在线固相萃取-液质联用法定量分析生物基质中丁香醛及其在大鼠体内药代动力学研究中的应用

目的建立测定SD大鼠血浆中丁香醛的在线固相萃取-液质联用法(on-line SPE LC-MS/MS)。方法采用乙腈沉淀蛋白后,取上清经on-line SPE系统进行血浆样品预处理,选用香兰素为内标,以LC-MS/MS法测定大鼠血浆中丁香醛的含量。色谱柱为GRACE Alltima HP C18(50 mm×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸(60∶40,V∶V),流速为0.4 ml·min-1。电喷雾离子化(ESI)方式,采用多反应监测,检测离子为正离子,分别选择m/z 182.3→m/z123.1和m/z 153.1→m/z 93.0作为丁香醛和内标物香兰素的检测离子对。结果丁香醛在10.0～2 000μg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9997)。方法的准确度(相对误差,RE)范围为-8.5%～5.9%;日内精密度(相对标准偏差,RSD)<16.3%,日间精密度RSD<13.8%。SD大鼠灌胃给予丁香醛(17.5 mg.kg-1和70 mg.kg-1)后,主要药动学参数:T12分别为41.9 min和54.0 min、Cmax分别为361.0μg·L-1和944.0μg·L-1、Tmax分别为10.0 min和27.5 min、CL分别为848.1 ml·min-1.kg-1和683.9 ml·min-1·kg-1。结论建立的基质中丁香醛的测定方法快速、准确、特异性好,适用于丁香醛在SD大鼠体内的药代动力学研究。

在线固相萃取-液质联用法同时检测血液样品中12种芬太尼类药物

目的 采用在线固相萃取-液质联用(in-connection SPE-LC-MS/MS)技术,建立血液样品中12种芬太尼类药物的同时检测方法,为刑事案件血液中12种芬太尼类药物的检验鉴定提供依据。方法 血液样品用乙腈沉淀蛋白,经离心、稀释、过滤后上样,采用Agilent PLRP-S(15~20μm,2.1mm×12.5mm)在线SPE柱富集纯化,以Agilent Poroshell 120 EC-C18(3.0mm×150mm,2.7μm)为分析柱,用5mmol/L醋酸铵缓冲液(含0.1%甲酸)-乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI)、多反应监测(MRM)对12种芬太尼类药物进行检测。结果 实验优化了色谱条件、质谱条件、在线SPE上样流速、流动相种类、六通阀切换时间、样品有机溶剂比例等参数,经验证,在实验浓度范围内,12种芬太尼类药物线性关系良好,R^(2)均大于0.9990,方法检出限为0.2~0.4ng/mL,定量限为0.7~1.4ng/mL,回收率为83.1%~131.1%,日内精密度和日间精密度分别为1.0%~25.6%、2.1%~30.5%(n=6)。结论 本实验建立的血液样品中的12种芬太尼类药物同时检测方法,具有操作简单方便、灵敏度高、样品需求量少、检出限低等特点,适合于血液样品中芬太尼类药物的检测分析。

固相萃取-超高效液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱法检测水中大环内酯类抗生素

采用固相萃取-超高效液相色谱-三重四极杆线性离子阱质谱技术(SPE-UPLC-QTRAP MS)建立了环境水样中阿奇霉素、林可霉素、克林霉素、红霉素及替米考星5种大环内酯类抗生素的检测方法。调节水样pH为10后经HLB固相萃取柱净化、富集,然后用Kinetex F5色谱柱进行分离,用0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液进行洗脱,采用电喷雾正离子源(ESI+),多反应监测(MRM)-信息依赖采集(IDA)-增强子离子(EPI)扫描模式对样品进行检测,用多反应监测(MRM)进行定量,增强子离子(EPI)谱图库辅助定性。结果表明:5种大环内酯类抗生素线性关系良好,相关系数均大于0.9992;检出限为0.01~0.30μg·L^(-1),定量限为0.10~0.50μg·L^(-1);3种不同浓度的水样加标回收率为71.60%~111.05%,相对标准偏差均在10%以内,EPI谱库比对纯度值均大于90%。该方法将传统的MRM扫描模式结合EPI谱图库检索,实现了同时定性和定量分析,对未知物准确定性定量检测提供了重要参考。

固相萃取-高效液相色谱-三重四级杆质谱联用法测定一次性静脉留置针中痕量双酚A的方法优化

目的:通过优化固相萃取(SPE)等各项参数,建立固相萃取纯化静脉留置针中双酚A(BPA)含量样品的处理方法。方法:样品经固相萃取柱净化并富集BPA,采用液质联用法(HPLC-MS/MS)测定。结果:建立了一种HPLC-MS/MS法测定静脉留置针中BPA含量样品的固相萃取方法。结论:该方法条件优良,可有效纯化和富集静脉留置针中的痕量BPA,便于准确测定样品中BPA的含量。

