贯叶金丝桃(Hypericum perforatum)种子灌浆与发芽特性研究

贯叶金丝桃(Hypericum perforatum)是抗抑郁中药的基原植物,以有性繁殖为主,种子微小。为了揭示贯叶金丝桃种子发育规律,明确种子适宜采收期,以甘肃礼县栽培的2年生贯叶金丝桃为研究对象,于开花后第5天开始,每隔3 d测定种子粒重变化动态,并拟合Logistic曲线方程,最后测定各时期采收种子的发芽指标。结果表明:贯叶金丝桃种子灌浆持续期44 d,籽粒干质量变化符合Logistic生长曲线:开花后第5~11天为渐增期,第11~32天为快增期,第32~44天进入稳增期后略有下降。在灌浆过程中,种子鲜质量呈先升高后下降的动态变化趋势,在花后第32天达到最大值0.2697 g;灌浆速率和脱水速率呈波动趋势,种子干质量与平均灌浆速率、灌浆持续期呈极显著正相关,与含水量呈极显著负相关。种子发芽率和发芽指数在开花后44天达到最大,发芽势在开花后41天达到最大,发芽率、发芽势和发芽指数均与灌浆持续期呈极显著正相关,与含水量呈极显著负相关。以上说明甘肃礼县贯叶金丝桃繁种时以开花后44天左右(8月9日前后)为种子采收适宜期,过早采收和延迟采收均影响种子发芽质量。

地耳草对构建肝癌大鼠进程及肝内NK细胞的影响

本研究旨在构建肝癌大鼠模型后予地耳草干预,探讨能否干预肝癌的发展进程,并探讨其对肝内NK细胞的影响。方法 48只SPF级大鼠被随机分为三组:地耳草组、模型组和对照组,每组16只。地耳草组和模型组的饮用水中含有0.01%的DEN,而对照组则饮用纯净水。地耳草组每天灌胃0.15g/ml、0.5ml/100g的地尔草颗粒溶液,模型组和对照组则给予等剂量的生理盐水灌胃,灌胃频率为每日一次,持续16周。实验过程中,我们记录了大鼠的基本状况,并分别用苏木精-伊红染色法(HE染色)检验组织病理变化和免疫组织化学染色法检测肝脏组织中NK细胞的表达。结果 对照组大鼠的肝脏病理变化过程不明显;模型组大鼠在第2周进入肝炎期,第8周进入肝硬化期,第14周成功诱导出肝癌;而地耳草组大鼠在第4周进入肝炎期,第12周进入肝硬化期,第16周进入癌前病变期。在前10周,地耳草组大鼠肝内NK细胞数逐步上升,处于较高水平,且4周龄、6周龄、8周龄的大鼠肝内NK细胞数与对照组的肝内NK细胞数均有统计学差异(p<0.05)。结论 地耳草能延缓“肝炎-肝硬化-肝癌”的演变进程,地耳草能减轻肝脏炎症反应,减缓肝纤维化及肝癌的进程,地耳草可能通过促使肝内NK细胞募集来减缓肝炎至肝硬化再至肝癌的进程。

In Vitro and in Silico Insights on the Biological Activities, Phenolic Compounds Composition of Hypericum perforatum L. Hairy Root Cultures

Three Hypericum perforatum hairy root lines(HR B,HR F and HR H)along with non-transformed roots were analyzed for phenolic compounds composition and in vitro enzyme inhibitory properties.In silico molecular modeling was performed to predict the interactions of the most representative phenolic compounds in HR clones with enzymes related to depression,neurodegeneration and diabetes.Chromatographic analyses revealed that HR clones represent an efficient source of quinic acid and hydroxybenzoic acids,epicatechin and procyanidin derivatives,quercetin and kaempferol glycosides,as well numerous xanthones.In vitro antidepressant activity of HR extracts through monoamine oxidase A(MAO-A)inhibition was attributed to the production of oxygenated and prenylated xanthones.The neuroprotective potential of HR extracts was related to the accumulation of quercetin 6-C-glucoside,epicatechin,procyanidins andγ-mangostin isomers as potential inhibitors of acetylcholinesterase(AChE)and butyrylcholinesterase(BChE).Vanillic acid and prenylated xanthones in HR clones as promising inhibitors of tyrosinase additionally contributed to the neuroprotective activity.Five preeminent xanthones in HR(γ-mangostin,mangiferin,garcinone C,garcinone E and 1,3,7-trihydroxy-6-metoxy-8-prenyl xanthone)along with the flavonol quercetin 6-C-glucoside effectively inhibitedα-amylase andα-glucosidase indicating the antidiabetic properties of HR extracts.Transgenic roots of H.perforatum can be exploited for the preparation of novel phytoproducts with multi-biological activities.

