钳夹压力法建立大鼠坐骨神经损伤模型的研究

目的:建立钳夹压力可量化的坐骨神经损伤模型。方法:将30只SD大鼠随机分成5组,每组6只,根据不同钳夹压力将大鼠分为1N组、2N组、4N组、8N组和16N组。手术暴露坐骨神经,采用止血钳钳夹大鼠的坐骨神经,同时用薄膜型压力传感器测量钳夹压力。用肌电图诱发电位仪分别测量钳夹前及钳夹30min后大鼠的坐骨神经复合肌肉动作电位(CMAP),并测定钳夹后第2天各压力组大鼠的坐骨神经功能指数(SFI),并观察神经纤维组织HE染色变化。结果:压力1N组、2N组、4N组、8N组和16N组钳夹后与钳夹前的坐骨神经CMAP比较,其潜伏期均明显延长(P<0.05),MNCV均显著下降(P<0.01),MNCV下降值分别占各自正常对照组的25%、51%、69%、67%、94%;各压力组近端波幅均显著下降(P<0.05),分别下降16%、34%、68%、74%、89%。各压力组SFI均显著增大(P<0.01)。组织形态学观察表明神经纤维组织随压力增高出现形态改变。结论:钳夹压力法建立大鼠坐骨神经1N钳夹压力造成坐骨神经中度损伤模型,压力2-16N造成重度损伤模型。

揭示神经病理性疼痛机制:坐骨神经分支选择性损伤模型的研究进展

目的:为研究神经病理性痛的机制,能够模拟神经病理性痛的临床特点的实验动物模型显得尤为重要。综述了近几年发展起来的坐骨神经分支选择性损伤(sparednerveinjury,SNI)所致神经病理性痛的研究进展。资料来源:应用计算机检索Pubmed1990-10/2004-10期间的相关文章,检索词neuropathologicpain,nerveinjury”,再利用检索词spared““nerveinjury”进行检索,文章语言限定为English。同时手工或计算机检索万方数据库1990-10/2004-10期间的相关文章,限定文章语言种类为中文,检索词“神经病理性痛、周围神经损伤”。资料选择:对资料进行初审,选取与周围神经损伤所致病理性痛密切相关的研究。纳入标准:研究对象为动物,包括坐骨神经的松散结扎/慢性挤压、部分坐骨神经紧密结扎、腰L5～6脊神经根切断术和SNI等研究内容。重点选取与SNI研究相关的文献。排除标准:综述性论文。资料提炼:共收集到85篇相关文献,其中与SNI直接相关的文献8篇,间接相关的文献25篇,排除重复的12篇,共21篇用于资料的综述。资料综合:对选取的文献进行阅读、归纳及综合。综合的结果显示,SNI模型的手术易于操作可重复性好,术后动物的行为表现能够模拟部分神经病理性痛的特点且持续时间长,不同镇痛药物对SNI诱导的神经病理性痛行为反应作用不同?

大鼠部分坐骨神经损伤模型中机械痛敏和冷痛敏的性别差异

目的 :检测大鼠神经部分损伤所致实验性神经病理性痛发生中的性别差异。方法:在成年大鼠中建立部分坐骨神经损伤模型,检测损伤后的机械性痛觉超敏和冷触诱发痛的发展,对比雌雄差异。结果:部分坐骨神经损伤可引起大鼠同侧后足对机械刺激和冷刺激的痛敏反应。虽然雌雄大鼠在机械痛敏程度上没有显著性差异,但雌性大鼠较雄性更早发生痛敏(雌鼠术后1天,雄鼠术后3天)且持续的时程更长(雌鼠术后84天,雄鼠术后49天)。雌性大鼠的冷痛敏比雄性在程度上有显著的增强(P<0.01)。结论:部分坐骨神经损伤引起的大鼠对机械刺激和冷刺激的痛敏现象存在显著的性别差异——雌性大鼠较雄性大鼠表现出更强的神经病理性痛样行为。

