地拉韦啶及有关物质的HPLC测定

建立了HPLC法测定地拉韦啶含量及有关物质。采用C18柱,以乙腈-50mmol/L磷酸二氢钠溶液(pH4.6)(55∶45)为流动相,检测波长300nm。地拉韦啶在12～60μg/ml浓度范围内线性关系良好。

HPLC法测定甲磺酸地拉韦啶的有关物质

目的建立甲磺酸地拉韦啶有关物质的高效液相色谱测定法。方法采用Cosmosil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈作为流动相A,50 mmol·L^(-1)磷酸二氢钠缓冲液(磷酸调节pH值至3.6)作为流动相B,梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^(-1),进样量为10μL,检测波长为254 nm。柱温为40℃。结果甲磺酸地拉韦啶与有关物质A、B、C、D、E及未知杂质均能良好分离;各有关物质在考察范围内线性关系良好,r≥0.9991,回收率在90.6%~102.8%内(RSD≤3%,n=9)。三批样品中已知杂质均未检出,最大未知杂质及总杂质含量质量分数均低于限度。结论所建立的方法可用于甲磺酸地拉韦啶中有关物质的测定。

高分辨液质联用法测定奥司他韦原料药中有关物质

目的建立测定奥司他韦原料药中有关物质的超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)法,并鉴定其结构。方法色谱柱为Kinetex柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈(梯度洗脱),进样量为5μL,检测波长为207 nm,ESI电离源,正离子扫描模式。结果奥司他韦色谱峰峰形良好,经UPLC-Q-TOF-MS的一级和二级质谱图鉴定出4种有关物质,其中2种未见文献报道,并推导出了其裂解规律。结论该方法适用于奥司他韦原料药中有关物质的快速测定,可供其质量控制参考。

RP-HPLC法测定更昔洛韦粉针剂含量及有关物质

目的:建立RP-HPLC法测定更昔洛韦粉针剂含量及有关物质.方法: 采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),以甲醇-水(10∶90)为流动相,流速为0.8 mL/min,检测波长为252 nm,柱温为25℃.结果:样品中更昔洛韦与有关物质分离良好,有关物质含量少.更昔洛韦浓度线性范围为5.22～52.20 mg/L,相关系数r=0.9998;平均回收率为100.1%,RSD=0.91%.结论:该法操作简便、快速、准确.

UPLC法测定度鲁特韦有关物质含量

目的:建立测定度鲁特韦原料药有关物质含量的超高效液相色谱方法。方法:色谱柱为Waters BEH C 18(2.1 mm×150 mm×1.7μm),流动相:10 mmol·L-1甲酸铵溶液(pH=2.5)为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱:0~15 min,流动相B 20%~80%,柱温30℃,流速0.28 mL·min-1,进样量1.0μL,检测波长246 nm。结果:度鲁特韦与各杂质之间的分离度均>1.5;杂质A~D的检测限和定量限分别为8 ng·mL-1和25 ng·mL-1;度鲁特韦浓度和杂质A~D浓度在相应浓度范围内与峰面积线性关系良好,相关系数r均>0.998;杂质A~D加样回收率均在80.0%~120.0%之间,RSD<5.0%(n=9),度鲁特韦含量准确度结果在99.0%~101.0%范围内,RSD<0.2%(n=9),3批原料药含量结果分别为99.79%,99.77%,100.03%,杂质A分别为0.10%,0.10%,0.11%,杂质B、C均未检出,未知单杂均小于0.05%,总杂分别为0.15%,0.13%,0.14%。结论:本研究建立的UPLC法,专属性强,重复性好,灵敏度和准确度高,可作为度鲁特韦原料药有关物质和含量的控制方法。

磷酸奥司他韦胶囊有关物质测定方法的研究

目的建立测定磷酸奥司他韦胶囊中有关物质的高效液相色谱法。方法Waters symmetry C8柱(4.6mm×250mm,5μm);0.05mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液[用1mol·L^(-1)氢氧化钾溶液调节pH值至(6.0±0.1)]-甲醇-乙腈(620∶245∶135)为流动相,检测波长为207nm,柱温为50℃,流速为1.2ml·min^(-1)。结果建立的反相色谱法专属性强、灵敏度高,对六批样品进行检测,结果准确。结论该方法操作简便,可准确进行磷酸奥司他韦胶囊有关物质的测定,可对其进行更好的质量控制。

