硝酸银硅胶色谱法制备蒙药土木香中土木香内酯和异土木香内酯

目的探讨蒙药土木香中土木香内酯及异土木香内酯的制备方法。方法采用硝酸银硅胶色谱法进行制备。结果得到两个色泽优良、克数较大的结晶化合物,根据其理化性质及波谱技术鉴定为土木香内酯和异土木香内酯。结论硝酸银硅胶色谱法对土木香内酯及异土木香内酯能实现满意分离,且产量大、纯度高、操作简单,是一种高效快速的制备方法,为土木香内酯及异土木香内酯的广泛应用提供精准可靠的参考资料。

气相色谱法测定参芪健胃颗粒中土木香内酯、异土木香内酯的含量

[目的]建立参芪健胃颗粒中土木香内酯和异土木香内酯的含量测定方法。[方法]采用聚乙二醇20000(PEG-20M)毛细管柱,载气为高纯氮气;进样口温度为260℃;检测器温度为280℃,柱温为程序升温;检测器为氢火焰离子化检测器(FID)。[结果]土木香内酯、异土木香内酯分别在0.004 032~0.040 32μg、0.004 06~0.040 6μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为100.0%和99.6%。[结论]该方法可用于参芪健胃颗粒的质量控制,是一种操作简单、快速准确的理想检测方法。

土木香内酯上调miR-3178抑制胆管癌QBC939细胞增殖、迁移和侵袭

目的探讨土木香内酯调控微小RNA(miR)-3178对胆管癌QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法不同浓度的土木香内酯作用于QBC939细胞48 h,细胞计数试剂盒(CCK-8)和平板克隆实验检测细胞增殖,划痕愈合实验、Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测QBC939细胞、胆管癌组织中miR-3178的相对水平。转染miR-3178模拟物至QBC939细胞,检测过表达对QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的影响。转染miR-3178抑制物至QBC939细胞,检测抑制miR-3178表达联合土木香内酯对QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果土木香内酯显著增加QBC939细胞抑制率、凋亡率、miR-3178的相对水平(P<0.05),降低克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数(P<0.05),呈剂量依赖性。与癌旁组织比较,胆管癌组织中miR-3178表达水平显著降低(P<0.05)。过表达miR-3178显著增加QBC939细胞抑制率和凋亡率(P<0.05),降低克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数(P<0.05)。抑制miR-3178表达部分逆转了土木香内酯对QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的影响(P<0.05)。结论土木香内酯通过上调miR-3178表达抑制胆管癌QBC939细胞增殖、迁移和侵袭。

土木香内酯调控lncRNA PCAT19/miR-143-3p分子轴对瘢痕疙瘩成纤维细胞生物学功能的影响

目的探讨土木香内酯(alantolactone,AL)对瘢痕疙瘩成纤维细胞生物学功能的影响及其对lncRNA PCAT19/miR-143-3p分子轴的调控作用。方法原代分离培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞,不同浓度的AL处理瘢痕疙瘩成纤维细胞,分别将si-NC、si-PCAT19、miR-NC、miR-143-3p mimics转染至瘢痕疙瘩成纤维细胞,分别将pcDNA、pcDNA-PCAT19转染至瘢痕疙瘩成纤维细胞后加入AL培养24 h;CCK-8实验、平板克隆形成实验、Transwell小室实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力;qRT-PCR法检测瘢痕疙瘩组织、正常皮肤组织与瘢痕疙瘩成纤维细胞中PCAT19与miR-143-3p的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测PCAT19与miR-143-3p的靶向关系;Western blot法检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量。结果AL能够以剂量依赖性的方式抑制细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭,并可抑制PCAT19、MMP-2、MMP-9的表达,而促进miR-143-3p的表达;瘢痕疙瘩组织中PCAT19的表达量高于正常皮肤组织,而miR-143-3p的表达量低于正常皮肤组织;PCAT19可靶向调控miR-143-3p;转染si-PCAT19可抑制细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;转染pcDNA-PCAT19可拮抗AL对细胞生物学行为的作用。结论土木香内酯可通过调控PCAT19/miR-143-3p分子轴而抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。

