凋亡、坏死合体滋养细胞微粒对内皮细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨凋亡、坏死合体滋养细胞微粒对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、凋亡的影响。方法:培养原代HUVECs,物理方法诱导滋养细胞凋亡、坏死。采用三步超速离心法制备凋亡合体滋养细胞微粒(a STBM)、坏死合体滋养细胞微粒(n STBM)(实验组),同时制备RBC膜(对照组),并检测胎盘碱性磷酸酶(PLAP)含量。将不同浓度(20、80、320μg/ml)a STBM、n STBM和RBC膜分别与HUVECs共同孵育4、16、32h。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,采用流式细胞仪AV-PI双标记观察细胞凋亡情况。结果:(1)80μg/ml a STBM组作用4、16、32h时的细胞增殖抑制率分别为29.19±0.47、44.73±0.69、54.01±1.61;80μg/ml n STBM组作用4、16、32h的细胞增殖抑制率分别为57.15±0.70、64.35±0.89、71.67±0.63。a STBM、n STBM均能明显抑制HUVEC增殖,抑制作用呈浓度时间依赖性;n STBM对HUVECs的增殖抑制性明显高于a STBM,差异有统计学意义(P<0.001)。RBC膜处理组对HUVECs增殖无明显影响,与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)80μg/ml a STBM组的细胞早期凋亡率、晚期凋亡-坏死率分别为29.05%和7.46%。80μg/ml n STBM组分别为15.93%和30.31%。RBC膜处理组对HUVECs的凋亡无明显影响,与空白对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。a STBM、n STBM组均能引起HUVECs凋亡,n STBM作用HUVECs的晚期凋亡率高于a STBM组,两者有统计学意义(P<0.001)。a STBM主要诱导HUVECs早期凋亡。结论:a STBM、n STBM对内皮细胞有抑制细胞增殖作用,a STBM主要以促进内皮细胞早期凋亡为主,而n STBM以内皮细胞晚期凋亡为主,n STBM对内皮细胞造成的损害强于a STBM。

凋亡、坏死合体滋养细胞微粒对单核细胞的影响

目的研究凋亡、坏死来源合体滋养细胞微粒对于单核细胞炎症因子影响,探讨子痫前期的发病机制。方法物理方法诱导滋养细胞凋亡、坏死,采用三步高速离心法制备凋亡、坏死合体滋养细胞微粒(实验组),红细胞微粒(对照组),将三者分别与单核细胞孵育,取上清液采用酶联免疫分析法(ELISA)测定细胞因子表达量。结果凋亡、坏死STBM促进单核细胞表达细胞因子TNF-α、mcp-1均具有浓度依赖性。坏死STBM组较凋亡STBM组TNF-α浓度水平高,两组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);坏死STBM组较凋亡STBM组的mcp-1浓度水平高,两组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论凋亡、坏死STBM作用单核细胞后引起细胞因子释放存在差异,可能与子痫前期病情程度不同(早发型、晚发型)的发病机制有关。

合体滋养层细胞微粒在子痫前期重度发病中的作用

目的探讨合体滋养层细胞微粒(STBM)在子痫前期重度发病中的作用,以及硫酸镁对STBM水平的影响。方法实验组为为子痫前期重度患者20例,对照组为同期相似孕周的门诊健康孕妇10例,采用ELISA法测定母体外周血血浆STBM水平。结果实验组STBM水平高于对照组(P<0.05);硫酸镁应用前后,实验组STBM水平无统计学差异(P>0.05)。结论 STBM参与子痫前期重度的发病过程,硫酸镁对患者血浆STBM水平没有影响。

胎盘合体滋养细胞微粒注射对孕鼠肾功能和病理形态损伤的研究

目的观察经孕鼠尾静脉注射合体滋养细胞微粒(syncytiotrophoblast microparticles STBM)后,小鼠肾功能及肾脏病理改变。方法收集孕18 d C57小鼠的胎盘,制备小鼠合体滋养细胞微粒,利用电镜观察C57小鼠STBM的形态结构,BCA法测定C57小鼠STBM的蛋白水平;将C57孕鼠分为STBM组、对照组和PBS组,STBM组:自C57小鼠孕8 d起,每天以蛋白浓度为0.15 mg/m L的STBM(0.2 m L)经鼠尾静脉回输至小鼠体内,至孕18 d时收集小鼠24 h尿液测定尿微量蛋白(M-TP)、尿肌酐(U-Crea)、尿蛋白肌酐比(M-TP/Cr)、尿酸(U-Uric)、24 h尿蛋白(24 h U-TP),采集全血测定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C),取肾脏标本切片后行HE染色观察肾组织结构变化;对照组:正常孕18 d小鼠收集尿液、采集全血、取肾脏进行检测;PBS组:自孕8 d起每天经鼠尾静脉注射PBS 0.2 m L,余处理同STBM组。结果 STBM组孕鼠尿液M-TP、M-TP/Cr、24 h U-TP明显高于对照组和PBS组(P<0.01),与对照组比较,PBS组U-Uric未见明显变化(P>0.05),而STBM组U-Uric显著降低(P<0.01);STBM组血清BUN、Scr、Cys-C含量显著升高(P<0.01);STBM组肾脏HE染色可见肾小球内皮细胞增生、肿胀、变形,肾小管云雾状变性。结论类子痫前期模型鼠有肾损伤,STBM可能在子痫前期肾损害中起重要作用。

