不同时期8株IBDV地方株VP2基因变异分析

对分离于洛阳地区1991和2001年前后间隔达10年之久的两个时期的8株IBDV进行了VP2基因的克隆与序列分析。结果发现,8个地方株虽均属于IBDV超强毒株,但各个毒株间也有一定的差异。根据它们的核苷酸和氨基酸同源性高低可明显分为3群,分别位于系统进化树上超强毒区的3个小分支上。第1群包括1991年分离的L912、L914和L916三株;第2群包括L913、L017和L018三株;第3群包括2001年分离的L015和L016二株。群内各毒株间同源性较高,在98.3%～100%之间;群间各毒株的同源性则相对较低,在95%～97.9%之间,其中最低的为L015和L017、L016和L018二对,同源性均只有95%。进一步的序列分析表明,8个地方分离株均具有vvIBDV所具有的特征。其中,1991年的4株在各亲水区和七肽区的氨基酸和经典株及传统的超强毒株相比均无明显的变化;而2001年的4个分离株虽仍符合超强毒株的特点,但在相应亲水区均有1～2个氨基酸发生替换,特别是L015和L016株还出现了4个其它各毒株均没有的氨基酸位点变化。

犬种布氏菌地方株的DNA中G+Cmol%测定

首次利用热变性法对9株地方犬种布氏菌DNA的G+C含量进行了测定,同时以2株国际标准株为对照。G+C mol％值在56.6～58.4范围内,与文献报道的犬种布氏菌和我们所用的2株标准株所得的G+C mol％值是一致的。各株菌经常规检定、噬菌体裂解试验、血清学检查所得的结果均符合于犬种布氏菌的特性。说明本试验测定的G+C mol％值代表了犬种布氏菌的DNA分子结构比值。为我国地方菌种、特别是粗糙型布氏菌的检定提供了一个新的方法。此外,对传统的DNA提取法进行了改进,使之更便于本试验的要求。

中药莪术油对肺炎支原体地方株的体外抑制实验研究

目的 测定中药莪术油、红霉素对肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,MP)地方株的体外抑制情况。方法 采用肉汤倍比稀释方法,在微生物敏感性体外实验中分别测定莪术油对肺炎支原体地方株的最小抑菌浓度(minimal inhibitory conentration,MIC)、红霉素的MIC和莪术油联用红霉素时其各自的MIC。结果 体外实验中莪术油对肺炎支原体地方株的为MIC2.5μg/ml,红霉素的MIC0.025μg/ml。莪术油联用红霉素时其各自的MIC分别为1.25μg/ml和 0.00625μg/ml。结论 莪术油对肺炎支原体地方株有抑制作用,莪术油与红霉素联用可增加抑菌效果。

鸡肾型传染性支气管炎病毒陕西地方株的分离与鉴定

对陕北(榆林)、关中(宝鸡市、扶风县)、陕南(洋县)等地鸡场疑似肾型传染性支气管炎病鸡,进行了病毒分离和鉴定。结果分离到4株IBV(定名为YL-04、BJ-04、FF-04、YX-04),并对分离病毒进行了血凝性、血凝抑制性、致病性、鸡胚矮小化等生物学特性鉴定。结果发现,分离的4株病毒经1%胰酶处理后的各代病毒尿囊收集液均可凝集鸡红细胞;IBV标准阳性血清可特异性的抑制其凝集性;回归试验可复制出与自然发病相同的病例;病毒传代物有明显的致鸡胚矮小化作用。以上研究结果表明,我们分离到的是鸡传染性支气管炎病毒,临床表现为致肾脏病变的组织嗜性,证明以上地区鸡群发病与肾型传染性支气管炎病毒感染有关。

山东省肾型传染性支气管炎病毒地方株的生物学特性鉴定

禽传染性支气管炎病毒（Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｔｉｓｖｉｒｕｓ，ＩＢＶ）是冠状病毒科冠状病毒属的标准种，可引起鸡的传染性支气管炎（ＩＢ）。ＩＢ最早（１９３１）在美国发现，之后在世界各地均有此病的报道。传染性支气管炎有多种疾病类型，其中肾型传染...

江西地方株猪圆环病毒感染的检测

对江西25个猪场有明显PMWS症状猪采集的病料,用PCR-RFLP(限制性片段长度多态性)技术检测猪圆环病毒1型、2型(PCV1、PCV2)。结果PCV2的阳性率为45％,PCV1的阳性率为40％,其中有3例仅为PCV2阳性,有1例仅为PCV1阳性,推测江西不仅存在PCV的感染,且感染率也较高。

巨型艾美耳球虫地方株的分离与鉴定

本文报道对巨型艾美耳球虫长春株的分离鉴定。主要鉴定指标如下:虫体寄生于小肠中段的空肠与回肠,配子体寄生于上皮下。病理变化主要表现为肠管充血、黄染、臌气,粘液性稀便以及肠粘膜针尖大小出血点。卵囊大小为31.5±0.26×23.1±0.15微米。最大裂殖体为9.2微米,潜隐期126±0.15小时,卵囊最短孢子发育时间为28小时。

