提取地衣真菌总DNA的简便方法

利用液氮破碎地衣体的上下表皮层及藻层，再用氯化苄在弱碱条件下破坏真菌细胞壁，从而获得地衣真菌总ＤＮＡ．此方法简便、省时、价廉，获得的总ＤＮＡ蛋白质污染少，产量高，可进一步进行ＰＣＲ扩增．

多功能地衣真菌的筛选及其复合菌剂的研制

为了从地衣真菌中筛选高效多功能菌种,研制出高效的微生物菌肥,对地衣真菌采用水解圈法初筛,再分别采用DNS法、钼锑抗比色法、平板对峙法复筛出具有高效降解纤维素、溶解无机磷、抑制病原菌活性的菌株;以不同的菌株组合研制生物菌剂,并进行盆栽试验筛选出促生活性最好的组合。从120株地衣真菌中筛选出高效降解的纤维素菌株为1905-2、1909-7、1913-6、1915-2,其中菌株1905-2和1915-2兼具有抑制病原菌的活性;高效溶磷菌株为1905-4,同时具有抑制病原菌的活性。结合形态学及分子序列鉴定菌株1905-2为高山弯颈霉(Tolypocladium tropicale),1905-4为塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis),1909-7为黄曲霉(Aspergillus aflatoxiformans),1913-6为产黄青霉(Penicillium chrysogenum),1915-2为淡紫拟青霉菌(Purpureocillium lilacinum)。组合5(1905-4、1915-2)在增加茎长和鲜重上占有优势,且溶磷效果及降解纤维素效果最好,因此综合选取以组合5研制的生物菌剂作为最终的微生物菌剂。从地衣真菌筛选出高效功能菌株,复合后研制出具有高效降解纤维素、溶解无机磷、抑制病原菌的复合菌剂,旨在为微生物资源的开发与利用、探究研制高产的生态菌肥提供理论基础。

大叶梅属地衣内生真菌的多样性及抗菌活性研究

运用组织分离法对采自江西井冈山及福建武夷山自然保护区的大叶梅属(Parmotrema)地衣进行内生真菌的分离、培养及纯化。利用形态学及分子生物学特征对其进行分类鉴定;用乙酸乙酯萃取菌株液体发酵物,旋蒸获得粗提物,并通过打孔法检测地衣内生真菌提取物对以下菌株——变形杆菌Proteus sp.MC110、表皮葡萄球菌Staphylococcus epidermidis TC149、大肠杆菌Escherichia coli ATCC25922、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CS136和白色念珠菌Candida albicans TC152的抑菌活性。结果显示,从4种大叶梅属地衣中分离获得75株内生真菌,ITS测序确定了29个种级分类单元,隶属于2门,4纲,7目,10科,14属。其中,橘色黒孢霉Nigrosporaaurantiaca抑菌效果良好,可作为药物研发的良好生物资源,具有潜在的开发价值。

中国柄座衣属地衣3个新记录种

为探讨中国柄座衣属地衣的物种多样性,进一步明确其物种组成和分布,该文通过野外地衣资源调查及标本采集,结合形态学、解剖学、化学等研究方法,对采自云南省的柄座衣属地衣标本进行分类,共鉴定出柄座衣属(Malmidea)3个中国新记录种,分别是巨孢柄座衣[M.indica(D. D. Awasthi&M. R. Agarwal) Hafellner&T. Sprib]、赭黄柄座衣(M.reunionis Kalb)、棕褐柄座衣(M.hechicerae Kalb)。该文提供了各新记录种的详细描述、形态及解剖图片,并与相近种进行了比较和讨论,同时提供了中国柄座衣属地衣分种检索表。该研究结果丰富了中国柄座衣属地衣资料,对中国地衣多样性的保护及研究具有一定意义。

黑蜈蚣叶属(蜈蚣衣科)地衣一新种

该文基于形态学、解剖学、化学及分子系统学的方法,对采自中国泰山的黑蜈蚣叶属地衣进行了分类学研究,发现了1新种,即泰山黑蜈蚣叶(Phaeophyscia taishanensis)。该新种的主要特征为地衣体上表面末端具稀疏的皮层毛;髓层白色;下表面黑色,裂片末端处呈灰白色或浅褐色;盘托上部偶有白色或浅色的皮层毛,常常稀疏可数;子囊孢子褐色,厚壁,Physcia型,孢子大小为(18.0~20.5)μm×(9.0~10.0)μm。该文还基于表型特征讨论了新种与相似种的异同,并基于分子数据以ITS序列构建最大似然系统发育树且进行了序列分析,同时提供了详细的形态学描述及特征图片。该新种的发现为蜈蚣衣科地衣生物多样性研究积累了基础资料。

