反射式共聚焦激光扫描显微镜在银屑病诊疗中的应用

银屑病严重影响患者的身心健康和生活质量，及时的诊断、准确的监测病情严重程度是判定临床病情、制定治疗方案并评估其疗效的重要前提，然而，临床上很多银屑病的皮疹并不典型，而且仅凭肉眼难以进行临床分期；

反射式共聚焦激光扫描显微镜的原理

X线、B超、CT和核磁共振等影像学技术已经成为临床医学不可缺少的一部分,现代皮肤科学的发展也需要无创性、原位、实时、动态的检测方法,对可疑皮损进行重复检查,提供客观量化的评价指标.正是基于此发展的需求,结合皮肤组织特殊的部位、厚度等,皮肤影像学方法包括皮肤镜、皮肤超声等得到了迅猛的发展.在体反射式共聚焦激光扫描显微镜（invivo Reflectance Confocal Microscopy, RCM）是基于共聚焦原理的皮肤原位、在体、实时、动态三维成像技术,是近年来最具前景的无创性皮肤影像学方法之一.

反射式共聚焦激光扫描显微镜在基底细胞癌术后随访中的应用

目的:明确反射式共聚焦激光扫描显微镜检测在基底细胞癌术后随访中的应用价值。方法:对22例基底细胞癌患者术后1个月、3个月、6个月、12个月分别进行手术部位的RCM扫描检测,RCM发现肿瘤组织的患者行组织病理学检查。结果:22例患者行RCM规律复查,其中4例于术后1个月复查发现肿瘤细胞,1例术后3个月复查发现肿瘤细胞,1例于术后半年发现肿瘤组织。6例患者均再次病理学检查诊断明确基底细胞癌,其余16例随访12个月于手术部位未见复发。结论:RCM在基底细胞癌术后随访中具有重要的应用价值。

点滴型银屑病反射式共聚焦激光扫描显微镜和皮肤镜图像特征

目的观察点滴型银屑病在反射式共聚焦激光扫描显微镜(RCM)和皮肤镜下的图像特征,为诊断及鉴别点滴型银屑病提供参考依据。方法选取组织病理学确诊的32例点滴型银屑病患者和30例斑块型银屑病患者,每例选1处皮损行RCM及皮肤镜检查,记录并统计各项图像特征。结果点滴型银屑病RCM下主要特征为角化过度、角化不全、Munro微脓肿、颗粒层变薄或缺如、棘层增厚、真皮乳头内毛细血管迂曲扩张、基底细胞层液化、真皮乳头层炎性细胞浸润等。其中Munro微脓肿及基底细胞层液化,在点滴型银屑病中发生率明显高于斑块型银屑病(P<0.05);银屑病增生模式在点滴型银屑病中发生率低(P<0.05)。点滴型银屑病皮肤镜下主要表现为低倍镜下亮红色背景、白色鳞屑、血管多种排列模式(点/球状、点/球+线状、短棒状血管);高倍镜下发夹样/环状、肾小球状血管。其中短棒状血管及血管灶性分布在点滴型银屑病中更常见(P<0.05)。结论RCM和皮肤镜可作为点滴型银屑病的无创检测方法。

反射式共聚焦激光扫描显微镜在会阴色素减退性疾病中的应用

目的探讨反射式共聚焦激光扫描显微镜(reflectance confocal microscopy,RCM)在会阴色素减退性疾病中的应用价值。方法回顾性分析2018年1月—2021年12月就诊于新疆维吾尔自治区人民医院皮肤科37例患者会阴色素减退性疾病的临床、RCM及组织病理学特征。结果37例患者中白癜风15例,硬化性苔藓13例,无色素痣2例,神经性皮炎4例,皮脂腺异位1例,非特异性炎症后色素减退2例。37例患者的皮损在RCM检测的同一部位进行组织病理检查,诊断均符合RCM。结论RCM有助于会阴色素减退性疾病的诊断及鉴别诊断,对白癜风及硬化性苔藓的分期也有辅助作用。

反射式共聚焦激光扫描显微镜辅助诊断毛囊性扁平苔藓1例

患者女,50岁。躯干及上肢毛囊性丘疹伴瘙痒5个月。反射式共聚焦激光扫描显微镜(RCM)及病理诊断为毛囊性扁平苔藓。治疗后随访89 d皮疹消退,未再出现新皮疹。

利用激光扫描共聚焦显微镜观察同源四倍体水稻胚囊的形成与发育

激光扫描共聚焦显微镜是研究植物胚囊的形成与发育过程以及胚囊变异的理想工具。同源四倍体水稻是二倍体水稻染色体加倍形成的。本文利用激光扫描共聚焦显微镜直接观察经透明处理的水稻子房,研究加倍的基因剂量对于四倍体水稻的胚囊形成与发育的影响。结果表明,广陆矮4号四倍体大部分的胚囊形成与发育的过程基本是正常的,一部分胚囊出现异常现象,在成熟胚囊时期异常频率为10 61%;L202四倍体的异常频率较高,成熟胚囊时期异常频率达到45 65%。

