坚龙胆中的一个新裂环烯醚萜甙(英文)

从坚龙胆(Gentianarigescens)的根中分离得到1个新的裂环烯醚萜甙,命名为坚龙胆甙A(1),以及8个已知化合物龙胆苦甙(2),6′-O-β-D-吡喃葡萄糖基-龙胆苦甙(3),马钱子酸(4),6′-O-β-D-吡喃葡萄糖基-马钱子酸(5),獐牙菜甙(6),2′-(邻,间-二羟基苯甲酰基)-獐牙菜甙(7),獐牙菜苦甙(8),四乙酰开联番木鳖甙(9)。它们的化学结构通过现代波谱解析得以鉴定。化合物3,5和9为首次从坚龙胆中分离得到。

坚龙胆药材产品质量分级标准研究

目的:通过测定坚龙胆产品主要性状和主成分含量,探讨其产品主要性状与质量评价指标的相关性以及初步确立质量分级标准划分的合理性,为制订坚龙胆的质量标准提供实验依据。方法:使用SPSS和DPS统计分析软件,对所测数据进行K-均值聚类和相关性分析。结果:坚龙胆产品主成分与产品的5个主要性状关联度由大到小依次为根粗>须根数>根及根茎长>根及根茎鲜重>根及根茎干重,坚龙胆产品质量可分为3个等级。坚龙胆的5个产品主性状中,与有效成分关联度最大的是根粗,关联度为0.7943,而根及根茎鲜重和根及根茎干重对有效成分含量的关联度相对较小,约0.5。结论:生产中应把根粗作为高产和高有效成分含量的重点选择性状。坚龙胆产品质量的3个等级数据可为研究坚龙胆质量控制标准提供参考依据。

野生坚龙胆及其组培苗中龙胆苦苷的含量分析

利用含有α-萘乙酸(NAA)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)和激动素(KT)等激素的MS固体培养基,对野生坚龙胆进行组培苗诱导培养。同时,应用高效液相色谱技术对野生坚龙胆和其组培苗的根、茎和叶中的龙胆苦苷进行含量分析和比较研究。结果发现,野生坚龙胆中的龙胆苦苷主要储存于根部,而组培坚龙胆中龙胆苦苷在根中的含量甚微,主要集中在茎、叶部位,且在出根初期组培坚龙胆叶中的龙胆苦苷含量近似于或略大于野生坚龙胆根中的含量。研究结果提示,坚龙胆中的绿色组织是龙胆苦苷合成的部位,这些部位同时具有龙胆苦苷的储藏功能。

坚龙胆的快速繁殖

对野生坚龙胆的腋芽进行诱导、筛选和培养 ,得到芽与根的优化培养基和培养条件 ,建立了无性繁殖培养系 ,获得完整植株 ,并移栽成功。

贵州不同地区坚龙胆中龙胆苦苷含量测定

目的测定贵州产坚龙胆中龙胆苦苷的含量,并评价不同产地坚龙胆的质量。方法采用高效液相色谱,Alltima C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(30:70)为流动相;流速1.0 mL.min-1;检测波长为270 nm;柱温为30℃。利用正交实验以龙胆苦苷含量为指标研究了坚龙胆的最佳提取方法。结果龙胆苦苷在0.08～0.64 mg.mL-1(r=0.999 9)范围内与峰面积线性关系良好;平均回收率为102.4%,RSD为1.69%(n=5)。测定了11个产地坚龙胆中龙胆苦苷的含量在2.113%～4.808%间。结论贵州不同地区间龙胆质量均符合《中华人民共和国药典》2005年版要求,各地区之间无明显差异。

坚龙胆酒炙前后HPLC指纹图谱对比研究

目的:研究坚龙胆酒炙前后HPLC指纹图谱的差异。方法:采用梯度洗脱法,分别对10批坚龙胆饮片生品及相应的酒龙胆进行HPLC测定,流动相为乙腈-0.1%磷酸线性梯度洗脱,检测波长225 nm,记录时间65 min。采用中国药典委员会指纹图谱相似度评价软件进行数据处理。结果:10批坚龙胆饮片生品及酒龙胆的指纹图谱相似度分别在0.935～0.997、0.964～0.999之间,以饮片生品指纹图谱的共有模式为对照,酒龙胆的相似度亦大于0.900。结论:酒炙对坚龙胆化学成分影响不大,但改变了成分间量的比例关系。

坚龙胆中龙胆苦苷含量的测定

为扩展坚龙胆中龙胆苦苷含量测定方法及坚龙胆药材资源的更好利用和临床应用,采用高效毛细管区带电泳法(简称HPCE)测定坚龙胆中龙胆苦苷含量,并对坚龙胆的不同部位、不同炮制品中龙胆苦苷含量进行测定。结果表明:HPCE法测定龙胆苦苷在0.06～0.48 mg/mL呈良好的线性关系(r=0.999 3),平均回收率为101.31%,RSD为1.99%,该方法准确性、重现性好;坚龙胆不同部位、不同炮制品中龙胆苦苷含量有较大差异,其根含量>叶含量>茎含量,生品>炮制品。