LC-MS/MS法同时测定人血浆中依曲韦林、利匹韦林和地拉韦啶的浓度

目的：建立同时测定人血浆中依曲韦林、利匹韦林和地拉韦啶浓度的方法。方法：血浆样品以沉淀蛋白联合萃取的方法进行处理后,采用液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法进样测定,以替米沙坦为内标,Eclipse XDB-C18为色谱柱,0.1%甲酸＋100%水-甲醇（20∶80）为流动相进行色谱分离。采用电喷雾电离源（ESI）,以多反应监测（MRM）方式进行正电荷检测,用于定量分析的依曲韦林、利匹韦林、地拉韦啶和内标检测离子对m/z分别为437.1/165.1、367.2/195.2、457.3/221.2和515.1/276.0。结果：依曲韦林、利匹韦林、地拉韦啶血药浓度分别在0.02~5μg/ml（r=0.994 2）、0.005~10μg/ml（r=0.995 6）、0.001~5μg/ml（r=0.998 0）范围内线性关系良好,定量下限可分别达20、5、1 ng/ml;各待测物的日内、日间精密度以及准确度均符合生物样品分析相关要求,RSD〈10%。血浆样品在经历3次冷冻-解冻循环、室温放置4 h和-80℃放置60 d的条件下均稳定,RSD〈15%。结论：该方法具有快速、灵敏、重复性好等特点,适用于临床测定血药浓度及药动学研究。

盐酸伐昔洛韦含量及其有关物质的HPLC法测定

建立了高效液相色谱法测定盐酸伐昔洛韦的含量及其有关物质。使用Phenomenex Hyper Clone C18色谱柱,流动相为0.01%氨水（用磷酸调至p H 3.5）∶乙腈（70∶30）,检测波长251 nm。盐酸伐昔洛韦与有关物质分离完全,在2.5~500μg/ml范围内线性关系良好。平均回收率为99.82%,RSD为0.40%。

RP-HPLC法测定β-司他夫定的有关物质

目的：建立了β-司他夫定原料有关物质的RP-HPLC测定方法和水解破坏制备系统适用性试验溶液方法。方法：采用Agilent 1100型高效液相色谱仪,使用SUPELCOSIL LC-18-DB（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以0.01 mol·L^-1醋酸铵溶液-乙腈（96.5∶3.5）和0.01 mol·L^-1醋酸铵溶液-乙腈（75∶25）为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm,柱温25℃。结果：β-司他夫定和4种已知杂质及其他未知杂质均能达到有效分离;经水解破坏产生的α-司他夫定与β-司他夫定的分离度均达2.8;β-司他夫定、胸腺嘧啶、β-胸苷与5-O＇-苯甲酰-司他夫定线性范围分别为0.51-26μg·m L^-1（r=1.000）、0.13-27μg·m L^-1（r=1.000）、0.50-25μg·m L^-1（r=1.000）、1.7-6.3μg·m L^-1（r=1.000）,已知杂质胸腺嘧啶、β-胸苷与5-O＇-苯甲酰-司他夫定的平均加样回收率（n=9）分别为102.8%（RSD=1.5%）、100.6%（RSD=0.9%）、101.9%（RSD=2.1%）;β-司他夫定与3种已知杂质的最小检出量均在2.5 ng以下;经水解破坏制备的系统适用性溶液的重复性良好;供试品溶液在4℃下的30 h内基本稳定。结论：本方法灵敏、准确、可靠,专属性强,可用于β-司他夫定原料的有关物质测定。

HPLC-MS/MS法同时测定止咳平喘类中成药中添加的7个化学抗菌类物质

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法测定止咳平喘类中成药中非法添加的磺胺嘧啶、吡哌酸、甲氧苄啶、氧氟沙星、诺氟沙星、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑7个化学抗菌类物质。方法:以Venusil MP C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-甲醇(1∶1)-甲酸铵溶液为流动相,梯度洗脱,柱温为30℃,流速为1 mL·min^(-1);质谱配置电喷雾电离源(ESI),干燥气温度325℃,干燥气流速5 L·min^(-1),雾化压力103.4 kPa,扫描方式为正离子模式进行一级质谱全扫描、二级质谱全扫描,扫描范围为m/z 50~650。结果:7个化学抗菌药检测下限均小于0.04μg,回收率为94.4%~98.9%;在1.4~17.6μg·mL^(-1)范围内,线性关系良好(r>0.9996);3批阴性样品呈阴性,3批模拟阳性样品呈阳性,方法专属性强;用本文建立的方法对假药A~E进行了检验,检出假药A、C、D含甲氧苄啶、磺胺甲噁唑。结论:本方法专属性强,灵敏度高,可用于7个化学抗菌类非法添加物的验证试验。