地衣芽孢杆菌BL-5芽孢生成条件优化

地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)作为微生态制剂在食品或饲料工业中具有广泛的应用前景。通过温度对地衣芽孢杆菌BL-5致死率的影响研究得出无芽孢菌体的致死温度为75℃。以芽孢率和芽孢数为评价指标,得到地衣芽孢杆菌BL-5芽孢生成的最佳培养基配方为:蔗糖29.85 g/L、硫酸铵10.00 g/L、酵母膏3.00 g/L、磷酸氢二钾3.42 g/L、硫酸镁1.5 g/L、pH 8.0。最佳培养条件为:接种量5%、发酵时间48 h,发酵温度30℃、转速150 r/min。

地衣芽孢杆菌BL-5的发酵条件优化研究

对实验室已鉴定具有益生性能的地衣芽孢杆菌BL-5进行优化,先后进行单因素试验、Plackett-Burman设计和部分析因设计试验。其中单因素试验确定培养基碳源为蔗糖及氮源为硫酸铵和碳氮比为2∶1。对Plackett-Burman设计确定影响发酵的9个主要因素(硫酸镁、转速、酵母膏、发酵温度、p H、蔗糖、硫酸铵、磷酸氢二钾和装液量)再进行部分析因设计发酵条件优化,最终得到最佳的发酵条件为蔗糖29.85、硫酸铵10.00、磷酸氢二钾1.80和酵母膏3.00 g/L,p H 8,装液量30%,发酵温度30℃,转速150 r/min。

地衣芽孢杆菌 BL-5 产孢发酵条件优化

地衣芽孢杆菌作为一个益生菌在食品或饲料工业中都具有广泛的应用前景。本实验以芽孢数和芽孢率为指标,经Plackett-Burman设计实验、最陡爬坡实验和响应面实验,得到最佳发酵条件为:K^+浓度为0.002 mol/L、Mg^(2+)浓度为1 g/L、接种量5%、种子菌龄12 h,发酵温度30℃、发酵时间为36 h。对确定的最佳发酵条件进行验证实验,结果得到地衣芽孢杆菌BL-5的产芽孢率为94.67%,芽孢数为3.32×10~9CFU/mL。

能降解天然纤维素的地衣芽孢杆菌GXN151的分离鉴定及其一个纤维素酶基因(cel5A)的克隆和测序分析

从广西大学农场陈旧稻草堆中分离出1株具有降解天然纤维素稻草粉、甘蔗渣粉活性的细菌GXN151,经形态观察、16SrDNA序列分析和丙酸盐利用试验将其鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)。通过连接经BamHI酶切的pBluescriptKS(+)和回收得到的经Sau3AI部分酶切的GXN151的3～10kbDNA在大肠杆菌JM109中构建了该菌的含7099个克隆的基因文库,文库克隆中插入片段最大的为11.0kb,最小的为3.1kb,平均大小为4.6kb,含GXN151基因组中任一基因的概率P为99.6%。筛选该文库获得8个表达羧甲基纤维素酶活性的克隆,DNA测序和PCR分析表明,该8个克隆可归为3类不重叠的独立克隆,其中一个克隆pGXNL2的测序分析表明其上的cel5A基因为1626bp,可编码含542个氨基酸的羧甲基纤维素酶,Cel5A的N-末端的42个氨基酸具有信号肽特征,它的第66～321氨基酸为家族5糖基水解酶(glycosylhydrolase)功能域、第391～472氨基酸为家族3碳水化合物结合组件(carbohydrate-bind-ingmodule,CBM)。本工作首次报道地衣芽孢杆菌能降解结晶纤维素及从该种细菌中克隆到纤维素酶基因。

地衣芽孢杆菌HX-12-5的鉴定及中性蛋白酶性质的研究

对一株能产生具有良好脱毛效果的中性蛋白酶的高产菌芽孢杆菌Bacillussp .HX 12 5进行了菌种鉴定 ,结果表明 ,该菌株属地衣芽孢杆菌 (Bacilluslicheniformis) .中性蛋白酶的最适作用条件为 :5 0℃ ,pH 7.0 ,4 0℃时在 pH6～ 9范围内稳定 ;

pRIT-5质粒转化枯草杆菌及地衣芽孢杆菌NM105的研究

迄今文献中报道枯草杆菌基因克隆化都采用枯草杆菌１６８株及其突变体。采用我国分离的枯草杆菌Ｋｉ－２及其突变体Ｋｉ—２—１３２（Ｔｈｒ－．Ｉｌｅ－．Ｖａｌ－）和地衣芽孢杆菌ＮＭ１０５为ｐＲＩＴ—５质粒ＤＮＡ的受体菌株，用酸酚法提纯ｐＲＩＴ—５质粒ＤＮＡ，在琼脂糖凝胶电泳上看不到样品中有染色体ＤＮＡ的带。结果表明，Ｋｉ－２．Ｋｉ－２－１３２．ＮＭ１０５都可作ｐＲＩＴ—５质粒的受体菌，其转化频率在１０－３～１０－５之间，因菌株和条件不同，频率有所差异，Ｋｉ－２－１３２的转化效率为每微克ＤＮＡ可产生１０４转化体。从ｐＲＩＴ—５质粒ＤＮＡ转化Ｋｉ－２、Ｋｉ－２－１３２、ＮＭ１０５的转化体中提取的质粒ＤＮＡ仍具有ｐＲＩＴ—５质粒ＤＮＡ的抗氯霉素（Ｃｍｒ）的转化活性。从转化体提纯的质粒ＤＮＡ的电泳图以及ＣｌａＩ消化后的电泳图与原来的ｐＲＩＴ—５ＤＮＡ的电泳图相同。

地衣芽孢杆菌BL-24对烟草炭疽病的生物防治研究

本试验研究地衣芽孢杆菌BL-24对烟草炭疽病的生物防治效果,用BL-24的发酵液与发酵上清液分别进行烟草炭疽病菌的平板对峙试验,结果显示菌丝生长抑制率分别为66.67%和68.89%。通过田间试验,分别采用地衣芽孢杆菌BL-24的发酵液、发酵上清液以及高温灭菌液与化学农药对比进行小区试验,结果显示,地衣芽孢杆菌BL-24发酵液较发酵上清液和高温灭菌液对烟草炭疽病的防治效果更加明显,防治效果达到56.28%,与化学药剂多菌灵的防治效果差异不显著,表明地衣芽孢杆菌BL-24是一株优良的微生物生防菌株,为烟草炭疽病的防治提供一条新的途径,也为地衣芽孢杆菌开发成生物制剂提供理论依据。

响应面优化Bacillus licheniformis MX5产木质素过氧化物酶的发酵条件

通过响应面分析方法对地衣芽孢杆菌MX5产木质素过氧化物酶(Lignin peroxidase,Lip)的发酵条件进行研究。根据Box-Benhnken中心组合设计原理,在单因素试验基础上采用三因素三水平的响应面分析法确定MX5产Lip的最佳培养条件为:培养基初始pH 8.76,培养温度37.6℃,发酵时间为98.32h,酶活达到最大值103.965U/L。表明试验建立的模型在预测Lip生产中具有良好的效果。