坐骨神经分支选择性损伤模型L4～6背根神经节水平不同时间点P2X3mRNA表达变化

目的观察坐骨神经分支选择性损伤（SNI）动物制作型模后不同时间点L4~6背根神经节（DRG）水平P2X3mRNA的表达情况,探讨外周P2X3mRNA在神经病理性痛模型不同阶段中的作用。方法 54只健康雄性SD大鼠完全随机分为空白对照（control）组、假手术（sham surgery）组和手术（surgery）组。通过结扎腓总神经及切断胫神经,保留腓肠神经的方法建立SNI模型。动态观察造模前、造模后1d、3d、7d和14d双侧足跖机械痛阈;Real-time PCR法检测患侧造模后3d、7d和14d L4~6 DRG水平P2X3mRNA表达情况。结果模型制作后各时间点,surgery组大鼠患侧足跖痛阈明显降低（P〈0.05）,sham surgery组大鼠与control组比较差异无显著性（P〉0.05）;各组大鼠健侧足跖痛阈于模型制作后各时间点均无显著变化（P〉0.05）。模型制作后3d、7d,surgery组大鼠L4、L5、L6 DRG水平P2X3mRNA表达均有不同程度的提高（P〈0.05）;而模型制作后14d,surgery组大鼠L5、L6DRG水平P2X3mRNA表达明显减少（P〈0.05）,L4 DRG水平P2X3mRNA表达仍显著多于sham surgery组（P〈0.05）。模型制作后各时间点、各DRG水平,sham surgery组和surgery组大鼠P2X3mRNA表达差异均无显著性（P〉0.05）。结论外周P2X3mRNA参与SNI模型疼痛的产生和维持,且其在不同阶段发挥的作用不同。

抗神经生长因子抗体对大鼠慢性坐骨神经压迫损伤模型的脊髓胶质细胞激活的抑制作用

目的研究抗神经生长因子抗体(anti-NGF)蛛网膜下腔应用对大鼠坐骨神经病理性疼痛模型痛阈的影响,并观察其对该模型星形胶质细胞激活的影响.方法手术制作大鼠慢性坐骨神经压迫损伤(chronic constriction injury,CC)I模型.实验大鼠采用随机数字表法分为4组:CCI+anti-NGF组(n=8):手术后第7天开始每天单次腹腔注射anti-NGF(10 mg/kg)、CCI模型+生理盐水组(n=8):手术后第7天开始每天单次腹腔注射生理盐水、假手术给anti-NGF组(n=8)和假手术盐水组(n=8).各组均在术后隔天测定大鼠痛行为学观察术后15 d内大鼠机械和热痛阈的变化.各组在手术后15 d,使用4%多聚甲醛灌流后,进行免疫组化染色,观察大鼠脊髓L4～5节段星形胶质细胞标记物GFAP表达情况.结果手术盐水对照组的机械和热痛阈在3 d后出现明显下降,在术后第7天达到高峰期.术后第7天单次给予anti-NGF能短时间内拮抗CCI大鼠的机械和热痛阈下降,连续给予anti-NGF 7 d后可以使大鼠的机械和热痛阈持续显著高于CCI+盐水组.15 d时CCI+anti-NGF组大鼠脊髓L4-5节段的GFAP表达显著低于CCI+生理盐水组.结论腹腔注射anti-NGF能有效拮抗CCI大鼠模型机械和热痛阈的下降.连续注射anti-NGF可以显著的持续改善CCI大鼠模型的机械和热痛阈的下降.CCI+anti-NGF组脊髓GFAP表达显著低于CCI+生理盐水组,这可能与anti-NGF持续改善大鼠的痛行为有关.

人脐带间充质干细胞修复大鼠坐骨神经损伤的实验模型研究

目的：探讨人脐带间充质干细胞（HUMSC）修复大鼠坐骨神经损伤的效果。方法：对新鲜的羊膜进行处理，分离纯化 HUMSC后传代培养。取60只大鼠，手术处理成坐骨神经缺损套管模型鼠，随机分为三组：空白对照组（A组）、实验组（B组）、标准对照组（C组）。A组大鼠不采取其他措施，B组大鼠羊膜腔内注入HUMSC悬液，C组大鼠实施自体坐骨神经桥接术。观察记录大鼠一般的身体状态，12周后进行神经电生理检测和腓肠肌湿重称量。结果：术后大鼠术侧拖行，足趾合拢，术侧1～2d后发生红肿和溃疡；术后3～4周，B组和C组的大鼠红肿和溃疡症状渐渐消失，A组大鼠还存在红肿和溃疡；各组大鼠术后术侧腓肠肌都出现不同程度萎缩。B组和C组大鼠的术侧湿重/健侧湿重比值和A组比较，差异具有统计学意义。B组各神经电生理指标和C组比较，潜伏期长，传导速度慢，波幅小，但无统计学差异。结论：HUMSC可以分化为神经细胞，对大鼠坐骨神经损伤有修复作用。