RP-HPLC测定藏木香中土木香内酯和异土木香内酯含量

目的建立了反相高效液相色谱法同时测定藏木香中土木香内酯和异土木香内酯的方法。方法采用Phenomenex Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5.0μm);流动相为乙腈-0.04%磷酸溶液(50∶50);检测波长:194nm;流速:1.0mL.min-1。结果异构体土木香内酯和异土木香内酯达到基线分离,含量测定的线性良好,线性范围和相关系数分别为0.07～4.80μg.L-1(r=0.9998),0.07～4.85μg.L-1(r=0.9998);回收率分别为97.5%和102.1%;方法精密度良好,RSD分别为1.56%和1.87%(n=5);方法重现性良好,RSD分别为1.67%和0.92%(n=5)。结论所建立的方法简便、快捷、准确,重现性好,可用于藏木香药材及其制剂的质量控制。

用HPLC法同时测定六味安消胶囊中土木香内酯、异土木香内酯、大黄素和大黄酚的含量

目的：建立HPLC法同时测定六昧安消胶囊中土木香内酯、异土木香内酯、大黄素和大黄酚含量的方法。方法：采用HPLC-二极管阵列检测器法（HPLC—DAD），色谱柱：Agilent Eclipse PlusC18柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相：乙腈-0．04％甲酸（60：40），流速：1．0mL／min，检测波长：220nm，柱温：25℃，进样量：10μL。结果：土木香内酯、异土木香内酯、大黄素和大黄酚的线性范围分别是：2．46～98．4、2．48～99．2、2．56～102．4和2．58～103．2μg／mL，色谱响应线性关系良好。日内和日间RSD均〈2％；最低检测限分别为1．75、1．31、0．50和0．49μg／mL。稳定性结果为峰面积的RSD分别为1．29％、1．40％、1．30％和0．45％，在48h内稳定。加样回收率结果分别为99．0％、100．6％、98．7％和99．7％（n＝6），RSD分别为1．03％、0．62％、1．36％和0．26％。结论：本法快速、简便，重现性好，精密度高，测定结果准确可靠，可作为该制剂的定量测定方法。

RP-HPLC测定藏药六味能消胶囊中土木香内酯和异土木香内酯的含量

目的：建立六味能消胶囊中土木香内酯和异土木香内酯的高效液相色谱法含量测定方法．方法：色谱柱为Kromasil C18色谱柱（250mm×4．6mm，5pm）；流动相为乙腈-0．1％磷酸溶液（58：42）；流速为1．0mL／min；检测波长：194nm．结果：土木香内酯、异土木香内酯均在0．30～1．50μg范围内呈良好的线性关系；r均为0．9998；平均回收率分别为98．2％（RSD=1．67％，n=5）和97．7％（RSD=1．48％，n=5）．结论：该方法简便、灵敏、准确，可作为六味能消胶囊的质量控制方法．

新疆木香中土木香内酯与异土木香内酯的分离鉴定

采用络合柱层法从新疆木香Inula helenium石油醚溶出部分分离得到两个结晶,经光谱分析鉴定为土木香内酯(Alantolactone)和异土木香内酯(Isoalantolactone)。

果旭阿汤中土木香内酯和异土木香内酯的含量测定

目的建立同时测定藏药果旭阿汤中土木香内酯和异土木香内酯含量的方法。方法通过优化提取方法,用气相色谱(GC)法同时测定藏药果旭阿汤中藏木香有效成分土木香内酯和异土木香内酯的含量。结果土木香内酯和异土木香内酯均在0.1～1.0 mg.mL-1(n=5)范围内呈良好线性关系。土木香内酯回收率为97.25%(n=6),RSD=0.93%;异土木香内酯回收率为97.42%(n=6),RSD=0.90%。结论该方法可用于藏药果旭阿汤中土木香内酯和异土木香内酯的含量同时快速、准确测定。

