水体pH对福寿螺和中国圆田螺存活及器官结构的影响

近年来,福寿螺(Pomacea canaliculata)同本地螺类竞争力的研究主要集中在温度、干旱和饥饿等因素。为探究酸碱胁迫下福寿螺与华南地区常见淡水螺中国圆田螺(Cipangopaludina chinesis)的响应特征,本研究以五种不同的水体pH作为梯度,对福寿螺和中国圆田螺进行处理,以研究其存活情况,并利用扫描电镜观察两种螺类肝脏和头部的表面结构变化。结果显示:两种螺在酸碱胁迫下都会出现一定程度的死亡,福寿螺在水体pH值4.5、6.5、8.5、10.5的存活率均高于中国圆田螺,对酸碱适应范围更广,但pH 2.5处理下中国圆田螺存活率更高。同时,扫描电镜结果显示,酸碱胁迫下两种螺头足部和肝脏存在明显的外表破损,但中国圆田螺肝脏和头足部损伤更为严重。结果表明,福寿螺比本地中国圆田螺具有更强的酸碱耐受性和适应性。

中华圆田螺形态性状对体质量的影响

为探究中华圆田螺(Cipangopaludina cathayensis)形态性状与体质量的关系,采集中华圆田螺共505只,并对其壳宽(Z_(1))、壳高(Z_(2))、壳口高(Z_(3))、壳口宽(Z_(4))、体螺层高(Z_(5))、螺旋部高(Z_(6))、倒数第二螺层宽(Z_(7))、倒数第二螺层高(Z_(8))和体质量(W)等9个体尺性状进行测量,通过统计分析、相关性分析、通径分析和回归分析,确定中华圆田螺对体质量影响较大的主要形态性状,并建立回归方程。结果显示,中华圆田螺体质量的变异系数为59.61%,其选育潜力较大;壳宽、壳高、体螺层高和倒数第二螺层宽与体质量的相关系数均较高(≥0.949)。通径分析和岭回归分析均表明,壳高对体质量直接作用最大(0.963,0.152),直接决定系数最高(0.927),其他性状与壳高对体质量的共同决定系数均较高,总决定系数达1.117。建立中华圆田螺体质量与各主要影响性状的最优多元回归方程:W=-24.346+0.214Z_(1)+0.148Z_(2)+0.123Z_(3)+0.306Z_(4)+0.188Z_(5)+0.083Z_(6)+0.383Z_(7)+0.882Z_(8),决定系数(R2)=0.943。回归方程的方差分析显示,其回归关系达到极显著水平(P<0.01)。综上,壳高是影响中华圆田螺体质量的最主要性状。

3个中华圆田螺养殖群体的肌肉营养成分分析

试验旨在研究和分析3个养殖群体中华圆田螺(Cipangopaludina cathayensis)肌肉常规营养成分、氨基酸、脂肪酸和矿物元素组成和含量,为中华圆田螺的种质资源开发利用提供参考。3个养殖群体选取180只平均体重为(32.12±0.17) g的中华圆田螺,随机分为3组,每组60只,去壳后取肌肉检测其营养成分。结果表明:陆川县群体的中华圆田螺肌肉粗蛋白、氨基酸总量、必需氨基酸总量和鲜味氨基酸总量均显著高于其他群体(P<0.05)。柳江区群体的氨基酸评分、化学评分和必需氨基酸指数最高。陆川县群体肌肉中不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸含量均显著高于其他群体,且动脉粥样硬化指数(IA)、血栓形成指数(IT)均低于其他群体(P<0.05),3个群体的Σn-3/Σn-6 PUFA比值均符合FAO/WHO推荐人类饮食推荐值(0.1~0.2)。融水县群体肌肉中的P、Ca含量显著高于其他群体(P<0.05)。研究表明,3个养殖群体中华圆田螺肌肉中蛋白质含量均较高,脂肪含量较低,鲜味氨基酸和不饱和脂肪酸含量较高,陆川县群体肌肉的营养价值优于其他群体。

