζ,诱导表达后采用质谱鉴定和Western blot检测抗原性。重组PLCζ蛋白作为小鼠ROSI卵母细胞的激活剂,记录受精及胚胎发育情况并统计分析。结果成功构建了重组质粒pCRII-TOPO-PLCζ,体外表达后经质谱鉴定为小鼠PLCζ蛋白,并具有良好的抗原性。重组PLCζ蛋白激活卵母细胞后的受精率、2-4细胞率、8细胞率及成囊率与空白组之间的差异均无显著性(P>0.05)。结论本研究中重组PLCζ蛋白对卵母细胞受精及胚胎发育无显著影响,作为小鼠ROSI后的卵母细胞激活剂的可行性值得商榷。

人睾丸单倍体圆形精子细胞鉴别技术研究进展

圆形精子细胞注射(ROSI)技术是通过显微注射技术将单倍体圆形精子细胞注射入成熟卵母细胞中,使卵母细胞受精进而分裂形成胚胎的技术,是目前部分非梗阻性无精子症患者获得自己遗传学后代的最后希望。圆形精子细胞为单倍体雄性生殖细胞,是精原细胞经过减数分裂后变形成为精子前的最后一个阶段,主要通过睾丸穿刺取精术(TESA)或显微外科睾丸取精术(Micro-TESE)获得。虽然已经有ROSI试管婴儿出生,但总体来说ROSI技术效率(妊娠率、活产率)较低,因此到目前为止国内外还没有广泛推行该技术,其中不能准确鉴别活体单倍体圆形精子细胞是导致ROSI技术效率低下的主要原因之一。该文对目前几种鉴别人睾丸单倍体圆形精子细胞的方法进行综述。