腺垂体细胞促性腺激素分泌及其体外培养研究进展

下丘脑-垂体-性腺轴是控制动物性激素分泌的主要内分泌系统。围绕该系统开展深入研究对于提高家畜繁殖性能及治疗繁殖疾病等方面具有重要意义。下丘脑调控促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)的分泌,该激素又进一步调控腺垂体,促进其分泌促卵泡素(follicle stimulating hormone,FSH)和促黄体素(luteinizing hormone,LH)。建立腺垂体细胞体外培养体系可为揭示腺垂体激素分泌机理的研究提供方法学基础。介绍了腺垂体在脑室中所处的位置以及腺垂体细胞的类型和主要分泌的激素,综述了腺垂体细胞的分离培养和鉴定方法,以及外源物质对体外培养腺垂体细胞分泌促性腺激素(gonadotropin,Gn)影响的研究进展,以期为深入研究下丘脑-垂体-卵巢轴的功能及机制,优化与完善腺垂体细胞体外培养体系,筛选Gn分泌调节药物提供参考。

一例Han-Wistar大鼠垂体细胞瘤的病理学分析

在为期两年的致癌试验中发现空白对照组Han-Wistar大鼠出现1例垂体细胞瘤。临床观察及大体剖检未见明显异常。HE染色结果显示,垂体神经部肿瘤组织呈结节状增生,边界清晰,压迫周围正常组织;肿瘤细胞与神经胶质细胞类似,细胞核呈圆形或卵圆形,细胞质丰富呈嗜酸性或空泡状;肿瘤细胞分化良好,细胞多形性不明显,核分裂象可见;部分肿瘤细胞呈假菊形团状排列。免疫组织化学染色结果显示,胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)及S-100蛋白呈阳性。结合HE染色及免疫组织化学染色结果诊断该肿瘤为自发性良性垂体细胞瘤。

鞍上区垂体细胞瘤1例

患者女,51岁。因发热、头痛20余天就诊。查体:无肢体抽搐及肢体活动不灵。实验室检查:促肾上腺皮质激素(ACTH)、生长激素(GH)、雌二醇(E2)均在正常范围内;泌乳素(PRL)轻度升高。鞍区MRI平扫:鞍上区见大小约2.0 cm×1.9 cm×1.8 cm的类椭圆形异常信号;呈等、稍长T_(1)、等长T_(2)信号,信号均匀,边缘光整;增强扫描呈均匀明显强化。病灶邻近下丘脑和视束略受压,内见不均匀略长T_(1)长T_(2)水肿信号,边界欠清,病灶向上挤压第三脑室;垂体柄显示不清,向下挤压垂体,垂体后叶T_(1)WI高信号未见显示(图1)。双侧海绵窦及颈内动脉形态及信号未见异常。术前诊断:实性颅咽管瘤。

人胚腺垂体细胞库的初步建立

目的初步探讨建立人胚腺垂体细胞库的方法及冷冻移植物复温后的形态和功能。方法 将人胚腺垂体细胞培养至第5天冷冻,15天后复温再培养,与单纯培养组相对照,相差显微镜下观察细胞形态,苔盼蓝测拒染率及检测激素分泌功能。结果 冷冻复温后垂体细胞存活率平均达78.2％;光镜下生物学状态无改变;GH分泌细胞复温后第5-7天状态最佳;PRL、TSH分泌水平差。结论本方法适于建立人胚腺垂体细胞库用于治疗垂体性侏儒症,移植时机为复温后5-7天。该冷冻方法不适用于PRL分泌细胞,培养条件不适用于TSH分泌细胞。