发酵饵料对中华圆田螺生长性能和肠道菌群的影响

试验旨在探讨发酵饵料对中华圆田螺生长性能和肠道菌群的影响。选择平均体重25 g的中华圆田螺60只,随机分成2组,每组3个重复,每个重复10只螺。A组、B组田螺分别饲喂基础饵料和发酵基础饵料。试验期20 d。试验结束,取田螺肠道内容物,利用16S rDNA高通量测序技术检测肠道菌群多样性。结果显示,A组、B组田螺的成活率均为100%。与A组相比,B组田螺的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、蛋白质效率(PER)均有所提高,饵料系数降低(P>0.05)。高通量测序得到有效序列共375 141条,序列长度为416~455 bp。将有效序列进行聚类并划分,对OTU进行统计,发现每组样品的OTU覆盖率均在99.9%以上。A组、B组田螺肠道丰富度最高的前6个细菌门类依次为变形菌门、拟杆菌门、浮霉菌门、酸杆菌门、放线菌门和绿弯菌门。A组、B组田螺肠道排名前5的菌属为变形菌属、拟杆菌属、厚壁菌属、软壁菌属和衣原体,与A组相比,B组田螺丰度前5菌属的相对丰度均有提高,其中厚壁菌属和衣原体显著提高(P<0.05)。B组OTU数量、Chao1指数、Simpson指数均高于A组(P>0.05)。研究表明,发酵饵料可以提高中华圆田螺肠道微生物群落的多样性和丰度。

低氧胁迫下中华圆田螺的肝脏转录组学分析

为了探究低氧胁迫下中华圆田螺(Cipangopaludina cathayensis)肝脏组织基因的差异表达,本研究通过高通量测序技术,分析中华园田螺低氧胁迫组(2.5 mg/L)和常氧组(6.9 mg/L)某些基因的差异表达,并对差异基因进行生物信息学分析,进一步采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对关键差异表达基因进行验证。结果显示,测序共获得232379条基因(unigenes),与对照组比较,低氧胁迫组筛到176个差异基因,包含64个上调基因和112个下调基因。GO功能注释分析显示,差异基因主要富集在生物学过程中的几丁质代谢过程和含氨基葡萄糖的复合代谢过程,细胞组分中的胶原三聚体成分,分子功能中的几丁质结合功能和糖衍生物结合功能。KEGG通路富集分析显示,差异基因主要集中于环境信息处理、遗传信息处理、代谢和生物系统这4大类通路。6个关键差异基因的RT-qPCR结果显示,热休克蛋白70B2和热休克蛋白β-6基因表达量上调,几丁质酶蛋白4、α-1胶原蛋白(XIV)、α-4胶原蛋白(XIV)、5-磷酸酶蛋白基因表达量下调,证实了转录组测序结果的可靠性。本研究发现,低氧胁迫激活了中华圆田螺适应缺氧的生理活动,并获得了低氧胁迫下中华圆田螺肝脏组织中相关功能基因的表达信息,为深入研究中华圆田螺响应低氧胁迫的调控机制提供了基础数据和理论依据。

镉、锌、铅离子对中华圆田螺的急性毒性试验

在水温(27±1)℃、pH值(6.9±0.1)条件下,用硫酸锌(ZnSO4·7H2O)、氯化镉(CdCl2)和硝酸铅[Pb(NO3)2]配制不同镉离子(Cd^(2+))(0~87 mg/L)、锌离子(Zn^(2+))(0~120 mg/L)和铅离子(Pb^(2+))(0~560 mg/L)浓度,采用静态生物急性毒性试验方法,分析Cd^(2+)、Zn^(2+)和Pb^(2+)对平均体质量为(41.94±0.23)g的中华圆田螺(Cipangopaludina cathayensis)的急性毒性。结果表明,中华圆田螺的死亡率随重金属离子浓度的升高而增大,呈明显的剂量效应关系。Cd^(2+)、Zn^(2+)、Pb^(2+)对中华圆田螺96 h的半数致死浓度(LC_(50))分别为19.31,34.04和291.86 mg/L,安全浓度(SC)分别为0.1931,0.3404和2.9186 mg/L。根据急性毒性的分级标准,3种重金属离子对中华圆田螺的毒性均为低毒,耐受性较强,毒性按从大到小排序依次为Cd^(2+)、Zn^(2+)和Pb^(2+)。