运用激光扫描共聚焦显微镜观察新拌浆体多级絮凝结构

在聚羧酸超塑化剂、萘系超塑化剂、木质素磺酸盐类超塑化剂饱和掺量下,运用激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)直接观测三维空间的新拌水泥浆体水泥颗粒与水泥水化颗粒的絮凝情况,研究了不同类型超塑化剂对新拌水泥浆体中絮凝结构的影响规律。研究结果表明,经CLSM观察发现:掺加聚羧酸超塑化剂的水泥浆体内的絮凝结构体积较小且较为分散,而掺加其他类型超塑化剂的浆体内部絮凝结构体积较大且分散不均匀,不同分散强度的超塑化剂会打开不同级次的絮凝结构,从而显示出不同的减水率,由此构建新拌浆体多级絮凝结构理论模型。多级絮凝结构对于认识水泥-水-超塑化剂浆体结构和开发新型超塑化剂具有重要指导意义。

牙体玻璃离子充填材料边缘微渗漏的激光扫描共聚焦显微镜与金相显微镜比较研究

目的:在两种不同显微镜下定量观测人离体牙充填玻璃离子水门汀后边缘微渗漏的情况,并对两种方法进行比较。方法:选取新鲜无龋前磨牙,备洞,充填玻璃离子水门汀,37℃水浴条件下分别置于0.1%罗丹明B荧光染料或1%甲基蓝溶液浸染,激光扫描共聚焦显微镜和金相显微镜下分别测量染液渗入深度,定量评价微渗漏程度,对两种方法的检测结果进行比较。结果:两种方法均能检测到染液渗漏,在分别充填传统型玻璃离子水门汀和树脂改性玻璃离子水门汀的情况下,金相显微镜下测得的渗漏值分别为(33.18±5.59)μm和(32.30±3.76)μm,与激光扫描共聚焦显微镜下所得渗漏深度(22.57±2.59)μm及(21.93±1.51)μm相比,差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论:激光扫描共聚焦显微镜和金相显微镜均可用于牙体充填材料边缘微渗漏的观测,但综合效果前者更优。

白癜风自体表皮移植联合NB-UVB疗效及共聚焦激光扫描显微镜观察

目的观察白癜风自体表皮移植联合NB-UVB的疗效及用共聚焦激光扫描显微镜观察移植联合光疗前后的皮肤黑素环变化。方法自体表皮移植术治疗白癜风患者,每次移植前后用照片记录皮肤颜色变化,用共聚焦激光扫描显微镜观察移植白斑区域照射NB-UVB前后皮肤黑色素含量及黑素细胞形态的变化。结果20例联合NB-UVB治疗后的患者1次移植总显效率76.74%,有效率89.92%,2次移植显效率83.58%,有效率95.52%,2次移植显效率及有效率较1次移植稍高,两者差异无显著性(P>0.05),23例未联合NB-UVB的患者显效率73.34%,有效率82.98%,与照光组1次移植相比,差异无显著性(P>0.05),与照光组2次移植相比,差异有显著性(P<0.05)。20例照光患者中15例照光3次后移植处白斑边缘有缩小,色素加深,共聚焦激光扫描显微镜观察移植皮肤的黑色素环逐渐形成,接近正常。结论NB-UVB光疗联合自体表皮移植可以促进移植后皮肤黑色素生成,移植后的肤色较均匀。应用共聚焦激光扫描显微镜可以直观的观察到皮肤黑色素的形态变化,黑素环亮度加深与临床肤色加深较一致。

激光扫描共聚焦显微镜对人类染色体三维结构的观察

为了获得染色体内部结构的多种信息 ,以及对染色体形态构建提供有益的尝试 ,本实验利用荧光染料的特异性标记及激光扫描共聚焦显微镜的连续断层扫描和三维重建的特点 ,对人类染色体的形态结构进行观测。结果显示 :本方法不仅能显示染色体的荧光带纹的分布状况 ,而且能作染色体内部的一系列光学切片和染色体三维结构的观测。

