地榆黄酮提取纯化及抗肝肿瘤活性研究

目的优化地榆黄酮提取纯化工艺,并基于微流控芯片技术,验证地榆黄酮抗肝肿瘤活性。方法在单因素考察的基础上,采用正交试验设计,选取乙醇浓度、提取时间、溶剂用量及提取次数为考察因素,以黄酮含量和出膏率进行综合评分,优化提取工艺;通过静、动态吸附与解吸实验,以黄酮纯度为指标,优化纯化工艺;采用微流控芯片技术,Hoechst 33342/碘化丙啶(PI)双染法检测地榆黄酮对人肝癌细胞HepG_(2)凋亡坏死率的影响。结果最佳提取纯化工艺为15倍量70%乙醇,回流提取3次,每次提取1.5 h,合并滤液浓缩,以HPD-300大孔吸附树脂吸附,上样浓度为0.1 g·mL^(-1),上样量为1∶5(生药量/树脂体积),5BV 70%乙醇洗脱,收集洗脱液,浓缩,干燥。经2次纯化后地榆黄酮纯度为88.60%,收率为80.76%。地榆黄酮对人肝癌HepG_(2)细胞均具有一定促凋亡作用,不同产地地榆黄酮凋亡坏死率15.89%~26.38%。结论研究优选的提取纯化工艺简单、可行,地榆黄酮纯度及收率较高,促肝肿瘤细胞凋亡活性较强,适合于工业化生产,为地榆黄酮开发成抗肝肿瘤化合物及辅助治疗药物提供实验基础。