坚龙胆中的一个新裂环烯醚萜甙(英文)

从坚龙胆(Gentianarigescens)的根中分离得到1个新的裂环烯醚萜甙,命名为坚龙胆甙A(1),以及8个已知化合物龙胆苦甙(2),6′-O-β-D-吡喃葡萄糖基-龙胆苦甙(3),马钱子酸(4),6′-O-β-D-吡喃葡萄糖基-马钱子酸(5),獐牙菜甙(6),2′-(邻,间-二羟基苯甲酰基)-獐牙菜甙(7),獐牙菜苦甙(8),四乙酰开联番木鳖甙(9)。它们的化学结构通过现代波谱解析得以鉴定。化合物3,5和9为首次从坚龙胆中分离得到。

坚龙胆药材产品质量分级标准研究

目的:通过测定坚龙胆产品主要性状和主成分含量,探讨其产品主要性状与质量评价指标的相关性以及初步确立质量分级标准划分的合理性,为制订坚龙胆的质量标准提供实验依据。方法:使用SPSS和DPS统计分析软件,对所测数据进行K-均值聚类和相关性分析。结果:坚龙胆产品主成分与产品的5个主要性状关联度由大到小依次为根粗>须根数>根及根茎长>根及根茎鲜重>根及根茎干重,坚龙胆产品质量可分为3个等级。坚龙胆的5个产品主性状中,与有效成分关联度最大的是根粗,关联度为0.7943,而根及根茎鲜重和根及根茎干重对有效成分含量的关联度相对较小,约0.5。结论:生产中应把根粗作为高产和高有效成分含量的重点选择性状。坚龙胆产品质量的3个等级数据可为研究坚龙胆质量控制标准提供参考依据。

贵州产坚龙胆组织培养体系的建立

以贵州野生坚龙胆(Gentiana rigescens Franch)带有顶芽或腋芽的茎段作为外植体,建立坚龙胆的组织培养体系。结果表明,适宜的不定芽诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,最佳的增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA,最适生根培养基为1/2MS+0.1 mg/L IBA。在组织培养过程中还观察到了瓶苗开花的现象。

野生坚龙胆及其组培苗中龙胆苦苷的含量分析

利用含有α-萘乙酸(NAA)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)和激动素(KT)等激素的MS固体培养基,对野生坚龙胆进行组培苗诱导培养。同时,应用高效液相色谱技术对野生坚龙胆和其组培苗的根、茎和叶中的龙胆苦苷进行含量分析和比较研究。结果发现,野生坚龙胆中的龙胆苦苷主要储存于根部,而组培坚龙胆中龙胆苦苷在根中的含量甚微,主要集中在茎、叶部位,且在出根初期组培坚龙胆叶中的龙胆苦苷含量近似于或略大于野生坚龙胆根中的含量。研究结果提示,坚龙胆中的绿色组织是龙胆苦苷合成的部位,这些部位同时具有龙胆苦苷的储藏功能。

坚龙胆的快速繁殖

对野生坚龙胆的腋芽进行诱导、筛选和培养 ,得到芽与根的优化培养基和培养条件 ,建立了无性繁殖培养系 ,获得完整植株 ,并移栽成功。

贵州不同地区坚龙胆中龙胆苦苷含量测定

目的测定贵州产坚龙胆中龙胆苦苷的含量,并评价不同产地坚龙胆的质量。方法采用高效液相色谱,Alltima C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(30:70)为流动相;流速1.0 mL.min-1;检测波长为270 nm;柱温为30℃。利用正交实验以龙胆苦苷含量为指标研究了坚龙胆的最佳提取方法。结果龙胆苦苷在0.08～0.64 mg.mL-1(r=0.999 9)范围内与峰面积线性关系良好;平均回收率为102.4%,RSD为1.69%(n=5)。测定了11个产地坚龙胆中龙胆苦苷的含量在2.113%～4.808%间。结论贵州不同地区间龙胆质量均符合《中华人民共和国药典》2005年版要求,各地区之间无明显差异。

坚龙胆酒炙前后HPLC指纹图谱对比研究

目的:研究坚龙胆酒炙前后HPLC指纹图谱的差异。方法:采用梯度洗脱法,分别对10批坚龙胆饮片生品及相应的酒龙胆进行HPLC测定,流动相为乙腈-0.1%磷酸线性梯度洗脱,检测波长225 nm,记录时间65 min。采用中国药典委员会指纹图谱相似度评价软件进行数据处理。结果:10批坚龙胆饮片生品及酒龙胆的指纹图谱相似度分别在0.935～0.997、0.964～0.999之间,以饮片生品指纹图谱的共有模式为对照,酒龙胆的相似度亦大于0.900。结论:酒炙对坚龙胆化学成分影响不大,但改变了成分间量的比例关系。