坚龙胆环烯醚萜甙的HPLC分析

应用HPLC分析方法，建立了坚龙胆中5个主要环烯醚萜甙的含量测定方法。在ZORBAXSB—C18色谱柱，乙腈-0．2％磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流速1．0mL/min，柱温为40℃，检测波长254nm的色谱条件下，化合物得到良好的分离，并具线性相关。本方法操作简便，重现性好，灵敏度高。对不同产地的样品进行比较分析的结果表明，产地对坚龙胆中环烯醚萜甙的组成和含量有显著的影响。

贵州产坚龙胆组织培养体系的建立

以贵州野生坚龙胆(Gentiana rigescens Franch)带有顶芽或腋芽的茎段作为外植体,建立坚龙胆的组织培养体系。结果表明,适宜的不定芽诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,最佳的增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA,最适生根培养基为1/2MS+0.1 mg/L IBA。在组织培养过程中还观察到了瓶苗开花的现象。

坚龙胆不同部位中龙胆苦苷的含量比较

目的:测定坚龙胆不同部位龙胆苦苷的含量,并评价坚龙胆药材不同部位的质量。方法:采用HPLC法,色谱条件为Agilent ZORBAX SB C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为甲醇∶水(27∶73),检测波长274nm,流速1.0ml/min,柱温25℃。结果:测定了坚龙胆药材不同部位中龙胆苦苷的含量。龙胆苦苷在0.21～10.5μg范围内线性关系良好,r值为0.999 8,龙胆苦苷平均回收率为98.01%,RSD为2.50%。结论:坚龙胆药材不同部位龙胆苦苷含量均高于《中国药典》2005年版要求,表明坚龙胆全草均可入药。

正交试验法优选坚龙胆中龙胆苦苷的提取工艺

目的:优选坚龙胆中龙胆苦苷的提取工艺。方法:以龙胆苦苷的含量为指标,采用高效液相色谱法进行含量测定,采用L(934)正交设计试验,对提取次数、提取溶剂倍数和提取时间3因素进行考察,以确定最佳提取工艺。结果:提取3次,用10倍量的甲醇,提取时间每次20min为最佳提取工艺。结论:该工艺合理,且稳定可行。

贵州不同产地坚龙胆药材及饮片中龙胆苦苷含量测定

目的测定贵州产坚龙胆中龙胆苦苷的含量,并评价不同产地坚龙胆药材及饮片的质量。方法利用正交试验研究了龙胆苦苷的最佳提取方法。结果测定了贵州不同产地坚龙胆药材及饮片中龙胆苦苷的含量。结论贵州不同地区间龙胆药材及饮片质量均符合《中国药典》2005年版要求,各地区之间无明显差异。

基于HPLC指纹图谱结合化学计量学的龙胆和坚龙胆药材鉴别及质量评价

目的建立龙胆和坚龙胆药材的HPLC指纹图谱,并结合化学计量学分析法对龙胆和坚龙胆进行鉴别及质量评价。方法采用HPLC对不同产地的20批龙胆和17批坚龙胆进行指纹图谱研究,建立龙胆和坚龙胆的对照指纹图谱,采用液质联用技术对龙胆和坚龙胆指纹图谱共有峰进行指认,并结合聚类分析和主成分分析对龙胆和坚龙胆进行鉴别及质量评价。结果龙胆指纹图谱有13个共有峰,坚龙胆指纹图谱有10个共有峰,其中3个峰分别为马钱苷酸、獐牙菜苦苷和龙胆苦苷;龙胆和坚龙胆的指纹图谱存在明显差异,利用坚龙胆的共有峰7能够对二者进行鉴别;根据共有峰的聚类分析和主成分分析结果,将龙胆和坚龙胆分为3类;从主成分得分来看,龙胆药材质量优于坚龙胆。结论本研究建立的方法能高效、准确鉴别龙胆和坚龙胆药材,并有效对其质量进行评价。

大理白族自治州不同居群坚龙胆叶中裂环烯醚萜类物质含量的研究

目的:探讨大理白族自治州(简称大理州)不同居群坚龙胆叶中裂环烯醚萜类物质(龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷)的含量,为坚龙胆优良品种筛选及其开发应用提供参考。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定大理州不同居群坚龙胆叶中裂环烯醚萜类物质含量,建立其HPLC指纹图谱,并运用单因素方差分析、总含量聚类分析和主成分分析法对不同居群坚龙胆叶中裂环烯醚萜类物质的含量进行研究。结果:大理州不同居群坚龙胆叶中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷的含量及其总含量差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);确定了HPLC指纹图谱中12个共有峰,除感通居群外,其余共有峰HPLC指纹图谱相似度均在0.972以上,并指认了其中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷3个与活性相关的特征峰;不同居群坚龙胆叶中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷总含量聚类分析和HPLC指纹图谱主成分分析结果相同。结论:大理州不同居群坚龙胆叶中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷含量差异较大;除感通居群外,不同居群坚龙胆叶中裂环烯醚萜类物质相似度较高。