地耳草及其混伪品的鉴定研究

目的:建立地耳草与混伪品细叶金丝桃的鉴定方法。方法:用传统鉴定方法及现代鉴定技术,对地耳草与细叶金丝桃进行鉴定。结果:地耳草与细叶金丝桃的药材性状、显微特征、薄层色谱、紫外光谱及HPLC指纹图谱具有一定差异。结论:本研究结果可以作为地耳草药材品质鉴定依据。

ICP-MS法同时测定地耳草药材中21种无机元素的含量

目的:建立同时测定地耳草药材中21种无机元素含量的方法。方法:采用电感耦合等离子体质谱法。功率为1 300 W,冷却气流量为1.5 L/min,载气流速为0.8 L/min,辅助气流量为0.2 L/min,积分时间为10 s,延迟时间为1 s,重复1次,测量方式为标准曲线法。采用SPSS 16.0统计软件对数据进行主成分分析和相关性分析。结果:铁、镁、钙、铝、钾、钠、锌、钴、镍、钡、锰、磷、硒、钛、锶、铜、砷、镉、铬、铅、汞检测质量浓度线性范围分别为50~250μg/mL(r=0.997 2)、25~100μg/mL(r=0.998 9)、25~100μg/mL(r=0.997 7)、2.5~15μg/mL(r=0.999 6)、25~150μg/mL(r=0.999 1)、2.5~15μg/mL(r=0.999 9)、2.5~10μg/mL(r=0.999 9)、2.5~10μg/mL(r=0.999 9)、2.5~10μg/mL(r=0.999 9)、2.5~10μg/mL(r=0.999 9)、2.5~10μg/mL(r=0.999 8)、2.5~10μg/mL(r=0.999 6)、0.5~2μg/mL(r=0.999 5)、2.5~10μg/mL(r=0.999 9)、0.5~2μg/mL(r=0.998 3)、2.5~10μg/mL(r=0.999 7)、2.5~10μg/mL(r=0.999 9)、2.5~10μg/mL(r=0.999 9)、2.5~10μg/mL(r=0.999 9)、0.05~0.2μg/mL(r=0.999 2)、0.05~0.2μg/mL(r=0.999 7);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<5.0%;加样回收率为93.9%~106.9%(RSD为0.22%~2.94%,n均为6)。钾、镁、磷、钙、铝为药材样品中主要的无机元素成分;21种元素中部分元素间有一定的相关性。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于地耳草药材中21种无机元素含量的同时测定。

地耳草挥发性成分HSGC/MS分析及其动态研究

探讨地耳草挥发性成分的动态积累,为确定地耳草的最佳采收期提供依据。采用HSGC/MS法分析不同采收时间地耳草挥发性成分,并用峰面积归一化法确定各成分的相对百分含量,以其中6种主要活性成分为指标,考察它们的动态变化。初步分离鉴定出48种成分,其中共有成分22种,不同生长期地耳草挥发性成分积累具有一定规律。地耳草挥发性成分积累曲线最大峰值与传统采收期基本一致。

贯叶金丝桃二氯甲烷部位的化学成分研究

目的研究贯叶金丝桃Hypericum perforatum L.二氯甲烷部位的化学成分。方法贯叶金丝桃二氯甲烷部位采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20、半制备HPLC等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到11个化合物,分别鉴定为贯叶金丝桃降碳聚酮A(1)、α-芒柄花醇(2)、(3 R)-thunberginol(3)、2-geranyloxy-1-(2-methylpropanoyl)-phloroglucinol(4)、4,6-dihydroxy-2-O-(3″,7″-dimethyl-2″,6″-octadienyl)-1-(2′-methylbutanoyl)benzene(5)、norhyperpalum G(6)、garsubellin A(7)、garsubellin B(8)、(2″R/S)-kellerine C(9)、kobusone(10)、圣草酚(11)。结论化合物1为新化合物,化合物2~3为首次在藤黄科植物中分离得到,化合物4~10为首次从该植物中分离得到。