坚龙胆中龙胆苦苷含量的测定

为扩展坚龙胆中龙胆苦苷含量测定方法及坚龙胆药材资源的更好利用和临床应用,采用高效毛细管区带电泳法(简称HPCE)测定坚龙胆中龙胆苦苷含量,并对坚龙胆的不同部位、不同炮制品中龙胆苦苷含量进行测定。结果表明:HPCE法测定龙胆苦苷在0.06～0.48 mg/mL呈良好的线性关系(r=0.999 3),平均回收率为101.31%,RSD为1.99%,该方法准确性、重现性好;坚龙胆不同部位、不同炮制品中龙胆苦苷含量有较大差异,其根含量>叶含量>茎含量,生品>炮制品。

坚龙胆环烯醚萜甙的HPLC分析

应用HPLC分析方法，建立了坚龙胆中5个主要环烯醚萜甙的含量测定方法。在ZORBAXSB—C18色谱柱，乙腈-0．2％磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流速1．0mL/min，柱温为40℃，检测波长254nm的色谱条件下，化合物得到良好的分离，并具线性相关。本方法操作简便，重现性好，灵敏度高。对不同产地的样品进行比较分析的结果表明，产地对坚龙胆中环烯醚萜甙的组成和含量有显著的影响。

坚龙胆不同部位中龙胆苦苷的含量比较

目的:测定坚龙胆不同部位龙胆苦苷的含量,并评价坚龙胆药材不同部位的质量。方法:采用HPLC法,色谱条件为Agilent ZORBAX SB C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为甲醇∶水(27∶73),检测波长274nm,流速1.0ml/min,柱温25℃。结果:测定了坚龙胆药材不同部位中龙胆苦苷的含量。龙胆苦苷在0.21～10.5μg范围内线性关系良好,r值为0.999 8,龙胆苦苷平均回收率为98.01%,RSD为2.50%。结论:坚龙胆药材不同部位龙胆苦苷含量均高于《中国药典》2005年版要求,表明坚龙胆全草均可入药。

正交试验法优选坚龙胆中龙胆苦苷的提取工艺

目的:优选坚龙胆中龙胆苦苷的提取工艺。方法:以龙胆苦苷的含量为指标,采用高效液相色谱法进行含量测定,采用L(934)正交设计试验,对提取次数、提取溶剂倍数和提取时间3因素进行考察,以确定最佳提取工艺。结果:提取3次,用10倍量的甲醇,提取时间每次20min为最佳提取工艺。结论:该工艺合理,且稳定可行。

贵州不同产地坚龙胆药材及饮片中龙胆苦苷含量测定

目的测定贵州产坚龙胆中龙胆苦苷的含量,并评价不同产地坚龙胆药材及饮片的质量。方法利用正交试验研究了龙胆苦苷的最佳提取方法。结果测定了贵州不同产地坚龙胆药材及饮片中龙胆苦苷的含量。结论贵州不同地区间龙胆药材及饮片质量均符合《中国药典》2005年版要求,各地区之间无明显差异。

植物激素对坚龙胆种子萌发的影响

[目的]探讨植物激素对坚龙胆种子萌发的影响。[方法]以坚龙胆成熟种子为试验材料,采用正交试验设计研究赤霉素(GA3)、6-苄基腺嘌吟(6-BA)、吲哚乙酸(IAA)及浸种时间对坚龙胆种子发芽情况的影响。[结果]坚龙胆种子发芽过程中以200 mg/L GA3+5mg/L 6-BA+5 mg/L IAA配比并浸种48 h处理的效果最好,种子发芽率达93%以上,种子开始发芽时间和发芽持续时间短,发芽势和发芽指数最高。[结论]经过正交试验设计优选出影响坚龙胆种子发芽率的作用大小为IAA>GA3>浸种时间>6-BA;经过植物激素处理可以提高坚龙胆种子的发芽率。

基于HPLC指纹图谱结合化学计量学的龙胆和坚龙胆药材鉴别及质量评价

目的建立龙胆和坚龙胆药材的HPLC指纹图谱,并结合化学计量学分析法对龙胆和坚龙胆进行鉴别及质量评价。方法采用HPLC对不同产地的20批龙胆和17批坚龙胆进行指纹图谱研究,建立龙胆和坚龙胆的对照指纹图谱,采用液质联用技术对龙胆和坚龙胆指纹图谱共有峰进行指认,并结合聚类分析和主成分分析对龙胆和坚龙胆进行鉴别及质量评价。结果龙胆指纹图谱有13个共有峰,坚龙胆指纹图谱有10个共有峰,其中3个峰分别为马钱苷酸、獐牙菜苦苷和龙胆苦苷;龙胆和坚龙胆的指纹图谱存在明显差异,利用坚龙胆的共有峰7能够对二者进行鉴别;根据共有峰的聚类分析和主成分分析结果,将龙胆和坚龙胆分为3类;从主成分得分来看,龙胆药材质量优于坚龙胆。结论本研究建立的方法能高效、准确鉴别龙胆和坚龙胆药材,并有效对其质量进行评价。

