鸡传染性支气管炎地方毒株血清型的研究

应用系统血凝抑制试验 (HI)确定了 4株鸡传染性支气管炎病毒地方毒株 (Fu、X、W、H )与 3个标准株 (M4 1、Gray、T)间的抗原相关性 ,并对分型结果以雏鸡免疫交叉保护试验进行了验证。结果表明 ,Fu、X株与T株的抗原性接近 ,W、H株与M4

利用鸡传染性法氏囊病地方毒株制备卵黄抗体

如今,鸡传染性法氏囊病(IBD)在许多鸡场都普遍存在。该病是由传染性法氏囊病毒(IBDV)引起,临床表现为病鸡精神沉郁,羽毛松乱,不好走动,拥挤成堆,排白色稀粪,肛门周围绒毛常有白色粪污,病鸡喜欢啄肛。剖检可见腿肌、胸肌有出血点,法氏囊高度水肿,明显肿大,浆膜面覆盖一层黄色胶状物。切开法氏囊可见充血或出血,内有较多的浆液、粘液或干酪状物。感染后期的病、死鸡,法氏囊则明显萎缩。腺胃、肌胃交界处有出血点。肾肿大,

我国鸡传染性支气管炎病毒地方分离株S1基因的分离及初步鉴定

根据IBVBeaudette株全基因组序列 ,借助基因分析软件自行设计合成了 3条引物 (you1+、you2 -、youM +) ,引物you1+和you2 -在S1基因两侧 ,跨幅为 16 11bp ,引物you2 -和youM +在S1基因的 3’端 ,跨幅为 5 35bp 用引物you1+和you2 -对 5个IBV地方分离株 (HN2、HN4、JX1、SC2和SC4)进行RT PCR ,均成功地扩增出预期大小的目的片段 用另 1对引物 (you2 -和youM +)对各毒株的RT PCR产物再进行PCR扩增 ,均得到一条约 5 30bp的目的片段 ;对RT PCR产物用限制性内切酶PstⅠ进行酶切分析 ,结果酶切产物中得到 2条条带 ,大小分别为 5 6 0和 10 5 0bp ,与GeneBank中 11株已发表的S1基因分析结果一致 初步鉴定结果显示 ,已经成功分离得到了IBV S1基因 .

华南地区三株新城疫地方强毒株的序列测定及其系统发育分析

用设计的特异性引物,通过一步法RT-PCR扩增出5个毒株的897bp片段,对其中的3株病毒cDNA分析表明:各毒株的半胱胺酸位点和个数及糖基化位点基本没有改变。各毒株在抗原决定簇氨基酸位点HN基因346～353处的碱基突变甚多,且氨基酸也出现了部分的突变。针对HN基因897bp片段构建了相应的系统发育树,系统发育分析表明:中国(华南)地区NDV各毒株与欧美国家的Ⅱ至Ⅴ基因群明显分离,遗传规律较远;NDV WS1和NDV HY与台湾省NDV各毒株归属为一组,与中国毒株的遗传距离较近,均属新近出现的基因型Ⅶ型,NDⅦ型在远东和西欧(Ⅶb)和及中东和南非(Ⅶa)广泛存在,可能形成了ND的第4次大流行。这些一方面说明NDV的变异可能已突破种源屏障,在鸡与鹅之间进行相互传播;另一方面说明中国古老的NDV毒株仍然持续存在,并逐渐向强毒株突变,与其他新出现的基因型毒株"共循环"。

鸡传染性法氏囊病地方流行毒株的分离与制苗种毒的筛选

从河北省昌黎县不同鸡场发生的法氏囊病鸡群中，分离到ＪＤ１，ＪＤ２，ＪＤ３，ＪＤ４，ＪＤ５共５株ＩＢＤ病毒毒株，通过初步分离与试验，并对其作了致病性、鸡胚适应性和免疫保护性等项试验。结果表明：所分离的５株均为ＩＢＤＶ，且可使易感鸡１００％发病，致死率在０～４０％。其中ＪＤ２和ＪＤ５可以在鸡胚中稳定增殖并使鸡胚规律性死亡。尽管通过鸡胚驯化，使分离的ＩＢ－ＤＶ毒力有所下降，但其灭活后免疫鸡，仍可使鸡对ＩＢＤ流行毒株的攻击达到８５％的保护率。ＪＤ２可作为ＩＢＤ囊组织抗原的种毒，也可作为ＩＢＤ鸡胚抗原的种毒。