不同养殖环境下中华圆田螺肠道菌群多样性试验

为了解2种不同养殖环境下中华圆田螺肠道微生物多样性,设置稻田养殖组(A)池塘养殖组(B),别取A组和B组田螺的肠道内容物进行总菌群DNA提取纯化,采用高通量测序技术进行16S V3-V4区域扩增子测序以及生物信息学分析。结果表明,2组样本共得到131240条序列,共涉及25门215属,其中共有菌属169种,特有菌属各23种。基于97%的样本相似度,样本优化聚类为609个OTU(Operational taxonomical unit)。A组以拟杆菌门(51.32%)、变形菌门(32.15%)为主;B组以拟杆菌门(43.12%)、变形菌门(25.12%)、厚壁菌门(18.57%)为主。在属水平上,A组以拟杆菌类(Bacteroides)、气单胞菌(Aeromonas)、乳酸菌属(Cetobacterium)等属细菌为主,B组以拟杆菌类(Bacteroides)、气单胞菌(Aeromonas)、变形菌属(Proteocatella)等属细菌为主。指出,A组肠道菌群比B组肠道菌群具有更高的个体差异性、更丰富的物种多样性、更高的菌群丰度。

温度和盐度对中华圆田螺和铜锈环棱螺标准代谢的影响

利用室内模拟实验研究了环境因子（温度和盐度）对中华圆田螺（Cipangopaludina cathayensis）和铜锈环棱螺（Bellamya aeruginosa）标准代谢的影响。结果表明,在10~35℃范围内,两种螺的耗氧率、CO2排放率和排氨率均随温度的升高而升高,至30℃达到最大值。从Q10值来看,铜锈环棱螺的代谢水平对水温的响应较中华圆田螺更为敏感。呼吸熵和氧氮比结果表明,25℃时两种螺体内的蛋白质消耗最少,由此初步判断二者的最适温度在25℃左右。盐度升高至1.8时两种螺的耗氧率等代谢指标显著提高,同时二者对温度变化的敏感性降低。但从动物呼吸熵和氧氮比的测定结果来看,该盐度下机体仍维持在相对正常的代谢水平。温度和盐度对中华圆田螺代谢活动的影响有显著的交互作用,但对铜锈环棱螺的影响不显著。此外,两种螺的代谢率都存在明显的昼夜变化规律,夜晚的代谢率要显著高于白天。

三种常用农药对环棱螺、圆田螺和河蚬的急性毒性研究

采用急性毒性试验方法,研究了3种常用农药毒死蜱、丁草胺和三唑酮对3种本地底栖生物环棱螺Bellamya quadrata、圆田螺Cipangopaludina cathayensis和河蚬Corbicula fluminea的毒性效应,同时测定了螺类不同大小个体对供试农药的敏感性。结果显示:毒死蜱、丁草胺和三唑酮对环棱螺的96 h-LC50值分别为4.32、3.62和15.2 mg/L,对圆田螺的96 h-LC50值分别为6.31、4.31和16.9 mg/L,对河蚬的96 h-LC50值分别为8.75、6.83和26.5 mg/L;毒死蜱和丁草胺对3种供试生物均为中等毒性,三唑酮属低毒。环棱螺幼螺对毒死蜱、丁草胺和三唑酮的敏感性分别比大螺高2.52、1.84和1.72倍,圆田螺幼螺对毒死蜱、丁草胺和三唑酮的敏感性分别比大螺高2.26、2.26和2.67倍。因此,在田间使用3种供试农药时需注意对供试底栖生物尤其是其幼体的保护。

中国圆田螺典型精子及其发生的超微结构研究

运用光镜和电镜以及细胞化学方法 ,对中国圆田螺Cipangopaludinachinensis典型精子及其发生的超微结构进行了研究。根据染色质和细胞形态的变化 ,可将其典型精子发生分为五个时期 :精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞和成熟精子。精子发生过程中 ,线粒体逐渐增大 ,并随着轴的增生而不断发展为螺旋化线粒体系 ;染色质逐渐凝聚 ,经过颗粒化和纤维化而终呈均质 ;随着染色质的变化 ,细胞核先变小再拉长并螺旋化。精细胞期细胞核基部发生内陷 ,伴随有中心粒的移入 ,并向后方形成“9+ 2”式的轴。成熟典型精子单鞭毛 ,全长约 40 μm ,包括头、中、尾三段 :头段螺旋状 ,主要由细胞核构成 ,旋束单股 ;中段螺旋状 ,主要由线粒体和轴丝构成 ,旋束四股 ;尾段非螺旋状 。