地耳草挥发性成分的HSGC-MS分析

目的:分析地耳草中挥发性成分。方法:用HSGC-MS技术分离和鉴定地耳草中挥发性成分,并用峰面积归一化法测定各成分的质量分数。结果:初步鉴定出54种化合物,不同产地地耳草中挥发性成分有一定差异。结论:为地耳草药材的质量评价提供提供资料。

地耳草黄酮类成分分析及其动态研究

目的 探讨地耳草黄酮类成分的动态积累,为确定地耳草的最佳采收期提供依据。方法 以芦丁、异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素和山柰酚为指标成分,采用高效液相色谱法考察它们的动态变化。结果 不同生长期地耳草中黄酮类成分积累具有一定规律。结论 地耳草黄酮类成分积累曲线最大峰值与传统采收期基本一致。

地耳草(田基黄)注射液对四氯化碳引起小鼠肝损伤的保护作用

地耳草（Hyperieum japonicum Thunb.）又名田基黄（下称田基黄）,为金丝桃科金丝桃属植物。药用垒草。属传统的清热利湿,消肿解毒药。临床应用田基黄注射液和煎剂治疗急、慢性肝炎已取得了较好的疗效。但对田基黄治疗肝炎的药理实验性研究尚未见报道。本文研究了田基黄注射液对小鼠CCl4所致实验性肝损伤的保护作用。一、实验材料 （一）药物:田基黄注射液（简称田基黄）,常熟制药厂生产,四氯化碳（CCl4）,上海长江化工厂。 （二）动物:健康昆明种雄性小鼠,体重18～22g,由中国医学科学院武汉分院动物室供应。

地耳草对迟发型超敏反应的影响

地耳草又名田基黄,为藤黄科植物地耳草的全草,其提取物田基黄甲素在试管内对牛型结核杆菌、肺炎球菌等有不同程度的抑菌和杀菌作用,临床主要用于治疗急慢性传染性肝炎及伤寒、副伤寒。本文报道地耳草水提物对迟发型超敏反应的影响,并对其作用机制进行了初步探讨。1

地耳草HSGC-MS指纹图谱的研究

目的建立地耳草挥发性成分HSGC-MS指纹图谱分析方法,为地耳草质量评价提供依据。方法用HSGC-MS联用技术对地耳草的挥发性成分进行分析,建立其指纹图谱,确定共有指纹峰,并作模糊聚类法分析和相似度评价。结果地耳草挥发性成分中含有12个特征性指标成分,初步建立了以此12量评价的依据。

地耳草石油醚部位化学成分研究

目的:对地耳草石油醚部位进行化学成分研究。方法:地耳草用乙醇冷浸提取,得到粗提物,将其用石油醚萃取后采用各种层析技术进行分离纯化,并对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果:分离得到8个单体化合物,分别为(1)2-acetyl-3,5-di-hydroxy-1-geranoxy-6-methyl-4-(2-methyl)butyryl-ben-zene,(2)Empetrikarinol A,(3)2-acetyl-3,5-dihydroxy-1-geranoxy-6-methyl-4-(2-methyl)butyryl-benzene,(4)1-(2,4,6-Thihydroxyphenyl)Butan-1-one,(5)1-(2,4,6-Thihydroxy phenyl-3-methyl)Butan-1-one,对羟基苯丙酸甲酯,O-methoxy cinnamaldehyde,对甲氧基苯甲酸。结论:化合物1-5为间苯三酚类化合物,化合物2,4,5,6,7首次从地耳草中分离得到。

贯叶金丝桃化学成分的分离与鉴定

目的研究藤黄科(Guttiferae)金丝桃属(Hypericum)贯叶金丝桃(Hypericum perforatum L.)的化学成分。方法采用正相硅胶色谱、反相ODS色谱、凝胶色谱及高效液相色谱等多种色谱方法对贯叶金丝桃体积分数95%乙醇提取物进行分离纯化。利用紫外、红外、核磁共振光谱,高分辨质谱及X-ray单晶衍射法对化合物的结构进行鉴定。结果从贯叶金丝桃中分离鉴定8个化合物,分别为perforxanthone A(1)、8-hydroxy-1,2,3-trimethoxyxanthone(2)、绵马酚D(3)、(S)-5-hydroxy-3,4-dimethyl-5-pentylfuran-2(5H)-one(4)、ent-4(15)-eudesmene-1β,6α-diol(5)、methyl-(E)-8-oxooctadec-9-enoate(6)、模绕酮酸(7)、白桦脂酸(8)。结论化合物1为新的氧杂蒽酮类化合物,化合物2-7为首次从该植物中分离得到。