固相萃取-高效液相色谱串联质谱法测定饮用水中39种药品及个人护理品

文章建立了应用固相萃取-高效液相色谱-串联质谱同时测定生活饮用水中39种药品及个人护理品的分析方法。样品经HLB固相萃取小柱萃取后,浓缩直接进高效液相色谱-质谱联用仪进行分析,以Agilent PFP色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm)进行分离,甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,采用电喷雾AJS离子源正离子(ESI)模式扫描,多反应监测模式(MRM)进行检测。结果显示:39种药品及个人护理品在0.05~100μg/L的不同线性范围均呈现良好的线性关系(r=0.9954~0.9999),方法检出限为0.029~1.300 ng/L。39种药品及个人护理品对生活饮用水实际样品低、中、高3个加标水平下的加标回收率分别为63.0%~123.0%、70.1%~126.0%、78.7%~122.0%,相对标准偏差分别为1.4%~19.0%、0.7%~9.3%、0.6%~9.8%。该检测方法实现了普通高效液相色谱质谱仪同时测定39种药品及个人护理品且能满足国家标准的精密度和准确度,具有操作简单、灵敏度高等优点,适用于生活饮用水中药品及个人护理品的检测。

固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定生活饮用水中11种全氟化合物的方法探究及应用

文章开发固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法(SPE-HPLC-MS)对生活饮用水中11种全氟化合物(PFCs)进行同时测定的分析方法。样品经WAX固相萃取小柱萃取后,浓缩直接进液相色谱-质谱联用仪进行分析,以ZORBAX SB-Aq色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm)进行分离,5 mmol/L乙酸铵溶液和甲醇为流动相梯度洗脱,使用电喷雾AJS离子源负离子(ESI-)模式进行扫描,多反应监测模式(MRM)检测。结果显示:11种PFCs在线性值为5.0~200.0 ng/L呈现良好的线性关系(r=0.998 4~0.999 8),方法检出限为0.32~1.20 ng/L。11种全氟化合物对生活饮用水实际样品低、中、高3个加标水平下的加标回收率分别为80.8%~104.0%、84.1%~102.0%、86.9%~123.0%,相对标准偏差(RSD)为0.8%~11.0%。该检测方法灵敏度高、操作简便,实现了普通HPLC-MS同时测定11种PFCs且能满足《生活饮用水卫生标准》(GB 5749—2022)限值要求,适用于检测生活饮用水中的PFCs。

在线固相萃取-液质联用法测定小鼠血浆中寡肽RX31肽的药代动力学研究

目的建立测定昆明小鼠血浆中RX31肽的在线固相萃取-液质联用法(on-line SPE HPLC-MS/MS)。方法血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,取上清经on-line SPE,以甲醇和0.1%甲酸为流动相,资生堂CAPCELL PAK MGⅢ柱分析;采用电喷雾电离源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测,采用外标法对RX31肽样品进行定量分析。结果与结论定量分析的离子反应为m/z 640.3→m/z 303.3。测定昆明小鼠血浆中RX31肽的线性范围为10～500 ng/ml,最低定量限(LLOQ)为10.0 ng/ml,方法学符合药代动力学研究要求。将该法应用于昆明小鼠单次皮下注射RX31肽(10、30和90 mg/kg)后的药代动力学研究中,利用单一的固相萃取柱完成了全部血浆样品的定量分析。此方法为RX31肽的非临床药代动力学研究提供了可靠的数据,对其临床研究具有重要的参考价值。

在线固相萃取-液质联用检测饮用水中9种PPCPs

建立了在线固相萃取-高效液相色谱质谱联用测定饮用水中克霉唑、特比萘芬、咪康唑、乙胺嗪、左旋咪唑、奥芬达唑、吡喹酮、甲苯噻嗪、溴己新等9种PPCPs污染物的方法。采用HLB柱在线富集,BEH C18进行分析检测,正离子多反应监测(M RM)模式,外标法定量。在线富集后水样中PPCPs污染物的定量限达到0.1~0.2 ng/L,线性回归方程的相关系数R2>0.99,以空白水样为基质进行的三水平加标实验的回收率范围65.0%~119.4%,相对标准偏差<10%。方法适用水样中多种PPCPs污染物高灵敏度的分析。