早熟艾美耳球虫地方株的分离与鉴定

本文报道对早熟艾美耳球虫长春株(Eimeria praecox C.1994年分离)的分离鉴定。主要鉴定指标:虫体主要寄生于十二指肠上皮层,病理变化轻微,大剂量感染时表现为肠管充血、粘液性管型与肠粘膜针尖大小出血点。卵囊大小为19.4±0.18×16.0±0.15微米。最大裂殖体为19.8微米,潜隐期89±0.13小时,卵囊最短孢子发育时间为20小时。

扬州地方株HPV16 E7基因的克隆及序列分析

目的了解扬州地区HPV16E7基因结构特点。方法从感染HPV16的宫颈癌组织中提取DNA,用PCR技术获得HPV16E7基因,以pGEM-Teasy为克隆载体构建重组质粒pGEM-T-E7,进行限制性核酸内切酶及核苷酸序列分析。结果扬州地方株HPV16E7基因与已报道的标准株(德国)仅在核苷酸序列上有一处突变,即199位的T→C,密码子由TTG变为CTG,而氨基酸序列未发生改变;与其他国家报道的HPV16E7核苷酸序列也存在一定差异,但同源性均在98.7%以上。结论扬州地方株HPV16E7基因的成功克隆,将丰富我国HPV16感染的流行病学资料,为HPV疫苗研制奠定基础。

河南省牛病毒性腹泻病毒地方株的分离及鉴定

从河南省不同地区规模化肉牛场牛病毒性腹泻(BVD)疑似病例中采集病料,将处理好的6份病料接种MDBK细胞,并盲传4代,得到了两株可产生细胞病变的病毒,经测定该两株病毒的TCID50分别为10-6.59/0.1ml和10-6.51/0.1ml;琼脂扩散试验表明该两株病毒均能与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)OregonC24标准阳性血清反应,出现沉淀线,且均能被BVDV标准阳性血清中和;电镜观察到圆形、有囊膜、直径为40～60nm、囊膜表面有突起的病毒粒子,与BVDV颗粒基本一致。动物回归试验表明,用两株分离毒攻毒的2头3月龄犊牛均出现了和BVD自然病例相似的临床症状,并检测其抗原和抗体,结果均为阳性,从而确定分离的两株病毒均为BVDV,分别将其命名为HN-1和HN-2株。

鸡肾型传染性支气管炎山西地方株的分离和初步鉴定

从山西省主要养鸡区分离疑患鸡肾型传支病鸡的气管、肾共３９份，经ＳＰＦ鸡胚传代、电镜观察、对ＮＤＶ的干扰试验，乙醚敏感性、耐热性试验以及动物回归试验，初步鉴定出１０株为鸡肾型传染性支气管炎毒株。

鸡肾型传染性支气管炎山西地方株的生物学特性研究

通过SPF鸡胚接种、盲目传代的方法从山西省 15个养鸡集中区采集有典型肾炎病变的病鸡气管、肾脏病料 ,分离并鉴定出 9株鸡肾型传支野毒株。从分离株的致病性、细胞培养特性、血凝活性、理化特性、免疫原性、毒力测定、遗传性能等方面对 9株分离毒的生物学特性作了详细的系统分析。结果表明 :9株分离毒均可致死非免疫鸡 ,表现出鸡肾型传支特征性病理变化 ;细胞培养可引起鸡胚肾细胞融合 ;各分离毒均无直接血凝活性 ,经浓缩后加入等量家兔A型魏氏梭菌培养液 4℃ 2 4h后可凝集鸡红细胞 ;对常规 12种理化因素的敏感性亦表现出IBV特性。分别以此 9株病毒灭活抗原 ,常规方法制备油佐剂灭活疫苗 ,可有效保护免疫鸡不受肾型传支病毒感染。

人A组轮状病毒地方株外壳蛋白VP4的原核表达

目的 :制备轮状病毒外壳蛋白VP4。方法 :从病人粪便中分离的毒株中提取病毒dsRNA为模板 ,经RT -PCR获得编码VP4截短蛋白基因片段cDNA(1- 12 5 3bp) ,将VP4基因片段克隆于pGEX - 4T - 2融合表达载体中 ,经dot印迹筛出阳性重组子 ,重组质粒转化大肠杆菌BL2 1(DE3)。工程菌经IPTG诱导 ,11%聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果 :Western印迹分析表明 ,工程菌能正确表达VP4蛋白片段 ,且具有良好的抗原性。结论 :为研制轮状病毒重组疫苗、亚单组疫苗、转基因植物口服疫苗做了前期准备。

小鹅瘟病毒地方株的分离与鉴定

对安徽省六安地区疑似小鹅瘟病死雏鹅进行剖检,对具有典型症状和病变的病死雏鹅脏器进行病毒的分离培养。用接种鹅胚的病毒增殖法,从病死雏鹅的脏器中分离到一株病毒。通过鹅胚致病性试验、鹅胚中和试验、雏鹅感染试验和琼脂扩散试验,初步鉴定所分离的毒株为小鹅瘟病毒,且该病毒具有较强的致病性。