中华圆田螺血细胞的分类和吞噬活性

血细胞作为主要的免疫效应细胞在贝类的免疫和防御中有重要作用。本文通过相差显微镜和透射电子显微镜对中华圆田螺(Viviparus chinensis)血细胞的形态与类型以及血细胞对枯草芽孢杆菌的吞噬观察。结果发现壳高4～6 cm的田螺血细胞浓度为(2.17±0.38)×106个/mL。根据血细胞大小,形态和胞质内颗粒的有无可以将血细胞分为颗粒细胞、无颗粒细胞、透明细胞、淋巴样细胞四种类型。Wrighte-Giemsa染色显示,颗粒细胞表现为嗜酸性,其余3类细胞均呈现嗜碱性。另外,通过对颗粒细胞形态的连续观察,发现透明细胞可能是颗粒细胞脱颗粒而形成的衰老细胞。血细胞对枯草芽孢杆菌的吞噬实验结果表明,颗粒细胞吞噬杆菌活性最强,吞噬率和吞噬指数分别是47.73%和1.44,其次无颗粒细胞,吞噬率和吞噬指数分别是30.44%和1.12,透明细胞和淋巴样细胞无吞噬活性。

氟对中华圆田螺肝胰脏抗氧化酶活性和MDA含量的影响

选取中华圆田螺为受试动物,探究氟对其肝胰脏抗氧化酶SOD、GSH、POD活性和丙二醛(MDA)含量的影响。结果显示,在不同浓度水氟环境条件下(0、40、80、160 mg·L^(-1))连续暴露10 d、20 d和30 d时,与对照组相比,中华圆田螺肝胰脏SOD活性在暴露前20 d,中低浓度组活性被诱导升高,高浓度组受抑制降低。暴露30 d时,中低浓度组活性降低,高浓度组逐渐升高。MDA含量在暴露前20 d时,中低浓度组活性整体被诱导升高,高浓度组受抑制降低。暴露30 d时,MDA含量受到显著抑制均低于对照组。GSH活性以诱导为主均高于对照组,POD活性在10 d时均低于对照组,而在20 d时被诱导升高且均高于对照组,30 d时中高浓度以抑制为主。上述研究结果为水质污染控制及生态风险评价提供了基础数据。

镉和汞对中华圆田螺超氧化物歧化酶活性的影响

采用急性毒性试验方法,研究了不同质量浓度的镉离子(Cd2+)和汞离子(Hg2+)染毒对田螺肝胰脏超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.结果表明:低浓度的Cd2+、Hg2+溶液对田螺肝胰脏SOD活性具有抑制—诱导—抑制作用;高浓度的Cd2+、Hg2+溶液有抑制作用,抑制作用随着时间的延长和浓度的增大而增强.可以通过检测中华圆田螺SOD活性的变化,来直接评价环境中重金属污染对生物的毒性效应.

佛山市褐云玛瑙螺、福寿螺、中华圆田螺和环棱螺广州管圆线虫感染情况调查

目的了解佛山市五区(禅城区、南海区、顺德区、三水区、高明区)四种螺(褐云玛瑙螺、福寿螺、中华圆田螺、环棱螺)广州管圆线虫的感染情况。方法取螺体组织,用剪刀剪碎加入8ml的生理盐水,过滤沉淀,取上清液,离心,取渣镜检广州管圆线虫第三期线虫蚴虫为阳性。结果共检查褐云玛瑙螺589只,福寿螺742只,中华圆田螺745只,环棱螺751只。广州管圆线虫第三期蚴虫的阳性率分别为40.75,31.54,16.51,19.71。与国内各地比较四种螺感染广州管圆线虫均处于较高水平。结论佛山市五区褐云玛瑙螺、福寿螺、中华圆田螺、环棱螺存在广州管圆线虫感染,其中褐云玛瑙螺在佛山地区广州管圆线虫传播中可能起主要作用,应加强佛山市广州管圆虫病的预防和控制工作。

圆田螺保护酶分子在大运河污染评价中的应用

[目的]研究以中华圆田螺(Cipangopaludina cahayensis)保护酶作为京杭大运河不同污染程度环境监测的可行性。[方法]通过测定螺内脏团中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性,比较室内模拟法、样点笼内放养法和直接采样法测定保护酶分子标志物活性评价大运河污染方法的优劣。[结果]中华圆田螺组织抗氧化保护酶系统的SOD、POD、CAT活性是指示污染的敏感指标。CAT活性在污染环境中被抑制,且在临界范围内随着污染毒性作用的加强,抑制作用也加强。POD活性在污染环境中被激活,但各时间段的增幅变化却不尽相同。SOD的变化不稳定,它在30 d暴露后的降低表明其较适合作为短时间的检测指标。[结论]中华圆田螺保护酶作为京杭大运河不同污染程度环境监测的分子标志物是可行的,样点笼内放养测定保护酶分子标志物活性评价法最优,直接采样测定保护酶活性法不可取。