中国盾衣属地衣两个新记录种

为探究盾衣属(Peltula Nyl.)地衣在宁夏贺兰山地区的物种多样性,该文通过形态学、解剖学和化学分析,并结合rDNA-ITS序列构建系统发育树,对采自宁夏贺兰山地区的盾衣属地衣标本进行了系统分类学研究。在宁夏贺兰山地区发现了盾衣属2个中国新记录种,即非洲盾衣[Peltula africana(Jatta) Swinscow&Krog]和印盾衣[P.impressa(Vain.) Swinscow&Krog]。非洲盾衣的主要识别特征为波状鳞叶,横径为0.3~3.0 mm,下皮层细胞栅栏状;印盾衣的主要识别特征为地衣体顶部具有黑色新型粉芽堆,子实层I+,酒红色,子囊孢子64个左右。此外,该文还对2个中国新记录种的形态和解剖特征进行了详细描述,与相似种进行了对比讨论,并提供了2个中国新记录种的形态解剖结构照片。该研究结果丰富了中国盾衣属地衣的基础资料。

贵州荔波小七孔景区文字衣科地衣初报

实地调查贵州荔波小七孔景区文字衣科(Graphidaceae)的地衣资源,探究其属种组成及物种多样性特征,补充该地区文字衣科地衣研究之空白数据。本文基于形态学、解剖学、化学、分子生物学和地理学等研究方法,对采自该地区的200余份文字衣科地衣标本进行研究,共鉴定出5属13种,其中包括贵州一新记录属及其新记录种,即板文衣属(Thecaria)及苦木板文衣(Thecaria quassiicola Fée)。研究发现文字衣属(Graphis)为该地区的优势属,其种数占该地区文字科地衣总数的46.15%。该研究补充了贵州荔波小七孔景区文字衣科地衣研究的空白,丰富了该地区菌物的物种多样性。

中国腹枝衣属地衣的3个新记录种

腹枝衣属(Herpothallon)分布在全球热带及亚热带地区,多生于潮湿、避光处。通过野外调查、采集,综合运用形态、解剖和化学等方法对该属地衣进行了分类学研究。发现中国新记录种3个,分别为灰色腹枝衣(H.cinereum G.Thor)、日本腹枝衣(H.japonicum(Zahlbr.)G.Thor)和昆士兰腹枝衣(H.queenslandicum(Elix)Elix)。描述了它们的分类学特征,提供了外部形态图,并编制了中国腹枝衣属地衣的分种检索表。

中国地衣3个新记录种

[目的]文章旨在探讨山东昆嵛山地衣的物种多样性,进一步明确其物种组成和分布。[方法]综合运用形态学、解剖学、化学成分分析和基于ITS序列的分子系统学分析等手段对采自该区域的地衣进行分类研究。[结果]发现3个中国新记录种,即哈氏癞屑衣(Lepraria harrisiana Lendemer)、尼氏绒枝(Leprocaulon nicholsiae Lendemer&E.Tripp)、鳞棕衣[Brownliella kobeana(Nyl.)S.Y.Kondr.,Kärnefelt,A.Thell,Elix,Jung Kim,A.S.Kondr.&Hur],该文对这3个中国新记录种进行详细描述,并提供了地衣体形态特征图片。研究标本保存于山东师范大学植物标本室(SDNU)。[结论]昆嵛山地衣物种丰富度较高。