应用共聚焦激光扫描显微镜对脑脊液淋巴白血病细胞线粒体的研究

目的通过共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)对脑脊液淋巴白血病细胞线粒体进行立体、动态、定量研究。方法将所观察的脑脊液细胞分为正常淋巴细胞组、急性淋巴白血病细胞组、鞘膜内注射治疗后急性淋巴白血病细胞组。以线粒体荧光探针MitotrackerGreenFM标记后,得到线粒体的断层扫描图像、荧光强度地形立体分布图定量测量线粒体的荧光强度值。结果急性淋巴白血病细胞(357.13+60.99)与正常淋巴细胞(269.38+56.11)、鞘膜内注射治疗后淋巴白血病细胞(317.41+57.57)相比,平均荧光值有非常显著性差异(P<0.01),线粒体空间立体分布有明显差别。结论采用CLSM对中枢神经系统淋巴白血病的诊断、鉴别诊断、细胞分化程度和功能状态判断有一定意义。

共聚焦激光扫描显微镜活体观测大脑皮质血管构筑及大脑皮质内微循环的研究

共聚焦激光扫描显微镜活体观测大脑皮质血管构筑及大脑皮质内微循环的研究庄明华，常立功，李进（中国医科大学解剖教研室沈阳１１０００１）黄集前，宋今丹（中国医科大学细胞生物教研室沈阳１１０００１）既往研究资料表明，大脑皮质血管构筑的研究多采用各种灌注手段，...

反射式共聚焦显微镜评估2940nm点阵铒激光治疗皮肤痤疮瘢痕的临床疗效

目的探讨反射式共聚焦显微镜（reflectancecorffocalmicroscopy，RCM）观察2940nm点阵铒激光治疗皮肤痤疮瘢痕的疗效和安全性。方法全部受试者进行2940nm点阵铒激光治疗，并分别于术前、术后半小时、术后1—4周及3个月分别进行数码照相、RCM检测。结果术后3个月，93．33％的患者达到满意效果；RCM示：真皮胶原明显致密。结论2940nto点阵铒激光治疗痤疮瘢痕具有较好疗效：RCM对2940nm点阵铒激光临床疗效的观察有意义。

反射式共聚焦激光扫描显微镜检测毛囊蠕形螨感染的临床应用

目的:探讨反射式共聚焦激光扫描显微镜(RCM)在毛囊蠕形螨检测中的临床应用。方法:对临床52例酒渣鼻患者采用挤压法、标准化皮肤表层取材法(SSSB)及RCM进行毛囊蠕形螨检测,并对其阳性率、高螨密度检出率(蠕形螨≥5个/cm^2)及单位面积内毛囊蠕形螨平均密度进行对比分析。结果:挤压法、标准化皮肤表层取材法(SSSB)及RCM法的阳性率分别为69.23%、78.85%、100%。单位面积内毛囊蠕形螨平均密度分别为8.21±6.45、16.22±13.12、410.8±203.2。结论:RCM法在毛囊蠕形螨检测中是一种更为敏感、准确、简便的方法。

应用共聚焦激光扫描显微镜对体外培养人脐静脉内皮细胞的研究

目的：研究内皮细胞内Ｃａ２＋。方法：应用共聚焦激光扫描显微镜术（ＣＬＳＭ）研究体外培养人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）胞浆内游离Ｃａ２＋变化。结果：５μｍｏｌ／ＬＦｌｕｏ－３／ＡＭ恒温（３７℃）孵育体外培养ＨＵ－ＶＥＣ６０ｍｉｎ即可达到最佳负载效果，孵育时间的再延长只能增加背景染色，随着观察时间的延长荧光强度逐渐减弱，可能是荧光淬灭的结果。另外，胞浆内游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）在整个细胞内的分布是不均匀的，其确切意义尚不清楚。结论：胞浆内游离Ｃａ２＋的标记需要适宜的条件，并尽早检测。Ｃａ２＋在细胞内的分布是不均匀的。

共聚焦激光扫描显微镜活体观测正常状态下家兔大脑皮质内微循环

目的 :活体状态下观察家兔大脑皮质内微循环。方法 :在开放颅窗的家兔动物模型上 ,荧光素标记血浆 ,罗丹明 6G标记WBC ,用共聚焦激光扫描显微镜活体观测正常状态下家兔大脑皮质内 3 0 0 μm处的微循环。结果 :动脉影像上有明显的充盈立体感 ,边缘清晰明确 ,可辩清两根动脉之间的互相走行关系 ,见“藤样”、“环样”结构 ,“喷泉”样分支 ,也见有动脉吻合成“环状” ,还见到“树枝”样动脉 ,“灌木丛”样且互相间吻合成网。静脉影像在外观上似较空虚的“囊样” ,与动脉形成鲜明对比 ,在静脉影像边缘处可见有一些压迹 ,还见有动静脉吻合及不同动脉分支间吻合。毛细血管迂曲盘绕形成血管袢 ,相互间也存在有吻合 ,以及与大脑皮质垂直方向的相互缠绕的柱形血管结构。白细胞在动静脉内都有贴壁现象 ,且静脉内贴壁现象较动脉内多。结论 :家兔大脑皮质内可见多种形态的血管结构 ,与人类的脑血管形态相似 ;