在线固相萃取/液相色谱-线性离子阱质谱法同时定性定量检测全血和尿液中7种抗凝血杀鼠药

建立了同时测定全血和尿液样品中7种抗凝血杀鼠药的在线固相萃取／液相色谱-线性离子阱质谱（ on-line SPE／LC-LIT／MS）分析方法。用乙腈沉淀样品中的蛋白质，于稀释、离心、过滤后直接进样。经在线固相萃取柱富集纯化；以 C18柱为分析柱，甲醇-乙酸铵水溶液（0.02 mol／L）为流动相进行梯度洗脱；在电喷雾电离（ ESI）负离子模式下，记录目标母离子在锁定保留时间窗口内的二级全扫描信号，通过自建数据库进行定性确证，挑选高灵敏度与专属性的二级子离子进行定量，从而实现7种杀鼠药的同时定性和定量分析。7种杀鼠药在各自质量浓度范围内线性关系良好，相关系数为0.9946～0.9997，检出限和定量限分别为0.02～1.00 ng／mL 和0.10～4.00 ng／mL，3个添加水平的回收率为81.0％～113.9％，相对标准偏差为0.1％～6.2％（ n＝6）。该方法简单方便，灵敏度高，能够满足全血和尿液样品中7种抗凝血杀鼠药的快速筛查和准确定量。

多壁碳纳米管分散固相萃取-液质联用技术测定茶叶中草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸残留量

目的：建立茶叶中草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸残留量的超高效液相色谱串联质谱分析方法。方法样品经水提取后采用分散固相萃取技术,以多壁碳纳米管(MWCNTS)和N-丙基乙二胺键合固相吸附剂(PSA)吸附提取液中的杂质,上清液用9-芴基氯甲酸酯(FMOC-Cl)衍生。衍生物用 BEH C18进行分离,以乙腈-4 mmol乙酸铵水溶液为流动相,电喷雾正离子模式电离(ESI+),多反应监测模式检测(MRM),外标法定量。结果方法的线性范围是0.1～1μg/mL,相关系数大于0.999,定量限为10μg/kg,以绿茶为基质,三种物质添加水平分别为0.25、0.50、1.00 mg/kg,回收率范围分别为草甘膦95%~116%,草铵膦98%~118%,氨甲基膦酸74%~84%,精密度均小于6.79%(n=6)。结论该方法具有简便快速、灵敏度高、准确性强等特点,适合于测定茶叶中草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸的含量。

在线固相萃取-液相色谱-串联质谱法检测蘑菇中毒患者尿液中痕量α-鹅膏毒肽

建立了在线固相萃取-液相色谱-串联质谱(online SPE-LC-MS/MS)测定蘑菇中毒患者尿液中痕量α-鹅膏毒肽的分析方法。样品经甲酸酸化的乙腈-甲醇(5∶1,v/v)沉淀蛋白质,反相液液微萃取去除样品提取液中的有机溶剂,毒素经ODS微柱(5 mm×2.1 mm,5μm)在线SPE净化,XBridgeTM BEH C18色谱柱(150 mm×3.0 mm,2.5μm)分离,MS/MS测定。采用基于定量环的快速阀切换技术作为在线SPE和LC-MS/MS模块的接口,使得两个分离模块互相独立,无论是流动相还是压力,都不会互相干扰,保证了系统的稳定性;在线系统的精准净化,有效消除了后续质谱检测的基质效应,确保了尿液中痕量水平α-鹅膏毒肽的定性定量检测。尿液中α-鹅膏毒肽在0.1~50μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r2)为0.9983;检出限(LOD)为0.03μg/L;α-鹅膏毒肽的加标(0.1、2.0和20μg/L)平均回收率为84.3%~91.7%,相对标准偏差(RSD)为3.8%~7.2%。体内鹅膏毒肽代谢迅速,生物基质中痕量水平毒素的检测是其中毒实验室鉴定的主要难题,通过实际样品检测,证明该法操作简单,准确、灵敏;溶剂沉淀蛋白质和反相液液微萃取去除有机相和脂溶性基质的简单操作,可以作为水溶性毒素在线SPE-LC-MS/MS检测时快速且有效的配套前处理方法;基于在线SPE精准净化技术,可以实现尿液中α-鹅膏毒肽的高灵敏度测定(LOD为0.03μg/L),解决了中毒时患者体内痕量水平α-鹅膏毒肽定性确证的难题,部分患者α-鹅膏毒肽中毒实验室鉴定的时间可以扩展到90 h以上;同时,痕量水平的定量检测技术,可以为中毒后迅速代谢的α-鹅膏毒肽在体内的剂量反应关系研究提供可靠的技术支撑。

