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地黄轮纹病实时荧光定量PCR方法的建立及应用
被引量:
5
1
作者
王鑫源
董诚明
+4 位作者
杨林林
高袁浩
侯文川
顾旭鹏
侯庆峰
《中药材》
CAS
北大核心
2022年第3期530-535,共6页
目的:建立一种准确、快速地检测地黄Rehmannia glutinosa Libosch.轮纹病病原真菌草茎点霉Phoma herbarum的实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法。方法:基于GenBank数据库中草茎点霉的基因序列设计草茎点霉的特异性引物,并基于该引物制备重组...
目的:建立一种准确、快速地检测地黄Rehmannia glutinosa Libosch.轮纹病病原真菌草茎点霉Phoma herbarum的实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法。方法:基于GenBank数据库中草茎点霉的基因序列设计草茎点霉的特异性引物,并基于该引物制备重组质粒标准品,以标准品DNA优化qRT-PCR反应体系及构建qRT-PCR标准曲线。采用所设计的qRT-PCR体系及特异性引物,检测草茎点霉回接地黄叶盘后不同时间病原菌数量的动态变化。结果:设计得到的特异性引物PH.F10/PH.R10及所建立的qRT-PCR方法体系特异性强,敏感度高,检测地黄草茎点霉DNA的最低浓度为2.04×10^(-4)ng/μL。接种后24~48 h(Ct值<31.29)时草茎点霉开始侵染地黄,48 h后病情级别调查结果为1级,且随时间延续侵染量逐渐增加。结论:本研究所建立的qRT-PCR方法能对地黄病株中草茎点霉真菌数量进行快速、动态检测,可为地黄轮纹病的早期诊断和动态监测提供技术支持。
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关键词
地黄轮纹病
草茎点霉
QRT-PCR
动态监测
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职称材料
地黄轮纹病病原菌的细胞壁降解酶活性测定及致病性分析
被引量:
1
2
作者
侯杨威
王鑫源
+3 位作者
杨林林
初雷霞
侯庆峰
董诚明
《北方园艺》
CAS
北大核心
2022年第19期106-113,共8页
以地黄叶片和地黄轮纹病病原菌Phoma herbarum和Fusarium solani为试材,研究了地黄轮纹病病原菌Phoma herbarum和Fusarium solani在离体培养及活体接种后对细胞壁降解酶活性的影响,以期为明确细胞壁降解酶在病原菌侵染地黄植株过程中的...
以地黄叶片和地黄轮纹病病原菌Phoma herbarum和Fusarium solani为试材,研究了地黄轮纹病病原菌Phoma herbarum和Fusarium solani在离体培养及活体接种后对细胞壁降解酶活性的影响,以期为明确细胞壁降解酶在病原菌侵染地黄植株过程中的致病作用研究提供参考依据。结果表明:离体培养时,果胶诱导培养基中多聚半乳糖醛酸酶(PG)与果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)活性较高,羧甲基纤维素(CMC)诱导培养基中羧甲基纤维素酶(Cx)活性较高,且Phoma herbarum的PG、PMG和Cx活性均高于Fusarium solani。活体接种后,Phoma herbarum的PG、PMG、Cx和β-葡萄糖苷酶活性最大值均大于Fusarium solani,且均于第8天时达到峰值。此时,其PG活性为7.83 U·mg^(-1) ,PMG活性为16.00 U·mg^(-1) ,Cx活性为13.65 U·mg^(-1) ,β-葡萄糖苷酶活性为12.01 U·mg^(-1) 。细胞壁降解酶在病原菌侵染过程中起重要作用,Phoma herbarum细胞壁降解酶活性强于Fusarium solani。PMG在侵染初期分泌并起作用,Cx和β-葡萄糖苷酶致病作用发生在后期。
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关键词
地黄轮纹病
细胞壁降解酶
活性变化
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职称材料
17份地黄种质资源轮纹病的田间抗性评价
被引量:
4
3
作者
杜权
谢小龙
+3 位作者
田梦平
马梦雨
吴廷娟
冯卫生
《中药材》
CAS
北大核心
2021年第8期1818-1820,共3页
目的:通过对17份主栽地黄种质资源进行田间轮纹病抗性鉴定和评价,为地黄抗病育种提供种质材料。方法:采用田间自然病圃法调查参试材料轮纹病的发病情况,根据抗性指标和系统聚类分析等方法进行抗病性评价。结果:根据相对抗性指数将17份...