共聚焦激光扫描显微镜(MRC600)活体观测家兔大脑皮质内微循环的动物模型制作方法及其应用探讨

目的 :用共聚焦激光扫描显微镜活体观测家兔大脑皮质内微血管构筑及其微循环提供更近似于人类的动物模型。方法 :在开放颅窗的家兔动物模型上 ,荧光素标记血浆 ,罗丹明 6G标记WBC ,用共聚焦激光扫描显微镜活体观测正常状态下家兔大脑皮质内微循环 ,并经图像分析系统测量数据 ,用SAS软件包进行统计学分析。结果 :本研究探索用开放颅窗的家兔动物模型进行大脑皮质微循环的研究取得成功 ,作者认为采用开放颅窗的家兔动物模型使观察大脑皮质的深度达 2 5 0～ 30 0 μm ,对大脑皮质内微血管构筑及微循环进行活体观测 ,可进行连续断层扫描 ,或在同一层面进行连续定位扫描监测 ,所摄取图像经监视器及计算机摄入并存盘待分析 ,用图像分析系统进行观测血管口径 ,血流速度 ,血液流态 ,白细胞 ,红细胞运动等微循环指标 ,也可用标准Bio Radthruview软件三维重建 ,观察各种血管形态 ,研究大脑皮质微血管构筑。结论 :开放颅窗的家兔动物模型是更近似于人类的动物模型 。

三类常用牙体充填材料界面微渗漏的激光扫描共聚焦显微镜观测

目的观察银汞合金、复合树脂和玻璃离子三类常用牙体充填材料在体外充填后的微渗漏情况,比较材料的边缘封闭性。方法选取新鲜无龋前磨牙,备洞,充填材料,37℃水浴条件下0.1%罗丹明B荧光染料浸泡,激光扫描共聚焦显微镜测量荧光剂渗入深度,定量评价微渗漏程度。结果三类材料与牙体界面均有不同程度的荧光染料渗入,渗漏程度由小到大依次为玻璃离子(23.63±3.06μm)、银汞合金(31.68±10.97μm)、复合树脂(32.86±11.67μm)。玻璃离子与复合树脂相比有显著差异,在亚组中,使用玻璃离子预处理与银汞直接充填有显著差异,自酸蚀与全酸蚀粘结树脂也有显著统计学意义。其余各组比较无显著差异。结论三类材料中玻璃离子与牙体界面的微渗漏最小;使用玻璃离子预处理后获得的边缘封闭性优于银汞直接充填;全酸蚀复合树脂与牙体的密合性较自酸蚀更佳。

去卵巢致骨质疏松症大鼠腺垂体FS细胞中Cx43、S-100蛋白表达——激光扫描共聚焦显微镜观察

检测间隙连接蛋白 Cx43、神经组织蛋白 S- 10 0在去卵巢致骨质疏松症 (OVX- OP)大鼠腺垂体滤泡星形细胞 (FS细胞 )中的表达。实验采用 10月龄未孕产 SD雌性大鼠 40只 ,随机均分为卵巢切除组 (OVX组 ,n=2 0 )和假性手术对照组 (Sham组 ,n=2 0 )。于术后 6周末用双能 X线骨吸收测量法 (DEXA)测量大鼠全身及腰椎 4- 6 (L4- 6 )骨密度 (BMD)。取两组大鼠垂体 ,制成连续切片。应用 FITC标记的 Ig G探针 ,对腺垂体组织中 Cx43和 S- 10 0进行间接免疫荧光染色 ,并用激光扫描共聚焦显微镜 (L SCM)定位和定量分析腺垂体 FS细胞中 Cx43、 S- 10 0的表达。结果发现 ,术后 6周末 OVX组大鼠全身及 L4- 6 BMD均明显低于 Sham组值 (P<0 .0 1,P<0 .0 1)。Cx43阳性荧光反应主要定位于相邻的 FS细胞的胞浆中和 /或胞膜上。OVX组 Cx43阳性表达荧光强度和表达阳性率均显著低于 Sham组 (P<0 .0 1)。S- 10 0蛋白表达定位于 FS细胞的胞浆中 ,两组间 S- 10 0阳性表达荧光强度和表达阳性率无显著差异 (P>0 .0 5 )。本研究提示 ,SD大鼠 OVX术后 6周出现骨质疏松变化 ;OVX大鼠腺垂体 FS细胞数量无明显变化、而 Cx43表达显著下降 ,后者的变化可能与大鼠 OVX-