固相萃取-超高效液相色谱-质谱联用技术检测大鼠血浆中T-2毒素及其主要代谢产物

应用固相萃取-超高效液相色谱-三重四极杆-线性离子阱串联质谱技术,建立了高灵敏度的大鼠血浆中单端孢霉烯族(T-2)毒素及其5种主要代谢物的分析方法。在优化的固相萃取条件下,大鼠血浆经HLB固相萃取柱净化富集后,以XDB-C18色谱柱(50 mm×4.6 mm,1.8μm)分离,以5 mmol/L乙酸铵溶液和甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,以玉米赤霉酮为内标,在正离子多反应监测模式下对各分析物进行定性和定量分析。各分析物在0.1～500.0μg/L范围内线性良好(R2>0.997);检出限介于0.02～0.3μg/L之间;加标回收率为93.5%～120.3%;相对标准偏差均小于13%。本方法快速、重现性好、灵敏度高,已成功应用于T-2毒素中毒的溯源性研究。

固相萃取-液质联用法测定乳制品中对羟基苯甲酸酯

建立了乳制品中的对羟基苯甲酸酯类防腐剂对羟基苯甲酸甲酯(MP)、对羟基苯甲酸乙酯(EP)、对羟基苯甲酸丙酯(PP)和对羟基苯甲酸正丁酯(BP)的高效液相色谱(HPLC)初筛、质谱(MS)确认的分析方法。样品用甲醇溶解后,用固相萃取柱(SPE-C18)进行净化。使用C18反相色谱柱分离,以甲醇溶液-水溶液为流动相,采用梯度洗脱。二极管阵列检测器检测,检测波长254nm,4种防腐剂在12min之内完全分离。在选定的条件下各组分的相关系数均大于0.9994,线形范围0.01～100mg/L,回收率为97.4%～106%。并用负离子一级质谱进行进一步确认分析。本方法用于乳制品中的对羟基苯甲酸酯类防腐剂的测定,具有快速、简便、准确的特点。

固相萃取-液质联用法同时测定食品中11种禁用工业染料

采用固相萃取净化技术、固相萃取一液质联用分离和测定粮食及肉制品中苏丹红G、苏丹蓝2、苏丹红7B、苏丹红I、苏丹红II、苏丹红ⅡI、苏丹红Ⅳ、对位红、分散橙I、分散橙II、分散橙37共11种禁用工业染料。样品经正己烷提取，中性氧化铝固相萃取柱净化，采用C18柱，以10mmol／L乙酸铵-0．2％甲酸溶液（A）和甲醇-乙腈溶液（B）（7：3，V/V）为流动相，采用多反应监测（MRM）模式测定。11种染料的相关系数席均大于0．99，回收率在70％-102％之间，方法精密度小于14％（RSD，n=6），检出限在0．02～0．8μg／kg。本方法灵敏度高、操作简单高效，适合于粮食及肉制品中11种禁用工业染料的定量及确证分析。

限进材料固相萃取-高效液相色谱在线联用检测牛奶中四环素类抗生素残留

建立了一种限进材料固相萃取-高效液相色谱在线联用检测牛奶中四环素类抗生素残留的分析方法。利用原子转移自由基聚合法制备的限进型聚（苯乙烯-co-二乙烯苯）键合硅胶作为同时富集四环素类小分子和排阻蛋白大分子的固相萃取材料。经过限进萃取柱的净化和富集后,牛奶样品中的四环素类抗生素（土霉素、四环素和金霉素）被反冲进反相C18分析柱进行色谱分离和测定。牛血清蛋白在限进萃取柱上的洗脱率为96.0%,说明制备的限进材料具有很好的排阻大分子蛋白的效果。3种四环素类抗生素在牛奶样品中的加标回收率为88.3%-101.5%,RSD〈8.0%;方法检出限为50-80μg/L,线性范围为0.05-2.0μg/mL。结果表明,本方法简单高效,淮确度好,检出限达到了规定要求,可以作为检测牛奶样品中四环素类抗生素残留的方法。

在线固相萃取-高效液相色谱-质谱法快速测定绵羊尿液中3种轭合态β-受体激动剂

采用双三元高效液相色谱和液相质谱联用（ HPLC-MS/MS）建立了测定绵羊原始尿液及酶解后尿液中β-受体激动剂（沙丁胺醇、克伦特罗、莱克多巴胺）在线SPE（ Turboflow）检测的方法。分别对Turboflow柱和分析柱条件进行优化,最终确定样品上样速率4 mL/min,进样体积100μL,样品净化时间0.5 min。本方法的回收率在91.3％～112.2％之间,线性范围为0.1～100μg/L,精密度RSD〈1％,日间峰面积RSD〈12％,说明方法的重现性和稳定性良好。在对酶解后的尿液检测中发现,对于苯酚类β-受体激动剂（沙丁胺醇、莱克多巴胺）,酶解后的尿液中检出化合物含量明显高于未酶解样品,对苯胺类β-受体激动剂（克伦特罗）的影响不大。本方法只需对原始尿液或酶解后的尿液进行过膜处理,样品的在线净化、富集、柱平衡和最终分析可在15 min内完成,大大缩短了日常分析所需时间。本方法操作简单,可用于养殖动物β-受体激动剂大规模筛查。