贵州道地药材坚龙胆HPLC特征图谱研究

目的:建立贵州道地药材坚龙胆HPLC特征图谱分析方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-1%冰醋酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～50 min:A为5%→20%,B为95%→80%),流速:1.0 mL/min。检测波长为254 nm,柱温为30℃。以中药色谱特征图谱相似度评价系统的操作规范(2004 A版)软件计算。结果:不同产地的21批坚龙胆样品的相似度在0.95以上,确定了7个共有峰。结论:该方法简单、准确、重复性好,为坚龙胆的质量控制提供了有效的方法。

坚龙胆与伪品多叶唐松草鉴别

龙胆为常用中药,来源于龙胆科植物龙胆Gentiana scabra Bge.、条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag.三花龙胆Gentiana triflora pall.或坚龙胆Genttana regescens Franch. 的干燥根及根茎。前三种习称“龙胆”,后一种习称“坚龙胆”。最近在药品检验中发现坚龙胆药材混有伪晶,经鉴定为毛莨科植物多叶唐松草Thalictrum foliolosum DC.的根。以前未见报道,现鉴别如下。 1 实验材料 1.1 龙胆苦甙、盐酸小檗碱对照品为中国药品生物制品检定所提供。龙胆药材本所存标本。

坚龙胆抗炎活性部位筛选及抗炎机制探讨

目的:筛选坚龙胆抗炎作用的活性部位,并研究其抗炎机制。方法:分别选用ICR小鼠180只,随机分为18组,分别为正常组,模型组,醋酸地塞米松组(5mg·kg-1),坚龙胆乙醇粗提物、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水各层低、中、高剂量组(6,3,1.5g·kg-1),除正常组外,采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型、冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性模型,分别ig给予相应药物,正常组和模型组给予等体积的5%聚山梨酯-80,每天1次,连续7d,检测小鼠的耳肿胀度及小鼠腹腔毛细血管通透性。取180只SD大鼠,同上方式分组及给药,采用角叉菜胶致大鼠足跖肿胀造模,进行抗炎活性筛选;另取大鼠50只,随机分为5组,分别为空白组,模型组,阳性药醋酸地塞米松组(5mg·kg-1),乙醇粗提物组(6g·kg-1),水部位组(6g·kg-1)。每日ig1次,连续7d,采用角叉菜胶致大鼠胸腔炎症造模,测定胸膜炎大鼠胸腔渗出液丙二醛(MDA),前列腺素E2(PGE2),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量以及肺组织一氧化氮(NO),PGE2,TNF-α,IL-1β和MDA含量。结果:与模型组比较,各模型组小鼠耳廓肿胀、小鼠腹腔毛细血管通透性、大鼠足跖肿胀、大鼠胸腔及肺组织的炎症因子NO,PGE2,TNF-α,IL-1β,MDA均明显增高(P<0.01);与空白组比较,水部位高、中剂量(6,3g·kg-1)对二甲苯致小鼠耳廓肿胀,急性炎症导致的腹腔毛细血管通透性,角叉菜胶引起的大鼠足跖肿胀均有显著抑制作用(P<0.05,P<0.01),其余部位活性弱或基本无活性,坚龙胆水部位组(6g·kg-1)能抑制胸腔液MDA,PGE2,TNF-α,IL-1β含量升高(P<0.01),坚龙胆水部位组(6g·kg-1)能抑制肺组织NO,MDA,PGE2,TNF-α,IL-1β含量升高(P<0.01)。结论:坚龙胆水部位为抗炎活性部位,抗炎机制可能与影响炎症介质产生和抗氧化作用有关。

贵州道地药材坚龙胆指纹图谱研究

坚龙胆为龙胆科植物坚龙胆Gentiana rigescens Franch.的根及根茎,主产于广西、贵州、四川、云南等省[1],为贵州道地药材。对其质量控制,目前主要以单一有效成分含量作为其质量控制的指标,从而将药材本身内部各种成分的综合作用割裂开来,不能准确反映中药材的质量,可能离反映中药的整体疗效的距离越远[2-3]。因此。

基于极性导向下的龙胆与坚龙胆HPLC特征图谱研究

目的建立龙胆与坚龙胆的HPLC特征图谱。方法基于极性导向分离和富集技术,建立龙胆与坚龙胆的HPLC特征图谱。通过相似度分析、聚类分析、主成分分析对特征图谱进行评价。结果龙胆或坚龙胆先经水提取,再经乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯萃取部位的HPLC指纹图谱具有明显的特征性。21批龙胆、坚龙胆整体相似度为0.29~0.95;除S4外,6批龙胆的整体相似度为0.82~0.99;14批坚龙胆整体相似度为0.75~0.99,其中10批相似度大于0.90。聚类分析中,样品聚为3类：S4、龙胆、坚龙胆。主成分分析中,21批次的龙胆和坚龙胆样品清晰地分为两类,其中S4与其余批次龙胆样品相距较远。结论所建立特征图谱能够有效鉴别龙胆与坚龙胆,可用于龙胆药材和饮片的质量控制。