在线二维柱切换-超高效液相色谱法同时测定明目地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚的含量

建立了二维柱切换-超高效液相色谱法同时测定明目地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚含量的方法。一维色谱柱为Thermo Accucore XL C_（18）（250 mm×2.1 mm,4μm）,二维色谱柱为DIONEX Acclaim phenyl-1（150 mm×4.6 mm,3μm）,一维分析流动相为乙腈-水,梯度洗脱,二维分析流动相为乙腈-水,等度洗脱,14.5 min进行阀切换;检测波长：0~14.5 min为240 nm,14.5~30 min为275 nm,流速：0.5 m L/min,柱温：30℃。30 min即可完成明目地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚的含量测定,并有效地将莫诺苷同分异构体分离。莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚的线性范围分别为7.6~377 mg/L,9.2~459 mg/L,8.4~419 mg/L和8.2~409 mg/L,相关系数为0.9999,加样回收率为98.3%~100.2%。本方法快捷高效,可对控制明目地黄丸质量提供参考。

在线二维柱切换-高效液相色谱法测定人血清中多索茶碱浓度

目的:建立测定人血清中多索茶碱浓度的方法。方法:采用在线二维柱切换-高效液相色谱法测定人血清中多索茶碱浓度,一维色谱柱为Waters C_(18),中间柱为SC2,一维、二维柱流动相均为甲醇-水(70∶30,V/V),检测波长为273 nm,柱温为40℃,进样量为10μL。结果:多索茶碱在0.5~50.00μg/m L质量浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),检测限为0.01μg/m L,定量限为0.5μg/m L,日内、日间精密度的RSD分别为1.51%~1.89%和1.52%~1.92%(n=5),准确度为97.91%~104.19%(n=5),提取回收率为91.63%~93.44%(RSD<2.00%,n=3),基质效应RSD≤3.01%(n=6),稳定性的RSD<5.00%(n=6)。3例患者静脉输注多索茶碱葡萄糖注射液(0.3 g/d)达稳态后,次日给药前静脉血清中多索茶碱的浓度为3.23、3.35、3.68μg/m L,RSD为2.28%、2.34%、2.14%(n=5)。结论:该方法简便、快速、准确,适用于临床多索茶碱的血药浓度检测。

阿莫西林克拉维酸钾复方制剂中聚合物杂质的分析

目的:建立阿莫西林克拉维酸钾复方制剂中聚合物杂质的分析方法。方法:采用使用TSK-gel G2500PWxl色谱柱的高效凝胶排阻色谱法(HPSEC)进行色谱分离,采用二维高效液相色谱法(2D-HPLC法)对其分离的聚合物杂质进行定性,评价色谱系统的专属性;同时使用中国药典2015年版的RP-HPLC有关物质测定方法,通过扩展洗脱梯度范围进行聚合物分析;并比较2种分析方法对阿莫西林钠克拉维酸钾聚合物混合溶液中聚合物杂质的分离情况,确定理想的分析方法。结果:HPSEC法分析阿莫西林克拉维酸钾系统适用性对照品,共检出7个色谱峰;2D-HPLC法证明在HPSEC色谱图中阿莫西林开环二聚体与克拉维酸共出峰,阿莫西林闭环二聚体在阿莫西林主峰后出峰;HPSEC法分析实际样品,聚合物杂质峰展宽严重,无法准确进行定量分析。优化后的RP-HPLC法分析聚合物混合溶液,保留时间最长的聚合物杂质经LC-MS解析推断为阿莫西林闭环四聚体,各类聚合物杂质均在中国药典2015年版规定的梯度范围内被洗脱。结论:HPSEC法不能对阿莫西林克拉维酸钾中的聚合物杂质进行有效质控,中国药典2015年版二部收载的RP-HPLC有关物质方法分析聚合物杂质准确,专属性强。

头孢唑林钠原料及制剂中的聚合物杂质研究

聚合物杂质研究一直是头孢菌素类抗生素质量控制中的重要内容。7位侧链中不含活性基团氨基的头孢菌素的聚合物研究还未有报道,因此本研究以临床上广泛采用的头孢唑林钠为例,采用柱切换液相色谱-高分辨质谱联用法分析头孢唑林钠原料及制剂中的聚合物,结果检测到2个聚合物杂质峰,并对聚合物的可能结构进行了推测。通过二维液相色谱法,将葡聚糖凝胶色谱法和高效凝胶色谱法中的色谱峰切入到头孢唑林钠药典方法的有关物质方法 (反相高效液相色谱法)中,证明反相高效液相色谱法比葡聚糖凝胶色谱法和高效凝胶色谱法更适于聚合物检测。最终采用药典有关物质方法建立了头孢唑林钠原料和制剂的聚合物检测方法,并进行了方法学验证。