鸡传染性支气管炎病毒中国地方流行株的分离与鉴定

对海南省和广西省的几个发生呼吸罗音、鸡群全群发病、死亡率不高的疑是鸡传染性支气管炎病 (IB)的鸡群 ,进行了病毒分离和鉴定。结果分离到了 4株IBV分离株 (HaN 1/95、HaN 2 /95、GX 1/98、GX 2 /98) ,并对分离病毒进行了病毒的致病性、病理组织切片、鸡胚矮小化、对NDV的干扰、电镜特征等生物特性鉴定及IBV基因组特异性 3’末端非编码区的一段保守序列的RT PCR和巢氏PCR鉴定。结果表明 4株IBV分离株 ,均能产生呼吸困难、罗音等临床症状 ;病理组织切片 ,气管、肾脏等组织表现为上皮细胞受损、固有层充血、出血和淋巴细胞的浸润及组织坏死 ;对NDV B1株有明显的干扰作用 ;其各自的传代物都有明显的致鸡胚矮小化作用 ;在透射电镜下观察到典型的冠状病毒粒子 ,多数近似为圆形 ,直径 75～ 2 0 0nm ,有囊膜 ,表面有一圈杆状纤突排列成花冠状 ,符合IBV的典型特征 ;基因组 3’末端UTR的RT PCR和巢氏PCR鉴定 ,4个分离株分别都扩增到 2 93bp和 172bp的特异目的片段 ,通过测序比较毒株间的核苷酸序列同源性在 99%以上 ,与GeneBank中IBVH5 2等标准株的 3’末端UTR的核苷酸序列高度同源。以上结果表明 4株分离病毒都是IBV ,为下一步的IBV分子流行病学的研究打下了基础。

猪瘟病毒广西地方流行株GX-3/98的致病性及其与兔化弱毒株的免疫相关性

从广西南宁某猪场分离1株病毒(GX-3/98),通过RT-PCR扩增出猪瘟病毒约250 bp的E2基因主要抗原编码区,与猪瘟石门系强毒株及兔化弱毒株核苷酸序列同源性分别为80.6%和81.1%,属于基因Ⅱ群,subgroup 2.1亚型。该毒株经本动物传3代,均不表现典型的猪瘟临床症状。用猪瘟兔化弱毒疫苗免疫后,以此分离病毒攻毒,进行免疫保护相关试验,结果免疫组100%(2/2)获得保护,且在攻毒前、后扁桃体HCFA检测均为阴性。对照组(非免疫猪)攻毒后50%(1/2)死亡,另1头猪耐过。扁桃体HCFA检测,于攻毒后1周开始出现阳性结果,且一直持续到猪死亡的第79天。本试验结果初步表明,我国现行使用的猪瘟兔化弱毒苗对目前猪瘟病毒流行毒株仍具有良好的保护力。GX-3/98流行株为1株毒力较低的猪瘟病毒,能够长时间散毒。

鸡传染性法氏囊病地方流行毒株的分离与制苗种毒的筛选

从河北省昌黎县不同鸡场发生的法氏囊病鸡群中，分离到ＪＤ１，ＪＤ２，ＪＤ３，ＪＤ４，ＪＤ５共５株ＩＢＤ病毒毒株，通过初步分离与试验，并对其作了致病性、鸡胚适应性和免疫保护性等项试验。结果表明：所分离的５株均为ＩＢＤＶ，且可使易感鸡１００％发病，致死率在０～４０％。其中ＪＤ２和ＪＤ５可以在鸡胚中稳定增殖并使鸡胚规律性死亡。尽管通过鸡胚驯化，使分离的ＩＢ－ＤＶ毒力有所下降，但其灭活后免疫鸡，仍可使鸡对ＩＢＤ流行毒株的攻击达到８５％的保护率。ＪＤ２可作为ＩＢＤ囊组织抗原的种毒，也可作为ＩＢＤ鸡胚抗原的种毒。