土木香中土木香内酯与异土木香内酯的分离鉴定

采用氧化铝-硝酸银、硅胶-硝酸银络合柱层析法对土木香的丙酮溶出部分进行分离。结果得到两个结晶,经波谱分析鉴定为土木香内酯和异土木香内酯。两种成分产率较高,操作简单。此方法对土木香内酯和异土木香内酯的大规模生产工艺具有一定的参考价值。

气相色谱内标法同时测定土木香中土木香内酯、异土木香内酯的含量

【目的】建立内标法测定土木香药材中土木香内酯、异土木香内酯的含量。【方法】SE-30毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm);FID检测器温度为260℃;进样口温度240℃程序升温:初始温度50℃,以20℃/min的速率升温至170℃,保持28min,再以25℃/min的速率升温至250℃,保持1min;以尼泊金丁酯为内标物定量。【结果】土木香内酯与异土木香内酯分离良好,在0.6～4.2mg/ml范围内,呈良好的线性关系(r=0.9999,n=5)。【结论】本法简便、灵敏、专属性强、重复性好,可用于土木香药材的含量测定,控制其质量。

HPLC测定蒙药清血八味散中异土木香内酯和土木香内酯含量

目的：建立蒙药清血八味散中异土木香内酯和土木香内酯含量的方法。方法：采用高效液相色谱法,使用色谱柱为Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.04%磷酸水溶液（60∶40）,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为194 nm,柱温为30℃。结果：异土木香内酯进样量在0.05~0.25μg、土木香内酯进样量在0.03~0.15μg范围内与峰面积具有良好的线性关系,平均回收率为异土木香内酯98.9%,RSD 1.65%;土木香内酯99%,RSD 0.62%。结论：该方法简便、快捷、准确、重复性好,可用于作为清血八味散中异土木香内酯和土木香内酯的含量测定。

HPLC测定四味土木香散中土木香内酯和异土木香内酯的含量

目的:采用HPLC测定四味土木香散中土木香内酯和异土木香内酯的含量。方法:色谱柱为YMC-Pack ODS-A(250×4.6;5min),流动相为甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液(10:6:9,氨水调pH7),流速为1mL.main-1,检测波长为220nm。结果:土木香内酯进样量2.51～75.3μg、异土木香内酯进样量2.50～75.1μg时与峰面积呈良好的线性;平均回收率分别为:99.86%(RSD=0.32%)和100.34%(RSD=1.12%)。结论:本方法简便、快捷、准确,适用于四味土木香散中土木香内酯和异土木香内酯的质量控制。

HPLC同时测定三味甘露散中土木香内酯和异土木香内酯含量

目的：建立同时测定三味甘露散中土木香内酯、异土木香内酯含量的方法。方法采用高效液相色谱法,光电二极管阵列检测器,色谱柱为 CAPCELL PAK MG C18（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.4%磷酸（58∶42）,流速1.0 mL/min,检测波长225 nm,柱温30℃。结果土木香内酯在0.083～0.517μg、异土木香内酯在0.108～0.672μg 范围内呈良好线性关系,r＝0.9999；土木香内酯平均加样回收率为97.95%,RSD＝1.31%；异土木香内酯平均加样回收率为97.69%,RSD＝1.24%。结论本方法操作简便,可快速、准确地测定三味甘露散中土木香内酯和异土木香内酯的含量。

异土木香内酯及土木香内酯的结构修饰研究

对土木香根中两个主要倍半萜内酯-异土木香内酯(1)和土木香内酯(2)进行结构修饰,研究结构修饰产物的体外抑制人肝癌细胞(HepG2)增殖的活性,并进行构效关系的研究。经结构修饰得到4,15β-环氧异土木香内酯(1b)、5α,6α-环氧土木香内酯(2b)、13α-甲氧基甲基土木香内酯(2d)等11个化合物,其中产物2d未见有文献报道。产物1b、2b对HepG2细胞的抑制作用均强于母体化合物,其他化合物的抑制活性均弱于母体化合物。推断11,13-去氢内酯基团是该类倍半萜内酯体外抑制HepG2肿瘤细胞增殖活性必需的活性基团,环氧基团的引入对化合物的抑制HepG2肿瘤细胞增殖活性具有促进作用。