两种有机酸存在下铜对中华圆田螺肝脏的氧化应激效应

为探讨不同水平EDTA和柠檬酸(CA)作用下沉积物中铜对底栖无脊椎动物生态毒理学效应,以中华圆田螺为受试生物,研究了肝脏中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)以及过氧化氢酶(CAT)活性的变化规律。研究结果表明:有机酸存在下,铜污染底泥可诱导中华圆田螺肝脏产生ROS。电子顺磁共振(EPR)技术得出的3组双重峰分裂谱线为典型的α-苯基-N-叔丁基甲亚胺-N-氧化物(PBN)捕获羟自由基(·OH)形成PBN/·OH的EPR波谱。有机酸存在下,低剂量铜(≤100 mg·kg-1)对MDA产量影响不显著。较高剂量铜暴露下,EDTA的存在抑制MDA产生,CA的添加则均使MDA含量增加。EDTA存在下铜可显著抑制中华圆田螺肝脏中SOD和CAT活性。相对而言,CA的加入可减缓高剂量铜暴露下中华圆田螺肝脏SOD与CAT酶活性的剧烈变化。

氟在中华圆田螺体内富集及其对肝胰脏免疫相关酶的影响

以中华圆田螺为试验材料,研究水环境中不同浓度(0、40、80、160 mg/L)氟暴露条件下,氟在其体内的富集及对肝胰脏免疫相关酶,如酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响。结果显示,在不同浓度氟化钠连续暴露30、60 d后,与对照组比较,不同浓度氟暴露组中华圆田螺不同组织中的氟含量均显著高于对照组,且随着氟暴露剂量的升高,呈现先升后降趋势,表明氟在中华圆田螺不同组织中的浓度已经达到平衡;在整个染毒过程中,染毒组ACP和AKP活性与对照组相比呈先降后升的趋势。氟暴露30 d,高浓度组ACP和AKP活性极显著高于对照组,氟暴露60 d,所有染毒组ACP和AKP活性均显著低于对照组;染毒组CAT活性与对照组相比呈先升后降再升趋势,且80 mg/L组和160 mg/L组CAT活性极显著低于对照组。

中华圆田螺与铜锈环棱螺精子形态的比较研究

通过几种不同的处理方法对中华圆田螺和铜锈环棱螺的精子形态进行对比研究,同时利用光镜下的目镜与台镜测微尺进行形态学上的数量统计。结果表明:中华圆田螺与铜锈环棱螺的典型精子之间差异显著;非典型精子间体长、尾长、体宽与全长均没有显著差异,仅体宽间有显著性差异。Giemsa直接染色与经甲醇固定再染色对于观察精子总体和非典型精子尾部结构比经过秋水仙素等处理的方法效果好,但是经过秋水仙素等处理则对精子头部的显示效果较佳。

诺氟沙星对中国圆田螺氨基比林-N-脱甲基酶活性的影响

在沉积物中均匀加入诺氟沙星,模拟研究了沉积物中诺氟沙星对中国圆田螺不同组织氨基比林-N-脱甲基酶活性的影响。结果表明,诺氟沙星的处理使中国圆田螺各组织中的氨基比林-N-脱甲基酶活性发生了变化,不同和相同含量诺氟沙星对同种或不同组织中氨基比林-N-脱甲基酶的活性的影响不同。总的趋势为:低含量诺氟沙星对肝、肾、胃等组织氨基比林-N-脱甲基酶活性的作用为前期诱导后期抑制;中、高含量诺氟沙星抑制肾、胃等组织氨基比林-N-脱甲基酶活性;诺氟沙星一直抑制卵巢和肌肉组织中氨基比林-N-脱甲基酶的活性。

中华圆田螺稻田人工养殖试验

通过对稻田放养田螺的试验 ,证明稻田养殖田螺是可行的 ,两农户 0 10 6 7hm2 和 0 186 7hm2 的稻田分别产粮6 4 0kg和 15 2 5kg,产螺 4 2 7 0 4kg和 4 2 5 19kg ,收入 2 185 84元和 3135 17元 ,水稻的产量与往年基本持平 。