大理白族自治州不同居群坚龙胆叶中裂环烯醚萜类物质含量的研究

目的:探讨大理白族自治州(简称大理州)不同居群坚龙胆叶中裂环烯醚萜类物质(龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷)的含量,为坚龙胆优良品种筛选及其开发应用提供参考。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定大理州不同居群坚龙胆叶中裂环烯醚萜类物质含量,建立其HPLC指纹图谱,并运用单因素方差分析、总含量聚类分析和主成分分析法对不同居群坚龙胆叶中裂环烯醚萜类物质的含量进行研究。结果:大理州不同居群坚龙胆叶中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷的含量及其总含量差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);确定了HPLC指纹图谱中12个共有峰,除感通居群外,其余共有峰HPLC指纹图谱相似度均在0.972以上,并指认了其中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷3个与活性相关的特征峰;不同居群坚龙胆叶中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷总含量聚类分析和HPLC指纹图谱主成分分析结果相同。结论:大理州不同居群坚龙胆叶中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷含量差异较大;除感通居群外,不同居群坚龙胆叶中裂环烯醚萜类物质相似度较高。

相同产地3种龙胆属植物根及根茎中化学成分的差异分析

目的 为从龙胆属植物中挖掘坚龙胆可替代资源提供依据。方法 采用高效液相色谱(HPLC)法对3种龙胆属植物(坚龙胆、头花龙胆、微籽龙胆)根及根茎中4种活性成分(龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷)的含量进行测定;采用超高效液相色谱-电喷雾-四极杆飞行时间高分辨质谱联用(UPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对上述植物根及根茎中化学成分进行鉴定,并进行主成分分析(PCA)。结果 头花龙胆与坚龙胆根及根茎中均含有龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷这4种活性成分,其中头花龙胆和坚龙胆根及根茎中龙胆苦苷含量均是2020年版《中国药典》(一部)限量标准的4倍以上;而微籽龙胆根及根茎中仅检测到獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷,其中的獐牙菜苷和苦龙胆酯苷含量分别是坚龙胆的34.12、8.81倍。通过UPLCESI-Q-TOF-MS技术从3种龙胆属植物根及根茎中共鉴定出33种化合物,主要为环烯醚萜类成分;此外,坚龙胆和头花龙胆中还含有酮类成分,微籽龙胆中还含有黄酮类成分。PCA结果显示,头花龙胆和坚龙胆差异较小,而微籽龙胆与坚龙胆差异较大。结论 同一产地头花龙胆与坚龙胆根及根茎的化学成分差异较小,存在可替代性;而微籽龙胆与坚龙胆根及根茎的化学成分差异较大,不能代替坚龙胆入药。

贵州道地药材坚龙胆HPLC特征图谱研究

目的:建立贵州道地药材坚龙胆HPLC特征图谱分析方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-1%冰醋酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～50 min:A为5%→20%,B为95%→80%),流速:1.0 mL/min。检测波长为254 nm,柱温为30℃。以中药色谱特征图谱相似度评价系统的操作规范(2004 A版)软件计算。结果:不同产地的21批坚龙胆样品的相似度在0.95以上,确定了7个共有峰。结论:该方法简单、准确、重复性好,为坚龙胆的质量控制提供了有效的方法。

坚龙胆与伪品多叶唐松草鉴别

龙胆为常用中药,来源于龙胆科植物龙胆Gentiana scabra Bge.、条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag.三花龙胆Gentiana triflora pall.或坚龙胆Genttana regescens Franch. 的干燥根及根茎。前三种习称“龙胆”,后一种习称“坚龙胆”。最近在药品检验中发现坚龙胆药材混有伪晶,经鉴定为毛莨科植物多叶唐松草Thalictrum foliolosum DC.的根。以前未见报道,现鉴别如下。 1 实验材料 1.1 龙胆苦甙、盐酸小檗碱对照品为中国药品生物制品检定所提供。龙胆药材本所存标本。

海拔对苍山地区野生滇龙胆品质的影响

目的:本论文旨在研究海拔对苍山地区野生滇龙胆(Gentiana rigescens Franch.)品质的影响。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法对滇龙胆根茎叶中龙胆苦苷的含量进行测定,并将各部分龙胆苦苷含量与海拔高度进行相关性分析。结果:苍山地区滇龙胆品质优良,根茎叶三部分龙胆苦苷含量均超过《中国药典》规定,根部龙胆苦苷含量在3.9%~8.2%之间。此外,根部龙胆苦苷含量与海拔高度有显著线性相关性,其线性拟合方程为y = −0.2752 + x * 1.35048E−4。结论:苍山地区野生滇龙胆品质优良;在海拔2325.3~2599.7 m区间内,滇龙胆品质随海拔上升而升高;苍山地区海拔2400~2700 m范围内,是潜在的优良人工滇龙胆种植区。