盐酸文拉法辛对坐骨神经慢性结扎损伤模型大鼠神经病理性疼痛的影响

目的观察盐酸文拉法辛对坐骨神经慢性结扎损伤模型大鼠神经病理性疼痛的影响。方法采用坐骨神经慢性结扎损伤模型,将21只SD大鼠随机分为3组,即文拉法辛组(术后每天给予盐酸文拉法辛2 5 mg/kg,连续给药14 d)、假手术组和模型组(予等量生理盐水)。分别于术前1 d和术后2,7,14 d采用YLS-6B智能热板仪测定热痛缩爪潜伏期(TWL),用意大利UGO BASILE 37450动态足底触觉仪测定机械痛缩爪潜伏期(MWT)。结果术前3组TWL和MWL差异无统计意义(P>0.05)。术后2 d与术前1 d比较,模型组和文拉法辛组的痛阈值变化有高度统计意义(P<0.01),而假手术组无统计意义(P>0.05)。术后14 d与术后2 d比较,文拉法辛组的TWL和MWL均有统计意义(P<0.05),而模型组无统计意义(P>0.05)。文拉法辛组术后7 d与术后2 d比较,痛阈值变化无统计意义(P>0.05)。结论盐酸文拉法辛能减轻大鼠坐骨神经慢性结扎损伤模型引起的神经病理性疼痛。

依托度酸对坐骨神经分支选择性损伤模型大鼠神经病理性疼痛行为学的影响

神经病理性疼痛是由身体损伤、外科手术、病毒感染、化学治疗、某些代谢疾病（如糖尿病）或癌症等病理原因造成的神经系统功能异常，有痛觉过敏和痛觉超敏两种表现形式。其发病机制目前尚不明确，对非甾体类抗炎药（NSAIDs）无反应，对阿片类药抵抗或不敏感，此类患者通常凭经验治疗，或予抗抑郁药如三环类、5羟色胺再摄取抑制剂等，也有用抗惊厥药如卡马西平和加巴喷丁治疗.

乳铁蛋白在大鼠坐骨神经慢性束缚损伤模型产生镇痛作用

目的:研究乳铁蛋白在大鼠坐骨神经慢性束缚损伤模型的镇痛作用。方法:30只成年SD大鼠被制作为坐骨神经慢性束缚损伤模型,用辐射热刺激法诱发鼠后腿回缩试验测定痛阈,实验动物分为5组,分别腹腔注射生理盐水及乳铁蛋白30mg/kg、100mg/kg、300mg/kg、1000mg/kg。药物效应以最大可能效应百分数(MPE%)表示。以t检验法分析乳铁蛋白各剂量组与对照组之间的差异。结果:腹腔注射乳铁蛋白剂量依赖性地延长大鼠后腿回缩潜伏期;乳铁蛋白的峰值作用时间在用药后60分钟;乳铁蛋白各剂量组的最大可能效应百分数与生理盐水组相比差异有显著性。结论:腹腔注射乳铁蛋白在大鼠坐骨神经慢性束缚损伤模型产生剂量依赖性镇痛作用。

