土贝母提取物对人乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型的抗肿瘤作用评价

目的:建立绿色荧光蛋白标记的人乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型,研究中药土贝母提取物对转染GFP基因的人乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型的抗肿瘤活性。方法:应用原位移植方法,建立绿色荧光蛋白标记的人乳腺癌MDA-MB-231-GFP模型。通过比较阴性对照组(口服0.9%氯化钠溶液)、阳性对照组(腹腔注射紫衫醇20mg/kg)、低剂量组(口服土贝母提取物10mg/kg)和高剂量组(口服土贝母提取物50mg/kg)的肿瘤抑制率,评价土贝母提取物对肿瘤生长的影响。结果:阴性对照组与各治疗组小鼠给药前后体质量变化比较,差异均无统计学意义,一般状况良好。低剂量组和阴性对照组间比较,肿瘤大小和体质量的改变差异无统计学意义;高剂量组和阳性对照组肿瘤较阴性对照组明显缩小(P<0.05,P<0.01)。结论:经口服投予较高剂量的土贝母提取物,对人乳癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型有明显的抑制作用。

土贝母提取物联合浙贝母总生物碱对人乳腺癌细胞协同作用的研究

目的:建立双色荧光蛋白转染的4种人乳腺癌细胞株模型,观察土贝母提取物联合浙贝母总生物碱对4种人乳腺癌细胞的协同作用特点。方法:建立双色荧光蛋白转染的4种人乳腺癌细胞株模型MDA-MB-231 DUAL,BT-549 DUAL,MCF-7 DUAL及NCI/ADR-RES DUAL。运用倒置荧光显微镜实时成像,观察不同浓度土贝母提取物及浙贝母总生物碱作用下,细胞株的形态变化及凋亡特点。结果:土贝母提取物对4种乳腺癌细胞都有促进细胞凋亡的作用。除MDA-MB-231 DUAL,其余3种乳腺癌细胞在相同土贝母提取物作用浓度下,加入浙贝母总生物碱可以提高细胞凋亡率(P<0.05)。而单独作用的浙贝母总生物碱对4种乳腺癌细胞均无显著影响。结论:土贝母提取物与浙贝母总生物碱联合应用,可更好地促进人乳腺癌细胞凋亡,提高疗效;作用有效浓度越高,细胞凋亡率增加越显著。

鲜土贝母二氯甲烷提取物对人乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠肿瘤生长及肺转移的抑制作用

目的:研究土贝母鲜品二氯甲烷提取物(DEFT)对绿色荧光蛋白标记的人三阴性乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型中移植瘤生长和肺转移的作用。方法:应用外科原位移植方法,建立人乳腺癌裸鼠移植模型,随机分成3组,阴性对照组(0.9%Na Cl)、低剂量组(DEFT 50 mg/kg)和高剂量组(DEFT 75 mg/kg),每组5只,灌胃给药,1次/d,连续58 d。每周2次荧光成像系统釆集肿瘤图像,系统自带软件计算肿瘤面积;给药结束时,称取肿瘤质量,荧光成像系统观察肺转移情况。结果:给药前后3组裸鼠体质量变化差异均无统计学意义(P>0.05)。给药第14天,3组肿瘤面积比较,差异有统计学意义(P<0.05)。实验结束时,土贝母低剂量组和高剂量组肺转移的发生均低于阴性对照组(P<0.05)。土贝母低剂量组和高剂量的肿瘤质量低于阴性对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:鲜土贝母二氯甲烷提取物对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型中肿瘤生长及肺转移的发生有一定抑制作用。

中药土贝母诱导人乳腺癌细胞凋亡的实时成像

目的:采用先进的荧光实时显像技术对中药土贝母植物块茎提取物抗乳腺癌作用进行评价。方法:MDA-MB-231人乳腺癌细胞被设计成为细胞质红色荧光蛋白(RFP)基因表达而细胞核组蛋白H2B绿色荧光蛋白(GFP)基因表达的双色荧光细胞,并分别在2D平面塑料平皿及3D立体明胶海绵块两种不同的培养环境中培养,经土贝母鲜品二氯甲烷提取物(DEFT)干预后,荧光共聚焦显微镜下观察细胞形态及核碎片形成的情况;DNA电泳方法进一步检测细胞凋亡。结果:土贝母鲜品二氯甲烷提取物作用24h后荧光显微镜下即观察到MDA-MB-231细胞出现凋亡的形态学改变;DNA电泳在药物干预48h后检测到凋亡的DNA碎片梯带,72h后更加明显;3D明胶海绵培养的MDA-MB-231细胞经实验药物作用后其形态学改变的效果不如2D环境下明显。结论:土贝母鲜品二氯甲烷提取成分具有抗乳腺癌治疗的潜能。