垂体细胞瘤及其罕见室管膜样亚型的临床病理分析

目的探讨垂体细胞瘤及其罕见的室管膜样亚型的临床病理学特征和免疫表型、诊断和鉴别诊断。方法应用HE和免疫组化En Vision两步法染色观察7例垂体细胞瘤(6例经典型和1例室管膜样亚型)的组织学形态和免疫表型,并复习相关文献。结果镜下6例经典型肿瘤均由致密的肥胖梭形细胞构成,瘤细胞呈短束状和车辐状排列;而1例室管膜样亚型,瘤细胞呈漩涡状和乳头状排列,伴明显的血管周菊形团结构。免疫表型:所有肿瘤均弥漫表达S-100蛋白和TTF-1,而IDH1R132H、Olig-2、NF、CD34、Syn、Cg A及垂体激素均阴性,Ki-67增殖指数均<2%。不同的是,经典型病例GFAP和EMA仅灶阳性,室管膜样亚型中GFAP呈弥漫阳性,且>50%瘤细胞EMA点状阳性。结论垂体细胞瘤是起源于神经垂体细胞罕见的低级别胶质瘤,该实验有助于扩大垂体细胞瘤的形态学谱系和对新亚型的认识,对病理的鉴别诊断和临床治疗有益。

鞍区垂体细胞瘤10例临床病理分析

目的 探讨垂体细胞瘤的临床病理学特征。方法 回顾性分析10例垂体细胞瘤的临床病理资料,并复习相关文献。结果 10例患者中男性4例,女性6例,年龄4～68岁。肿瘤由伸长的双极梭形细胞构成,肿瘤细胞表达S-100（10/10）、vimentin（10/10）、GFAP（10/10）、EMA（4/10）,不表达CKpan,Ki-67增殖指数1%～5%。随访9例患者,均存活,其中1例女性患者术后2年复发。结论 垂体细胞瘤是一种低级别、好发于鞍区的梭形细胞肿瘤,成人多见,肿瘤易与毛细胞星形细胞瘤、神经垂体颗粒细胞瘤等混淆,免疫组化标记有助于鉴别诊断。手术完整切除预后良好,不完全切除者有复发可能。

米非司酮对离体大鼠垂体细胞促黄体激素分泌的影响及其机制

本实验应用垂体细胞体外培养模型 ,观察了米非司酮 (MP)对GnRH、高浓度细胞外K+([K+]e)和蛋白激酶C激活剂PMA诱导的LH分泌的影响。结果证实MP可以剂量和时间依赖方式抑制GnRH诱导的LH分泌 ,并可拮抗P调节GnRH诱导的LH分泌效应。同时发现 10 -7mol/LMP短时间处理 4h能抑制 6 0mmol/LKCl和 10 -8mol/LPMA诱导的LH分泌 ,而 10 -7mol/LP短时间处理则起促进作用。当处理时间延长为 5 2h时 ,P对 6 0mmol/LKCl和 10 -8mol/LPMA诱导的LH分泌无明显作用 ,P也仅对 6 0mmol/LKCl刺激的LH分泌起抑制作用 ,但不影响 10 -8mol/LPMA诱导的LH分泌。当P和MP同时处理时 ,则MP可逆转P对高 [K+]e和PMA诱导的LH分泌的调节作用 ,表明MP影响GnRH诱导的LH分泌的机制可能与MP影响电压依赖性钙离子通道和PKC的活性有关。

大鼠腺垂体细胞的体外原代培养及其GTH分泌活动的观察

本文旨在体外进行原代培养大鼠垂体细胞并观察GTH分泌活动规律;在每日观察细胞生长状态并分组检测其FSH、LH分泌水平,及做免疫组化染色实验,连续5d;结果表明,第7天时,细胞状态最佳,FSH、LH分泌水平最高,GTH的阳性率最大;所以大鼠垂体细胞体外培养生长最旺盛的时期是第7天。

延边黄牛与韩延牛血液Exosome对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响

［目的］从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome（外胞体），研究2种外胞体对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响。［方法］通过超高速离心等方法，从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome，并以100 ng/mL的浓度分别转染给原代培养的延边黄牛垂体细胞培养12、24和48 h，对细胞上清液中GH含量进行检测。［结果］ 电镜下延边黄牛与韩延牛血液Exosome均呈圆形或椭圆形的双层膜小囊泡，直径均为30~100 nm，膜结构完整。韩延牛Exosome处理组的延边黄牛垂体细胞GH mRNA表达显著高于延边黄牛Exosome处理组（P〉0.05）。韩延牛血液Exosome处理组垂体中GH的含量显著高于延边黄牛血液Exosome处理组（P〉0.05）。［结论］延边黄牛和韩延牛血液中的Exosome对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响有明显差异。