地衣型真菌次级代谢产物抗菌活性初步研究

地衣是一种传统的民族药物,能产生多种具有活性的物质。该研究对地衣型真菌(Xanthoria elegans,Myelochroa indica,Ramalina peruviana,Cladonia macilenta,Nephromopsis pallescens,Cladonia coccifera)进行液体培养,2个月后,培养液用乙酸乙酯萃取后获得初提物。该研究采用抑菌圈法评价地衣型真菌初提物对7种致病细菌(Bacillus subtilis,Bacillus cereus,Vibrio parahaemolyticus,Straphylococcus haemolyticus,Pseudomonas aeruginosa,Staphylococcus aureus,Micrococcus luteus)的抗菌活性,并测定最低抑菌浓度(MIC)。结果表明:6种地衣型真菌的初提物均具有一定的抗菌活性,且不同培养基对地衣型真菌产生抗菌物质有显著影响。其中,R.peruviana在MY液体培养基中所产生的次级代谢产物对金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、溶血性葡萄球菌、铜尿假单胞菌具有抑制效果,但在YMG培养基中所得初提物对供试7种致病细菌不具有抑菌效果。X.elegans在YMG培养基中所得初提物对枯草芽孢杆菌具有明显抗菌活性,其抑菌圈直径可达17.77 mm。该研究证实不同地衣型真菌液体培养初提物具有抗菌活性,不同的培养基也直接影响地衣型真菌抗菌效果。该研究结果为地衣型真菌的进一步研究及民族药的开发利用奠定了基础。

地衣内生真菌及其活性次生代谢产物研究进展

地衣是一类由共生菌和共生藻共同构成的独特的生物有机复合体。地衣中往往存在不会引起其自身发病症状的非地衣型真菌即地衣内生真菌。本文综述了地衣内生真菌的研究概况;总结了地衣内生真菌的种类分布及多样性;并且全面的对地衣内生真菌次生代谢产物所具有的抗肿瘤、抗菌、抗病毒以及自由基清除等生物活性进行了归纳。地衣内生真菌的次生代谢产物具有广泛的应用价值,对新颖先导化合物的发现及新型药物的研发都具有重要的意义。

中国地衣分属检索表

二十世纪三十年代以来,中国学者逐渐开展地衣分类研究。近30年来,中国地衣分类研究得到快速发展,已报道的地衣属的数目由232个增至419个。但是,中国地衣分类研究基础薄弱,中文著作资料更显匮乏。迄今,中国地衣分属检索表尚未问世。根据已发表的地衣分类研究结论,并结合所研究相关标本,编制了中国地衣分属检索表(见附录),旨在填补该研究之空白,为中国地衣研究提供中文参考资料,以促进中国地衣学学科发展。

三株地卷地衣内生真菌的生防活性

检测地卷地衣内生真菌的生防活性。从湖北神农架地卷属地衣中分离获得3株对4种植物病原真菌和水霉病病原卵菌拮抗性好抑制率高的优势生防菌株,分别为Creosphaeria sassafras,Annulohypoxylon multiforme和Penicillium vulpinum;通过液体发酵液及拮抗试验检测了3株地衣内生真菌的生防潜力。结果显示其对病原菌的抑制作用优于常用的生防菌球毛壳菌,在与植物病原真菌的营养竞争过程中占有一定优势。地衣内生真菌可用于植物病害和水霉病的防治。

槟榔点衣,中国点衣属地衣一新记录种

通过对点衣属(Ocellularia)形态学、解剖学、化学与分子生物学等研究,报道了采自福建的点衣属地衣一个中国新记录种,即槟榔点衣Ocellularia arecae(Vain.)Hale。此外,提供了形态学、解剖学及化学特征。研究标本保藏于聊城大学生命科学学院菌物标本室(LCUF)。该研究结果丰富了中国疣孔衣科点衣属地衣的生物多样性。

变黄黑文衣,中国黑文衣属地衣一新记录种

通过对文字衣科黑文衣属形态学、解剖学、化学与分子生物学的研究,发现中国新记录种1种,即变黄黑文衣(Phaeographis flavescens Dal-Forno&Eliasaro),该种主要特征为地衣体壳状,表面浅黄绿色,无光泽,光滑;子囊盘弯曲,多分支,聚生于假子座中;盘缘黑色,相邻线盘之间有小缝隙,盘面较平坦,黑色,覆有白色粉霜;子囊层无色透明,侧丝顶端分支;子囊含8个子囊孢子;子囊孢子褐色,横隔透镜型,(4~)6胞室,大小19~25.5μm×6~7μm,I+紫红色。该种分布于云南和福建,该研究丰富了对中国黑文衣属物种组成与分布的认知。