全自动固相萃取-液质联用法测定动物源性食品中镇静剂类药物残留

建立全自动固相萃取一液质联用同位素内标法测定动物源性食品中13种镇静剂的方法。样品中添加同位素内标地西泮-d5和氯丙嗪-d6，经乙腈提取，全自动固相萃取仪净化，Waters ACQUITY UPLC TM BEHC18（2．1mm×100mm，1．7μm）不锈钢色谱柱分离，三重四级杆质谱多反应监测方式检测，同位素内标法定量。13种镇静剂在线性范围内具有良好的线性关系，相关系数r≥0．999，检出限在0．030～0．113μg/kg之间，加标回收率在88．5％～115．0％之间，相对标准偏差在2．45％-7．92％之间。该方法样品前处理简单，净化过程实现了自动化操作，大大提高了工作效率；该方法灵敏度高、回收率好，适用于动物源性食品中多种镇静剂的同时检测。

固相萃取-液质联用法同时测定水中的喹诺酮类和磺胺类抗生素

建立了固相萃取-超高效液相色谱三重四级杆质谱联用法同时测定水中痕量的5种喹诺酮类和6种磺胺类抗生素残留的方法,水样经过固相萃取富集后由液相色谱分离、三重四级杆质谱检测。该方法在8 min内完成对11种目标化合物的分析。喹诺酮类抗生素线性范围为0.5～50μg/L,磺胺类抗生素线性范围为1～100μg/L,相关系数均大于0.995,6次空白加标重复测定的相对标准偏差(n=6)为喹诺酮类抗生素5.3%～9.0%,磺胺类抗生素4.7%～10.2%。11种目标化合物的方法检出限在0.04～0.22 ng/L之间,实际样品的加标回收率为62.1%～137%。该方法操作简便,重现性好,可用于地表水中抗生素的检测。

在线固相萃取-二维液相色谱串联质谱法测定人脑脊液中替考拉宁浓度

建立测定人脑脊液中替考拉宁浓度的在线固相萃取-二维液相色谱-串联质谱（ SPE-2DLC-MS/MS）法。脑脊液样品经在线固相萃取处理后,通过阀切换二维色谱技术,转载至Shiseido CAPCALL-PAK C18分析柱上进行分离,以25mmol/L乙酸铵（pH 6.0）-乙腈为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min。采用电喷雾离子源（ ESI）,以选择反应监测（ SRM）方式进行正离子检测,采用氢溴酸东莨菪碱为内标,对脑脊液样本中替考拉宁浓度进行定量检测。本方法中替考拉宁浓度在25～5000μg/L的范围内线性关系良好（R2=0.9993,n=6）；日间和日内精密度RSD均小于6％,低中高3个浓度的回收率在100.8％～109.9％之间。结果表明,本方法的选择性好,线性、精密度、准确度和灵敏度高,可用于临床监测替考拉宁浓度。

在线固相萃取/液相色谱-串联质谱法快速检测全血及尿液中15种杀鼠药

建立了同时测定血液和尿液样品中15种杀鼠药的在线固相萃取/液相色谱-三重四极杆串联质谱(On-line SPE/LC-MS/MS)分析方法。用乙腈沉淀样品中的蛋白质,经稀释、离心、过滤后直接进样。通过在线固相萃取柱HLB富集纯化,以ZORBAX Eclipse Plus C18柱为分析柱,乙腈-0.01 mol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱。采用电喷雾电离(ESI+/ESI-)快速正负切换模式,动态多反应监测模式(DMRM)扫描,外标法定量。结果表明,15种杀鼠药采用二次方程拟合时线性关系良好,血液中r^2≥0.997 8,尿液r^2≥0.996 5,方法的检出限和定量下限分别为0.10~5.00μg/L和0.50~10.0μg/L,3个添加水平下的回收率为81.8%~109.6%,日内相对标准偏差(RSD)为0.3%~3.6%,日间RSD为0.3%~3.8%(n=6)。该方法简单方便,灵敏度高,能够用以血液和尿液样品中15种杀鼠药的快速筛查和准确定量。