小鼠股骨骨折合并坐骨神经损伤的标准化动物模型构建与评价

目的建立并评价小鼠股骨骨折合并坐骨神经损伤的标准化动物模型。方法将96只雄性C57BL/6J小鼠随机分为两组:股骨骨折合并坐骨神经损伤组(48只)和股骨骨折组(48只)。股骨骨折合并坐骨神经损伤组小鼠通过止血钳钳夹致左侧坐骨神经损伤,并于同侧进行股骨开放性骨折联合髓内针固定,制作小鼠股骨骨折合并坐骨神经损伤模型;股骨骨折组小鼠仅游离左侧坐骨神经,不做钳夹处理,同时进行左侧股骨开放性骨折联合髓内针固定。术后仔细观察两组小鼠的行为学变化。于术后第3、5、7、10、14、18天取两组各36只小鼠的左侧坐骨神经,每个时间点每组6只,通过免疫组织化学染色观察坐骨神经的组织学变化。于术后第7、14、21、28天通过股骨X线片、Micro-CT、H-E染色及番红固绿染色分析骨折愈合情况。结果成功建立小鼠股骨骨折合并坐骨神经损伤模型,行为学观察与评估发现术后第14天股骨骨折合并坐骨神经损伤组小鼠步态基本恢复正常;坐骨神经免疫组织化学染色显示,术后第14天股骨骨折合并坐骨神经损伤组小鼠的坐骨神经纤维连续性基本恢复;Micro-CT检查显示在各时间点,股骨骨折合并坐骨神经损伤组的骨体积均小于股骨骨折组(P均<0.01),骨体积百分比也均低于股骨骨折组(P均<0.01)。骨切片组织形态学结果显示,股骨骨折合并坐骨神经损伤组小鼠术后第7天骨折断端几乎不存在骨痂;术后第14天出现少量软骨痂,主要由未分化的间充质干细胞构成;术后第21天软骨痂开始钙化,骨痂中存在部分肥大的软骨细胞;术后第28天骨折断端有新生骨形成,含有大量肥大的软骨细胞、成骨细胞与骨细胞。结论小鼠股骨骨折合并坐骨神经损伤模型构建成功,该模型愈合过程良好,并较单纯股骨骨折的愈合有所延迟,可较好地模拟临床骨折合并周围神经损伤后的骨修复及愈合过程。

坐骨神经慢性压迫损伤动物模型的不同制备方法比较

神经病理性疼痛(Neuropathic pain,NPP)是以感觉功能障碍为主要表现的疾病,如痛觉过敏、自发性疼痛、异常疼痛等,发病多样且发病机制尚不明确。坐骨神经慢性压迫损伤(Chronic constriction injury of the sciatic nerve,CCI)模型是研究NPP的经典模型。目前,制备CCI动物模型的方法较固定且经典,每种方法各有其特点,本文通过将CCI动物模型选择与制备方法的文献结合笔者的实际操作,探讨实验性CCI动物模型的选择与制备方法,以期对研究CCI动物模型的制备与选择提供有效参考。

坐骨神经损伤模型的量化研究

目的:对SD大鼠坐骨神经钳夹伤模型进行量化研究,确定不同压力对坐骨神经造成的损伤程度,建立符合SunderlandⅤ度分类法中坐骨神经损伤模型。方法:对JZ06Cr 14 cm止血钳进行压力测定,采用JZ06Cr 14 cm止血钳进行造模,将32只4周龄健康清洁级雄性SD大鼠随机分为4组,正常对照组(8只)及压力组(1扣压力亚组、2扣压力亚组、3扣压力亚组各8只),分别于造模后30 min检测各组神经传导速度(NCV),并取神经进行HE染色观察。结果:止血钳压力测定显示止血钳1扣压力约16 N,2扣压力约为31 N,3扣压力约为46 N。1扣压力亚组的坐骨神经传导速度与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),形态学显示神经纤维平行排列,结构致密,轴突、髓鞘、神经内膜束膜都完好无破裂;2扣压力亚组的NCV与正常对照组、1扣压力亚组之间相比差异均有统计学意义(P<0.05),形态学可见神经纤维断裂,神经内膜发生部分损害,结构紊乱;3扣压力亚组的部分NCV无法测出,并与其他各组之间差异均有统计学意义(P<0.05),形态学可见神经纤维断裂,神经外膜与束膜均保持完整。结论:约16 N压力坐骨神经钳夹伤模型符合SunderlandⅠ度损伤;约31 N压力坐骨神经钳夹伤模型符合SunderlandⅡ或Ⅲ度损伤;约46 N压力坐骨神经钳夹伤模型符合SunderlandⅢ度损伤。