IBDV地方野毒株不同毒源二价灭活油乳苗免疫效果的比较研究

对利用IBDV地方野毒株所制备的囊毒和胚毒二价灭活油乳苗免疫效果进行了比较研究。结果表明,所制备的囊毒灭活苗免疫效果显著优于胚毒灭活苗和活疫苗,在接种后各个时期所产生的抗体效价均显著高于其它两种疫苗(P<0.01),最高AGP效价可达4.8log2;胚苗的免疫效果虽然差于囊苗,但明显优于活疫苗,当活苗免疫组鸡血清中已无可测性抗体时,胚苗组仍具有1.0log2的AGP效价。在攻毒试验中,囊苗组鸡对IBDV标准毒、两株野毒株的攻击均100%地获得了保护;胚苗组也均可获得80%的保护,这两种由地方毒株所制备的疫苗均未呈现出对不同毒株抵抗性的不同,而活苗组对不同毒株的攻击则分别只有53.3%、40%和46.7%的保护率,呈现出一定的差异性。

鸡肾型传染性支气管炎地方株分离鉴定

自黑龙江省牡丹江、密山两地自然发病鸡场分离到 2株病毒。经鸡胚连续盲传至第 5代时出现胚体蜷缩成团状、暗淡无光 ,头、翅、肢有出血点。经理化测定试验、气管环感染试验、回归试验等检测 ,鉴定分离的 2株病毒为鸡肾型传染性支气管炎病毒株 ,暂定名为MK、M2 。

鸡新城疫病毒地方野毒株的分离鉴定与致病性试验

从某一疑似新城疫病例的蛋鸡群中分离到一株病毒,经HA和HI试验、血清中和试验和动物回归试验,最终确认所分离毒株为新城疫病毒。经对分离株的MDT、ICPI和IVPI等致病指数的测定,表明该毒株为新城疫强毒株。

云南地方株PRRSV感染对猪细胞因子表达的影响

为了探究云南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)毒株对猪部分细胞因子的影响,试验用Marc-145细胞培养云南地方株YN-2011PRRSV毒株,攻毒组仔猪通过口服和腹腔注射方式感染毒株,对照组仔猪以相同方式用生理盐水进行处理,观察仔猪体温、临床状态,分别在感染后第3,7,14,20,30天采集仔猪血清,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中PRRSV抗体、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素-α(IFN-α)的水平,荧光定量PCR检测血清中PRRSV的病毒载量。结果表明:攻毒组仔猪出现精神沉郁、腹泻、耳朵发红、皮肤发绀等猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)临床症状;血清中PRRSV抗体水平在感染后第20天极显著上升且达到抗体阳性临界值(P<0. 01);TNF-α水平在感染后第3,7,14,20,30天高于对照组,除第14天外均差异极显著(P<0. 01);IL-1β及IFN-α水平在各时间点均高于对照组且差异极显著(P <0. 01),二者在感染后第7天达到最高水平;在感染后第7天攻毒组仔猪出现病毒血症,第14天病毒血症消失。说明云南地方株PRRSV YN-2011对仔猪有致病力,使仔猪PRRSV抗体及细胞因子TNF-α、IL-1β、IFN-α水平均明显上调。

我国部分地区新城疫病毒分子流行病学研究

将来自江苏、浙江、上海、福建、江西和新疆 6省 (市、自治区 )的 10株新城疫病毒 (NDV)分离株经克隆纯化 ,用反转录PCR扩增其F基因 9× 10 2 bp片段 ,测定序列 ,通过与国内外已发表的NDVF基因部分序列进行比较 ,测定的 10个分离株分别属于Ⅲ、Ⅵ、Ⅶ 3个基因型。其中近年流行的基因Ⅲ型病毒与同属于该型的经典强毒F48E8的同源性较低 ,约为 92 % ;明显小于近年流行的基因Ⅲ型毒株之间的同源性 (>99% ) ;近年分离的NDVⅥ型毒株之间的同源性和Ⅶ型NDV毒株之间的同源性为 92 %— 96 %。从各毒株的分离时间来看 ,新基因型NDV毒株不断出现 ,而原有的NDV强毒也能分离到。

5株猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7全长基因的克隆及序列分析

目的通过测定5株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ORF7基因序列,结合GenBank登录的国内外PRRSV分离株核苷酸序列,分析PRRSV核衣壳蛋白（N蛋白）的遗传变异情况。方法根据GenBank公布的PRRSV ATCCVR-2332株全基因组核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,用RT-PCR方法扩增出3株PRRSV甘肃流行株（命名为GSZY、GSBY、GSZY株）、1株陕西流行株（命名为Shanxi株）和1株PRRSV江西分离株（命名为Jingxi株）的ORF7全长基因,克隆到pGEM-T Easy载体,然后分别测定插入的核苷酸序列。应用DNAStar序列分析软件对所测ORF7基因核苷酸序列及其推导的氨基酸序列与不同来源的13个PRRSV毒株进行同源性比较。结果5株PRRSV ORF7基因与以ATCC VR-2332为代表的早期引发PRRS的美洲型毒株的核苷酸序列间的同源性为91.9%～94.3%,与国内其他PRRSV分离株的同源性为98.7%～99.7%,与欧洲型代表株LV的同源性为57.7%～58.2%。结论美洲型PRRSV N蛋白氨基酸发生了变异,但国内毒株相对保守。