地耳草总黄酮对慢性肾衰竭大鼠肾纤维化相关因子的影响

目的:观察地耳草总黄酮对肾纤维化相关因子的影响,探究地耳草总黄酮治疗肾纤维化的作用及其机制。方法:采用5/6肾切除建立大鼠慢性肾衰竭(Chronic Renal Failure,CRF)模型,ELISA检测血清促纤维化细胞因子碱性成纤维细胞生长因子(Basic Fibroblast Growth Factor,bFGF),肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)及致炎因子白介素-2(Interleukin-2,IL-2);免疫组化检测肾脏组织胶原-Ⅰ(Collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ)。结果:地耳草总黄酮各剂量组IL-1显著高于模型对照组(P<0.01);地耳草总黄酮高、中剂量组IL-2显著低于模型对照组(P<0.01);地耳草总黄酮各剂量组bFGF和TNF-α含量显著低于模型对照组(P<0.01);地耳草总黄酮高中剂量组Col-Ⅰ低于模型对照组(P<0.05)。结论:地耳草总黄酮通过抑制促纤维化相关因子bFGF和TNF-α和炎症细胞因子IL-2的分泌,降低Col-Ⅰ的表达,从而降低炎症反应,抑制系膜和基质的增生,改善肾小管病变,进而缓解肾纤维化。

地耳草的HPLC指纹谱鉴定研究

目的:建立地耳草HPLC指纹图谱鉴定方法。方法:用RP-HPLC法,梯度洗脱,测定地耳草及其混伪品细叶金丝桃的指纹图谱,并作相似度比较分析。结果:地耳草不同样品指纹图谱相似度较好,而地耳草与细叶金丝桃的指纹图谱具有一定差异。结论:HPLC指纹图谱具有重现性好、特征性强、方法简便等特点,可用于地耳草药材的鉴别。

贯叶金丝桃提取物对急性缺氧大鼠肝肾损伤的改善作用

【目的】研究贯叶金丝桃提取物(Hypericum perforatum extract,HPE)对急性缺氧大鼠肝肾损伤的改善作用。【方法】通过小鼠常压密闭实验模型初步筛选HPE(20%乙醇提取物、70%乙醇提取物和95%乙醇提取物)的抗缺氧活性组分。进一步建立大鼠低压低氧肝、肾损伤模型:将80只健康大鼠随机分为8组,分别为常氧空白组(NG),缺氧模型组(HG),HPE低、中、高剂量组(HPE-L、HPE-M、HPE-H,100、200、400 mg/kg),金丝桃苷低、高剂量组(HYP-L、HYP-H,50、100 mg/kg)和醋酸地塞米松组(DXM,4 mg/kg)。观察HPE对急性缺氧大鼠肝、肾组织病理学变化的影响,并测定其中氧化应激指标和相关炎症因子的变化。【结果】与模型组比较,给予HPE干预后的大鼠肝、肾组织中丙二醛(MDA)和过氧化氢(H_(2)O_(2))含量下降(P<0.01,P<0.05),谷胱甘肽(GSH)含量增加(P<0.01,P<0.05),总超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力有所提高(P<0.01,P<0.05)。同时,大鼠肝、肾组织中炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)的释放均被抑制(P<0.01,P<0.05)。【结论】HPE对急性缺氧大鼠肝、肾损伤具有一定程度的改善作用。

长柱金丝桃(Hypericum ascyron L.)分泌结构的研究

对长柱金丝桃各类器官进行了整体透明和解剖学研究,确定合理的采收部位和采摘时间。结果表明,植株富含分泌囊和分泌小管道两种分泌结构;叶片中分泌囊(道)的发育属于裂生型;地上部分泌结构分布较多,尤以叶片中数量最多、分布密度最大;确定植物的最佳采收时期是每年8～9月的花果期、最佳采收部位是地上部。此研究结果为此药用植物合理的采收部位和采收时间的确定提供解剖学依据,同时为其他植物分泌囊(道)发育规律的研究提供理论依据。