坐骨神经脉冲射频对慢性坐骨神经压迫损伤模型大鼠脊髓背角胶质细胞活化水平的影响及其镇痛作用

目的:观察坐骨神经结扎处脉冲射频(PRF)对慢性坐骨神经压迫损伤(CCI)模型大鼠脊髓背角小胶质细胞和星形胶质细胞活化水平的影响,探讨坐骨神经PRF镇痛机制与脊髓背角小胶质细胞和星形胶质细胞活化水平的关系。方法:雄性SPF级SD大鼠40只随机分为CCI假造模PRF假治疗组(SS组)、CCI假造模PRF治疗组(SP组)、CCI造模PRF假治疗组(CS组)和CCI造模PRF治疗组(CP组),每组10只。CCI造模成功后4d行PRF治疗,在坐骨神经结扎处行标准PRF (120s、42℃)。于CCI造模前1d (D0)及造模后1、3、5和7d (D1、D3、D5和D7)测定大鼠患侧机械缩足反射阈(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL)。疼痛行为学测试完成后(D7)取患侧L3～5脊髓背角,Western blotting法检测脊髓背角小胶质细胞特异性蛋白(Iba-1)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的蛋白表达水平。结果:与SS组比较,CCI造模后不同时间点CS组大鼠患侧出现足外翻、跛行、脚趾弯曲聚拢和行走时抬足等行为学表现,MWT和TWL均明显下降(P<0.01),脊髓背角Iba-1和GFAP蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与CS组比较,CP组大鼠(D5和D7)PRF后足外翻、跛行、脚趾弯曲聚拢和行走时抬足等行为学变化明显缓解,MWT和TWL值明显升高(P<0.01),脊髓背角Iba-1蛋白表达水平明显下调(P<0.05),GFAP蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:坐骨神经PRF能有效缓解CCI模型大鼠的神经病理性疼痛(NP),坐骨神经PRF可抑制脊髓背角小胶质细胞活化水平,其镇痛机制可能与抑制脊髓背角小胶质细胞活化有关。

鞘内注射地塞米松缓解坐骨神经分支选择性损伤大鼠神经病理性痛

目的探索坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI)模型中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)激动剂地塞米松对大鼠痛敏的影响。方法取成年雄性SD大鼠24只,随机均分为四组:假手术组(Sham组)、SNI+地塞米松组(SD组)、SNI+GR拮抗剂(RU)组(SR组)和SNI+生理盐水组(SNI+NS组,SS组)。用Von Frey纤维丝测定四组大鼠50%缩足阈值(50%mechanical withdrawal threshold,50%MWT)的变化;SD组和SR组均于术后8d鞘内注射地塞米松(2μg,0.05mg/ml,qd)和RU(2μg,0.025mg/ml,Bid),连续注射4d,术后13d取材,并利用免疫荧光染色检测各组脊髓中GR的表达变化情况。结果与SS组比较,SD组大鼠的50%MWT升高,脊髓背角GR表达明显增加(P<0.05或P<0.01)。而SR组和SS组的50%MWT差异无统计学意义;免疫荧光染色显示SR组脊髓背角GR表达明显低于SS组(P<0.05)。结论脊髓GR参与调节SNI所致的神经病理性痛,鞘内注射Dex能缓解SNI大鼠的机械痛敏。

鼠坐骨神经损伤后2.5s mNGF对再生的影响

目的 :通过动物坐骨神经损伤模型 ,观察 2 .5smNGF对外周神经损伤后的促再生作用 .方法 :损伤小鼠及大鼠坐骨神经后 ,肌肉内注射 2 .5smNGF ,观察不同剂量 ,不同时间 2 .5smNGF对神经生长的促进作用 .结果 :与对照组比较 ,1～ 8μg·kg-1组 2 .5smNGF可使小鼠坐骨神经损伤侧皮肤营养不良减轻 ,各组间有显著差异 (P <0 .0 1) .可以促进大鼠坐骨神经损伤后轴索再生 ,各时点 2 .5smNGF与对照组比 ,结果均有显著性意义 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) .2 .5smNGF有加快再生神经传导速度的作用 .2 .5smNGF大鼠在损伤后 ,可使比目鱼肌记录到的N M电潜伏期明显缩短 .结论 :2 .