目的:通过对17份主栽地黄种质资源进行田间轮纹病抗性鉴定和评价,为地黄抗病育种提供种质材料。方法:采用田间自然病圃法调查参试材料轮纹病的发病情况,根据抗性指标和系统聚类分析等方法进行抗病性评价。结果:根据相对抗性指数将17份地黄种质资源划分为高抗、中抗、中感、高感4个等级;通过对发病率和病情指数进行系统聚类分析,17份地黄种质资源被聚为4类,其结果与依据相对抗性指数的分级结果基本一致。结论:经过田间调查与抗性分析比较,新科、新丰、85-5、金状元、三块、83抚育属于高抗种质,可以作为地黄选育抗轮纹病种质的亲本材料。
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关键词
地黄轮纹病
田间调查
聚类分析
抗性评价
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职称材料
题名
地黄轮纹病实时荧光定量PCR方法的建立及应用
被引量:
5
1
作者
王鑫源
董诚明
杨林林
高袁浩
侯文川
顾旭鹏
侯庆峰
机构
河南中医药大学/河南省道地药材生态种植工程技术研究中心
仲景宛西制药股份有限公司
出处
《中药材》
CAS
北大核心
2022年第3期530-535,共6页
基金
国家重点研发计划项目(2017YFC1702800)
文摘
目的:建立一种准确、快速地检测地黄Rehmannia glutinosa Libosch.轮纹病病原真菌草茎点霉Phoma herbarum的实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法。方法:基于GenBank数据库中草茎点霉的基因序列设计草茎点霉的特异性引物,并基于该引物制备重组质粒标准品,以标准品DNA优化qRT-PCR反应体系及构建qRT-PCR标准曲线。采用所设计的qRT-PCR体系及特异性引物,检测草茎点霉回接地黄叶盘后不同时间病原菌数量的动态变化。结果:设计得到的特异性引物PH.F10/PH.R10及所建立的qRT-PCR方法体系特异性强,敏感度高,检测地黄草茎点霉DNA的最低浓度为2.04×10^(-4)ng/μL。接种后24~48 h(Ct值<31.29)时草茎点霉开始侵染地黄,48 h后病情级别调查结果为1级,且随时间延续侵染量逐渐增加。结论:本研究所建立的qRT-PCR方法能对地黄病株中草茎点霉真菌数量进行快速、动态检测,可为地黄轮纹病的早期诊断和动态监测提供技术支持。
关键词
地黄轮纹病
草茎点霉
QRT-PCR
动态监测
Keywords
Leaf ring rot of Rehmannia glutinosa Libosch.
Phoma herbarum
qRT-PCR
Dynamic monitoring
分类号
S435.672 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
地黄轮纹病病原菌的细胞壁降解酶活性测定及致病性分析
被引量:
1
2
作者
侯杨威
王鑫源
杨林林
初雷霞
侯庆峰
董诚明
机构
河南中医药大学药学院
河南省道地药材生态种植工程技术研究中心
仲景宛西制药股份有限公司
出处
《北方园艺》
CAS
北大核心
2022年第19期106-113,共8页
基金
国家重点研发计划资助项目(2017YFC1702800)。
文摘
以地黄叶片和地黄轮纹病病原菌Phoma herbarum和Fusarium solani为试材,研究了地黄轮纹病病原菌Phoma herbarum和Fusarium solani在离体培养及活体接种后对细胞壁降解酶活性的影响,以期为明确细胞壁降解酶在病原菌侵染地黄植株过程中的致病作用研究提供参考依据。结果表明:离体培养时,果胶诱导培养基中多聚半乳糖醛酸酶(PG)与果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)活性较高,羧甲基纤维素(CMC)诱导培养基中羧甲基纤维素酶(Cx)活性较高,且Phoma herbarum的PG、PMG和Cx活性均高于Fusarium solani。活体接种后,Phoma herbarum的PG、PMG、Cx和β-葡萄糖苷酶活性最大值均大于Fusarium solani,且均于第8天时达到峰值。此时,其PG活性为7.83 U·mg^(-1) ,PMG活性为16.00 U·mg^(-1) ,Cx活性为13.65 U·mg^(-1) ,β-葡萄糖苷酶活性为12.01 U·mg^(-1) 。细胞壁降解酶在病原菌侵染过程中起重要作用,Phoma herbarum细胞壁降解酶活性强于Fusarium solani。PMG在侵染初期分泌并起作用,Cx和β-葡萄糖苷酶致病作用发生在后期。
关键词
地黄轮纹病
细胞壁降解酶
活性变化
Keywords
Rehmannia glutinosa rot disease
cell wall-degrading enzymes
changes in activity
分类号
S853.75 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
17份地黄种质资源轮纹病的田间抗性评价
被引量:
4
3
作者
杜权
谢小龙
田梦平
马梦雨
吴廷娟
冯卫生
机构
河南中医药大学
呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心
出处
《中药材》
CAS
北大核心
2021年第8期1818-1820,共3页
基金
国家重点研发计划项目(2017YFC1702800)
河南省重大科技专项(171100310500)
文摘
目的:通过对17份主栽地黄种质资源进行田间轮纹病抗性鉴定和评价,为地黄抗病育种提供种质材料。方法:采用田间自然病圃法调查参试材料轮纹病的发病情况,根据抗性指标和系统聚类分析等方法进行抗病性评价。结果:根据相对抗性指数将17份地黄种质资源划分为高抗、中抗、中感、高感4个等级;通过对发病率和病情指数进行系统聚类分析,17份地黄种质资源被聚为4类,其结果与依据相对抗性指数的分级结果基本一致。结论:经过田间调查与抗性分析比较,新科、新丰、85-5、金状元、三块、83抚育属于高抗种质,可以作为地黄选育抗轮纹病种质的亲本材料。
关键词
地黄轮纹病
田间调查
聚类分析
抗性评价
分类号
S435.672 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
地黄轮纹病实时荧光定量PCR方法的建立及应用
王鑫源
董诚明
杨林林
高袁浩
侯文川
顾旭鹏
侯庆峰
《中药材》
CAS
北大核心
2022
5
下载PDF
职称材料
2
地黄轮纹病病原菌的细胞壁降解酶活性测定及致病性分析
侯杨威
王鑫源
杨林林
初雷霞
侯庆峰
董诚明
《北方园艺》
CAS
北大核心
2022
1
下载PDF
职称材料
3
17份地黄种质资源轮纹病的田间抗性评价
杜权
谢小龙
田梦平
马梦雨
吴廷娟
冯卫生
《中药材》
CAS
北大核心
2021
4
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职称材料
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