合体滋养细胞微粒与子痫前期发病机制的最新研究进展

子痫前期是一种产科常见危重症,主要病理生理表现为全身性炎性应答和内皮功能紊乱,以妊娠20周后首次出现的高血压和蛋白尿为诊断依据。合体滋养细胞微粒是由于合体滋养细胞受到刺激或发生凋亡后产生的囊泡,其在炎症、凝血、血管生成中有重要作用,并且可以通过转运mRNA和microRNA完成细胞间信号转导,这些与子痫前期的发病都密切相关,同时子痫前期患者血液中合体滋养细胞微粒明显增加,更说明对该疾病的发生发展有重要作用。因此对合体滋养细胞微粒在子痫前期发病机制中的作用的研究,将有助于改善该病的诊治。

合体滋养细胞微粒与妊娠期高血压疾病的关系

目的探讨合体滋养细胞微粒(STBMs)在妊娠期高血压疾病患者外周血中的含量及其临床意义。方法利用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测正常妊娠者30例(对照组)和妊娠期高血压疾病者30例(实验组)外周血中STBMs的含量,探讨STBMs与妊娠期高血压疾病的关系。结果 STBMs在实验组外周血中含量明显升高,与对照组比较有显著差异(t=3.41,P<0.05);含量随病情加重而升高。结论 STBMs在妊娠期高血压疾病患者外周血中含量升高,造成母体内皮系统受损及炎症反应,从而参与妊娠期高血压疾病的发生发展。

人合体滋养细胞微粒对孕鼠血管内皮的影响

目的 研究人合体滋养细胞微粒（syncytiotrophoblast microparticles,STBM）对SD孕鼠血管内皮的影响,从而探讨子痫前期可能的发病机制.方法 选取2013年8 ～10月在上海交通大学附属第六人民医院住院行选择性剖宫产的10例子痫前期患者的胎盘,采用机械打碎法体外制备合体滋养细胞微粒.将孕鼠随机分为两组,于孕7.5、10.5及13.5天分别经尾静脉注入合体滋养细胞微粒及生理盐水,自孕10.5天起隔日大鼠无创血压测量分析系统测量血压,并于17.5天取血检测血中一氧化氮（nitric oxide,NO）及内皮素（endotelin,ET）含量.结果 实验组孕鼠于10.5天起血压逐渐增高,而对照组血压无明显改变.同时实验组孕鼠血一氧化氮水平（47.256±6.708 μmol/L）明显低于对照组（61.287 ±9.725μmol/L）（P＜0.01）,而内皮素水平（91.209±16.918ng/L）明显高于对照组（56.624±9.337ng/L）（P＜0.01）.结论 STBM可以损伤孕鼠血管内皮,使其调节血管舒缩功能受损,从而导致孕鼠血压升高,提示其可能是子痫前期内皮细胞功能紊乱的原因.

合体滋养层细胞微粒对子痫前期重度病情进展的影响

目的探讨合体滋养层细胞微粒(syncytiotrophoblast microparticles,STBM)在子痫前期重度病情进展中的作用。方法收集子痫前期重度33例,按照子痫前期重度临床发病特点和病情进展时间(从发病至发展为子痫前期重度是否大于48h)分为突发型(11例)和渐进型(22例),并随机选取同期正常健康剖宫产孕妇20例作为正常对照组,采用酶联免疫分析法(ELISA)测定母体外周血血浆中STBM浓度。结果突发型及渐进型子痫前期重度外周血血浆STBM浓度均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。突发型STBM浓度高于渐进型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 STBM脱落进入血液循环增多可能与子痫前期重度病情进展有关。

合体滋养层细胞微粒与子痫前期的关系

微粒是由于细胞受到刺激或发生凋亡后产生的囊泡,其分布广泛,通常出现在体外的培养细胞上清液和体内的体液中,它不是简单的细胞脱落物,而是携带有多种生物学活性分子与具有多种重要生物学信息的"载体",在炎症、凝血、血小板激活和内皮紊乱中起一定的作用。妊娠期的循环微粒可来自血小板、内皮细胞、各种淋巴细胞以及合体滋养层细胞。它们参与细胞间的相互作用,传递生物信息。合体滋养层细胞微粒(STBM)是妊娠期特有的循环微粒,由于胎盘表面新陈代谢,凋亡的合体滋养层细胞受调控地释放亚细胞微粒,并脱落到母体血液循环中,它能和免疫细胞、内皮细胞相互作用,导致妊娠期和子痫前期的全身性炎症反应。子痫前期患者循环中增多的STBM参与子痫前期内皮细胞的损伤过程,在子痫前期的发病机制中起了重要的作用。本文对STBM与子痫前期的关系作一综述。

妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇胎盘组织HDAC3的表达及意义研究

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶3(histone deacetylase 3,HDAC3)在妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)孕妇胎盘组织中的表达及意义。方法:2012年3月至2013年5月在重庆医科大学附属第一医院选择ICP孕妇41例为研究对象,包括ICP轻度组(19例)、ICP重度组(22例),以同期行择期剖宫产术的20例正常孕妇为对照组。免疫组化法检测胎盘组织中HDAC3的定位及表达,蛋白印迹(Western blot)技术检测胎盘组织中HDAC3蛋白的表达水平,实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术检测胎盘组织中HDAC3 m RNA的表达水平。结果:(1)ICP重度组孕妇血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)及谷草转氨酶(glutamic-oxaloacetic transaminase,AST)、谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT)水平明显高于轻度组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)ICP重度组和轻度组胎盘组织中HDAC3蛋白和m RNA的表达水平均低于对照组,分别比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)胎盘组织中HDAC3蛋白表达水平与血清中TNF-α、TBA及ALT、AST水平呈负相关。结论:HDAC3表达下调可能与ICP发病及肝功能损害有关。