气相色谱法测定土木香药材中土木香内酯和异土木香内酯的含量

土木香来源于菊科植物,中华人民共和国药典1985年版(一部)规定其来源为土木香Inula helenium L.和总状土木香I.racemosaHook f.的根。前者主产于河北省安国县,当地称之为青木香、祁木香。

土木香内酯与异土木香内酯的提取与纯化工艺(英文)

本文报道了一种从土木香药材中提取以及纯化倍半萜内酯的方法。乙醇回流提取的方法采用正交试验设计方法[L9（34）],考察了4个因素对产率与内酯浓度的影响,最终确定了乙醇回流提取的最佳方法：药材加10倍量的95%乙醇,加热回流提取1次,2 h。而硅胶柱层析的最佳纯化方法为：以100~200目的硅胶,1∶3的上样量,径高比为1∶2。其洗脱剂成分为石油醚∶丙酮（100∶3,v/v）,洗脱流速为35 m L/min。采用该方法,异土木香内酯与土木香内酯的提取率大于70%,其纯度大于90%。

土木香内酯对RPMI-8226细胞的增殖抑制作用及其相关机制研究

目的:探讨土木香内酯(alantolactone)对多发性骨髓瘤RPMI-8226细胞增殖、凋亡的影响,并分析其可能的作用机制。方法:使用浓度为1、2.5、5、7.5及10μmol/L的土木香内酯处理RPMI-8226细胞48 h,应用CCK-8检测细胞活力,并计算其半数抑制浓度(IC50)值;使用浓度为2.5,5及7.5μmol/L的土木香内酯处理RPMI-8226细胞48 h后,应用AnnexinV/PI双标记法分析细胞凋亡;Western blot方法检测呈切割的caspase-3及ERK信号通路的变化;裸鼠荷瘤并给予土木香内酯以进一步验证其对多发性骨髓瘤细胞的促凋亡作用。结果:土木香内酯可抑制RPMI-8226细胞活力,并呈现剂量依赖效应(r=-0.9784,P=0.0007);RPMI-8226细胞48 h的IC50为4.32±0.15μmol/L;流式细胞术分析凋亡结果显示,随着土木香内酯浓度的增高,细胞早期凋亡率显著增加(r=0.9601,P<0.05);Western blot结果显示,土木香内酯处理RPMI-8226细胞后,活化了caspase-3,降低ERK磷酸化水平;体内结果显示,给药组小鼠瘤体积明显小于对照组(P<0.05);免疫组织化学检测结果显示,与对照组相比,实验组瘤内细胞核增殖相关抗原Ki67及p-ERK的水平降低。结论:土木香内酯可有效地抑制多发性骨髓瘤RPMI-8226细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能是通过抑制ERK信号通路的活性,抑制裸鼠皮下多发性骨髓瘤的生长。

气相色谱法测定藏木香药材中土木香内酯的含量

本实验采用气相色谱法首次对生长在青藏高原的药材藏木香中所含的主要化学成分土木香内酯进行含量测定.所用柱子是SUPELCOWAXTM10色谱柱(30 m×0.25 mm×0.25μm).氦气作为载气,采用氢火焰离子检测器,实验最后所得的平均回收率为96.80%,RSD为1.05%(n=5).所建立的方法简便、准确、专属性强,可有效地控制藏木香的质量.

GC法测定藏药玛努巴扎中的土木香内酯

藏医常用药玛努巴扎的使用最早见于藏医著名典籍《四部医典》，藏药《晶镜本草》记载为菊科植物土木香Inula helenium L．，以玛努巴扎为名人药，可以治疗气血扰乱引发的疾病，临床应用广泛。《中华本草·藏药卷》直接将玛努巴扎以土木香为名收载，其功能主治为健脾和胃，调气解郁，止痛。