垂体细胞瘤5例并文献复习

目的：探讨垂体细胞瘤的临床病理学特征及诊断要点。方法复习5例垂体细胞瘤的临床资料、影像学、组织学及免疫组化结果,并结合文献探讨其诊断及鉴别诊断。结果5例垂体细胞瘤中女性3例,男性2例,年龄22-49岁,3例为体检时或偶然发现,头颅CT和MIR示鞍区占位。镜下见瘤细胞长梭形、短梭形,胞核卵圆形,束状、交织状排列,部分细胞多形性,核分裂象罕见。免疫表型：肿瘤均表达vi-mentin、S-100、TTF-1,Ki-67增殖指数＆lt;2%,部分表达EMA、GFAP,不表达垂体激素。结论垂体细胞瘤是起源于鞍区和鞍上区神经垂体细胞的罕见肿瘤,生长较缓慢,属于WHOⅠ级,实际工作中需与毛细胞型星形细胞瘤、梭形嗜酸细胞瘤和脑膜瘤等进行鉴别。

褪黑素对体外培养绵羊垂体细胞分泌FSH和LH的影响

本文采用体外细胞培养和放射免疫测定法(RIA)的方法,研究了褪黑素(MLT)对季节性繁殖的蒙古母羊垂体细胞分泌促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的作用。结果表明:当单独用递增的MLT(10、100、1000、2000pg/mL)处理原代垂体细胞时,随时间的延长FSH的分泌量极显著下降(P<0.01),但对LH的基础分泌没有影响;无论用10IU/mLhCG单独刺激,还是用不同剂量MLT与10IU/mLhCG共同刺激垂体细胞,FSH和LH的分泌都极显著高于对照组(P<0.01),但与MLT的剂量没有关系。

垂体细胞瘤1例

患者女性，30岁，因月经不调伴视物模糊4年人院。视力视野检查见双颞侧偏卣，其余体格检查均正常。术前神经内分泌检杏：泌乳素轻度升高，为72．3ng／ml（正常范围2．8～29．2ng／m1），垂体MRI平扫＋增强示鞍上区类圆形较大肿物影，直径约3．5cm，边界清晰，增强扫描后明显均匀强化，正常垂体清晰可见（图1）。

成年大鼠神经垂体垂体细胞超微结构观察

本研究在电镜下对6只成年雄性大白鼠的神经垂体进行观察,以了解垂体细胞的形态学特点及其功能意义。垂体细胞可分为4型,其中星形垂体细胞和室管膜垂体细胞的形态特征,与中枢神经系统的神经胶质细胞相似。暗垂体细胞富含线粒体,其功能尚难评价。分泌型垂体细胞的胞浆中有分泌颗粒存在,提示该型细胞可能具有分泌功能。细胞间池是神经膨大进行分泌活动的场所,其周围有较多富于小泡的神经膨大。形态学证据说明,垂体细胞具有支持、营养和清除坏死物的功能。此外,由于垂体细胞之间缝隙连接及垂体细胞与神经膨大之间突触样连接的存在,表明该细胞还可能具有传递兴奋的作用。

垂体细胞瘤的临床诊治进展

垂体细胞瘤是起源于成年人神经垂体或者垂体柄神经胶质细胞的良性实体性梭形星形细胞肿瘤,手术肉眼下全切能够临床治愈。本文对英文文献报道的共26例垂体细胞瘤的临床表现、影像学特征、病理学特点、临床治疗方法及其预后做一综述,以提高对该病的认识和对鞍区占位性病变的鉴别诊断。

垂体细胞瘤临床病理观察

目的探讨垂体细胞瘤的临床病理学特点及诊断要点。方法对2例垂体细胞瘤的临床资料、影像学、病理形态学及免疫组化结果进行分析,并结合文献探讨其诊断及鉴别诊断。结果 2例患者的头颅MRI提示鞍区占位。镜下可见短梭状双极梭形细胞成分,细胞密度较低,排列稀疏,呈纤维束状排列,细胞核圆形或伸长形,局部可见血管结构,未见核分裂。免疫组化:vimentin、S-100和GFAP均(+)、Ki-67增殖指数<1%,NEU-N和EMA均(-)。结论垂体细胞瘤起源于成人神经垂体或漏斗,较为罕见,由梭形细胞构成,生长缓慢,需与正常漏斗组织、毛细胞星形细胞瘤、梭形嗜酸细胞瘤等进行鉴别诊断。

