基于RAM-HPLC在线富集技术检测大鼠血浆及尿液中的呋塞米

目的通过柱切换技术建立限进性填料柱-高效液相色谱法,实现在线直接进样并检测大鼠血浆及尿液中的呋塞米。方法以自制限进填料柱为预处理柱,Luna C18柱为分析柱,预处理流动相为水-甲醇（95∶5,V/V）,含体积百分数为0.1%的甲酸,流速为1 ml/min;分析流动相为血浆：甲醇-水（65∶35,V/V）,尿液：甲醇-水（55∶45,V/V）,均含体积百分数为0.1%的甲酸,流速均为1ml/min,柱温为25℃;检测波长为274 nm。结果呋塞米血浆样品在进样100μl时,富集效果良好,在0.1-3.2μg/ml的浓度范围内具有良好的线性关系（r=0.9995）,尿液进样20μl,呋塞米浓度在0.5-32μg/ml范围内具有良好的线性关系（r=0.9991）,血样及尿样的三个加标水平下的平均回收率分别为101.82%-113.36%,98.75%-112.27%,日内日间精密度均小于5%。结论药代动力学参数AUC0→24为6.265μg/（ml·h）,t1/2为2.447 h,Cmax为1.414μg/ml;24 h内呋塞米的累积排泄率为32.50%-39.08%。本方法简单快速,适用于血浆及尿液中呋塞米的直接进样检测。

HPLC在线富集法研究高原药物呋塞米的药代动力学

目的建立柱切换技术和限进性填料柱-HPLC法，实现在线直接进样并检测大鼠血浆中的呋塞米含量。方法以自制限进填料柱为预处理柱，Luna C18柱为分析柱，预处理流动相为水-甲醇（95：5，V/VA），含体积百分数为0．1％的甲酸，分析流动相为甲醇-水（65：35，V/V），流速均为1ml·min-1，柱温为25℃；检测波长为274nm。结果呋塞米血浆样品在进样100m时，富集效果良好，在0．1～3．2Ixg·ml-1的浓度范围内具有良好的线性关系（r=0．9995），高、中、低（0．4、0．8、1．61μg·ml-1）3个浓度血样的平均回收率分别为111．31％、104．48％和99．76％，日内日间精密度均小于5％。结论本方法简单快速，适用于血浆中呋塞米的直接进样检测。