中国腹枝衣属地衣的多样性与区系研究

为探讨中国腹枝衣属地衣的物种多样性,进一步明确其分布特征与种类组成,该研究通过野外调查及采集地衣标本,结合形态、解剖、化学等方法,对128份采自中国热带及亚热带地区多个省份的腹枝衣属(Herpothallon)地衣标本进行了分类鉴定,共鉴定出腹枝衣属地衣12种,其中南方腹枝衣[H.australasicum(Elix)Elix&G.Thor]、颗粒腹枝衣(H.granulosum Jagadeesh Ram&G.P.Sinha)、喜马拉雅腹枝衣(H.himalayanum Jagadeesh&G.P.Sinha)、裂芽腹枝衣(H.isidiatum Jagadeesh Ram&G.P.Sinha)和小腹枝衣(H.minutum Jagadeesh)为中国新记录种。并且,对该属所有已知(已报道和本次鉴定)种类进行了综合分析。结果表明:(1)中国已知腹枝衣属地衣14种,占世界已报道种类的29.17%。(2)地理成分有5种类型,即泛热带分布、热带亚洲至热带澳大利亚分布、热带亚洲和热带美洲间断分布、热带亚洲分布和中国特有分布。(3)中国腹枝衣属地衣主要分布在海拔300~2500 m的范围内。(4)生长基物多为树皮,叶生、石生和藓生的物种较少。该研究结果表明,中国南方腹枝衣属地衣的物种多样性较高,这对明确中国该属地衣物种组成以及地衣多样性保护具有重要意义。

中国地衣生真菌初步名录(英文)

该文是关于中国地衣生真菌汇编的首次报道,其中也包括新近采集的种类。名录中汇编了27种,其中9种为中国新记录种,包括5个中国新记录属的代表:Ampullifera, Intralichen, Marchandiomyces, Phaeosporobolus, 和Stigmidium。文中还包括一个新组合种:Stigmidium cupulare (syn, Pharcidia supularis)。

中国地茶属地衣的分类及地理分布研究

通过形态解剖、化学显色反应(CT)及薄层层析法(TLC)对中国地茶属地衣:地茶(Thamnolia vermicularis(Sw.)Ach.ex Schaer.)和雪地茶(Thamnolia subuliformis(Ehrh.)W.L.Culb.)及其种下变型进行了形态分类和特征化合物研究。结果显示,2个变形在形态上均与原变形之间无明显界限,存在过渡形态,并且化学成分也均与原变形一致,因此合并了2个种下变型。通过分析地茶属地衣的分类特征,对地茶属2个种的分类界限进行了重新界定,讨论了我国地茶属的地理分布。

中国地衣新记录属——裂衣属（英文）

报道了中国文字衣科地衣一新记录属——裂衣属(Chapsa A.Massal.)及其2新记录种,即印度裂衣(C.indica A.Massal.)和斑果裂衣[C.leprocarpa(Nyl.)A.Frisch],标本来自海南和广西。该属主要特征是:地衣体壳状、树皮生;具子囊盘类或色盘衣类的子囊果,固有果壳融合或不明显,具侧生侧丝;具横隔或砖壁型胞室的子囊孢子。

六株扁枝衣内生真菌的抗病原真菌活性

以采自大兴安岭的3份扁枝衣(Evernia mesomorpha)为试材,采用刮皮层法,分离获得6株内生真菌,通过菌落形态观察和ITS序列分析,并以5种病原真菌为拮抗指示菌,采用平板对峙培养法,研究了6株内生真菌的抗病原菌活性。结果表明:6株内生真菌全部属于子囊菌门(Ascomycota)粪壳菌纲(Sordariomycetes),其中菌株FF-3、FF-4为紫棕炭团菌(Hypoxylon fuscum),菌株FF-7为白色侧齿霉菌(Engyodontium album),菌株FF-2为炭团菌属(Hypoxylon sp.),菌株FF-6为炭角菌属(Xylariasp.),菌株FF-9为毛壳菌属(Chaetomiumsp.);菌株FF-2(Hypoxylon fuscum)和FF-6(Xylariasp.)均对多枝横梗霉(Lichtheimia ramosa)有抑制作用;菌株FF-6对黄瓜萎蔫病菌(Plectosphaerella cucumerina)有抑制作用。其中,FF-6抑制病原真菌的活性较好,形成明显的拮抗条带,最大宽度为7.00mm。菌株FF-2、FF-6有望成为植物病原真菌的候选生物防治菌。