伴有Cushing综合征的垂体细胞瘤一例报告

病例介绍 患者 女性．46岁。因罹患高血压5年，向心性肥胖2年，于2007年4月12日入院：患者5年前因头晕检查发现血压升高（具体不详），服药后可控制在正常值范围100～110／70～80mmHg（1mmHg=0．133kPa），近5年来体质量增加15kg，尤以最近2年增加明显，主要以腹部、颈后部、面部为主，四肢变细，并出现脸圆、脸红．皮肤容易起瘀斑等症状及体征．其他无异常。

垂体细胞增生所致库欣病术后复发的诊断和处理

目的讨论垂体细胞增生所致库欣病经蝶术后复发的诊断和处理。方法根据临床症状,内分泌学检查和蝶鞍区MRI检查,5例病人被诊断为垂体ACTH腺瘤而行经蝶手术,术后病理为垂体细胞增生。术后1例症状无改善,4例症状改善3～11个月后复发皮质醇增高为降低皮质醇例行垂体放疗和肾上腺切除术,。2,3例行肾上腺切除术。在肾上腺切除的例中例症状32再次复发复查,MRI发现垂体腺瘤并再次经蝶手术,术后病理为垂体腺瘤。结果随诊1～5年,行二次经蝶手术的2例病人皮质醇降至正常行垂体放疗和肾上腺切除术者因垂体功能低下用强的松替代治疗结论当垂体细胞增生病人术后症状复发影像学。检查发现垂体肿瘤时应再次经蝶手术没有发现垂体腺瘤时可行肾上腺切除和垂体放疗。

低氧对CRF、AVP和NE刺激体外培养腺垂体细胞生成cAMP的影响

本文探讨了ＣＲＦ，ＡＶＰ及ＮＥ对体外培养大鼠腺垂体细胞生成ｃＡＭＰ的作用。ＣＲＦ刺激体外培养大鼠腺垂体细胞内ｃＡＭＰ的生成，且浓度与效应正相关。ＡＶＰ未引起细胞内ｃＡＭＰ差异性变化（Ｐ＞０．５）。ＮＥ使培养腺垂体细胞内ｃＡＭＰ水平降低。低氧使ＣＲＦ刺激ｃＡＭＰ生成的作用降低。而ＡＶＰ及ＮＥ可能是通过其它胞内信息通路。

牛垂体细胞体外培养条件下催乳素分泌的调节—TRH、 GnRH、LH和PRL的影响

利用牛垂体细胞体外无血清培养技术,研究了促甲状腺素释放素(TRH)、促性腺激素释放素(GnRH)、促黄体激素(LH)和催乳素(PRL)对牛垂体细胞PRL分泌的调节。细胞在培养箱内预培养24小时后开始各项处理,以后隔24小时采集培养液一次,并换新的相同处理的培养液。结果表明:GnRH和TRH在第一次处理时均能显著增加PRL的分泌。加入1、10、100ng/ml的GnRH可使PRL分泌量分别增加53％(P<0.05)、111％(P<0.01)和60％(P<0.01),而TRH只有在10、100ng/ml的剂量时明显引起PRL释放增加(P<0.01)。第二次处理时细胞对TRH的反应消失,但对GnRH的反应却发生了逆转,PRL分别降低了70％(P<0.05)、68％(P<0.05)和73％(P<0.05)。表明GnRH和TRH在培养初期具有促进垂体细胞释放PRL的作用。LH(1、10、100ng/ml)对牛垂体细胞PRL的分泌无影响。但LH和TRH合用时,100ng/ml LH可明显地降低由TRH引起的PRL分泌(P<0.05)。PRL本身对牛垂体细胞的分泌有自我调节作用,100、1000ng/ml的PRL处理细胞使其分泌的PRL显著下降,分别降低70％(P<0.05)和100％(P<0.001)。此外1000ng/ml的PRL可显著地抑制由GnRH在第一次处理时引起的PRL释放。本实验在垂体细胞水平说明多种激素对PRL的分泌调节具有调控作用。