大鼠坐骨神经电损伤后的实验性痛定量检测

目的:对大鼠坐骨神经电损伤后疼痛行为进行定量检测,探索周围神经电损伤后出现的感觉功能障碍。方法:成年雄性SD大鼠56只,随机分成假手术组、电损伤65 V、75 V、100 V、125 V、150 V和坐骨神经慢性压榨(CCI)组,共7组,每组8只大鼠。分别于术后1、2、4周对大鼠后足进行热痛敏和机械痛敏定量检测。结果:和对照组相比65 V和75 V组表现出明显的机械缩足反射阈值减小,125 V组1周时机械缩足反射阈值减小,而2周和4周时则明显增大。150 V组1周机械缩足反射阈值无明显变化,2周和4周时明显增大。100 V、125 V和150 V均表现为热刺激缩足反射潜伏期延长。CCI组不论机械还是热刺激,其缩足反射阈值均减小。结论:坐骨神经电损伤可引起大鼠机械性痛阈值和热痛阈值的改变,其中较低电压损伤组大鼠机械性痛阈值减小,而较高电压组大鼠机械刺激阈值和热刺激阈值反而增高,说明较高电压可能导致坐骨神经的感觉传导功能完全受损。

补气通络方对大鼠坐骨神经损伤后功能与结构恢复的影响

目的:观察补气通络方对周围神经损伤的治疗效果,为临床用药提供依据。方法:清洁级Wistar大鼠48只,行右坐骨神经横形切断后即刻原位吻合术造模,制成周围神经损伤模型,随机分成4组:补气通络胶囊组、补气通络注射液组、维生素B1加B6组和空白组。经过造模给药后4、8、12周行坐骨神经传导速度（NCV）和神经轴突计数（NAC）测定作为观测指标,判断神经功能与结构的修复情况。结果:补气通络方2个治疗组的神传导速度及神经轴突计数均比维生素B1加B6组和空白组恢复快（P<0.05或P<0.01）。结论:补气通络方对周围神经损伤后神经功能与结构的恢复均有促进作用。

MR扩散张量成像活体评估兔坐骨神经放射性损伤

目的探讨DTI评估兔坐骨神经放射性损伤的可行性和准确性,分析各弥散参数(FA、ADC、λ⊥、λ∥)与病理及肢体功能的关系。方法选取21只新西兰大白兔,随机选取一侧后肢行单次立体定向辐照制作坐骨神经放射性损伤模型。对实验兔于辐照前、辐照后1天、1、2、3、4个月行DTI及T2WI、SPIR扫描,同时评价肢体功能变化,检查完毕后于各时间点随机处死2只兔行电镜检查。结果辐照前,辐照侧与对照侧各DTI参数差异均无统计学意义(P均>0.05)。辐照后1天,辐照侧FA值与对照侧差异无统计学意义(P=0.075);辐照后1、2、3、4个月辐照侧FA值均低于对照侧(P均<0.05)。辐照后1天、1、2、3、4个月,辐照侧λ⊥及ADC值均高于对照侧(P均<0.05)。FA值与肢体功能呈正相关(r=0.833,P=0.039),λ⊥值与肢体功能呈负相关(r=-0.833,P=0.039),ADC、λ∥值与肢体功能无相关性(r=-0.586、-0.463,P均>0.05)。结论 FA及λ⊥随时间变化的趋势与肢体功能及病理改变相一致,可作为评价兔周围神经放射性损伤的可靠方法。

改良钳夹型脊髓损伤大鼠模型的建立及神经功能评价

目的建立一种稳定可靠、操作简单的不完全性脊髓损伤动物模型,并对其神经功能进行初步评价。方法将50只SD大鼠随机分为模型组、假手术组。采用改良钳夹法建立大鼠脊髓损伤模型,观察不同时间点大鼠行为学运动功能(BBB)评分、脊髓组织形态变化及损伤段脊髓的细胞凋亡因子半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)阳性细胞表达的情况。结果模型组大鼠各时间点BBB评分均明显低于假手术组(P<0.05),假手术组各时间点大鼠脊髓组织中Caspase-3阳性细胞表达明显低于模型组(P<0.05)。结论成功制备了稳定可靠、操作简单的不完全性脊髓损伤动物模型。