IV型胶原纤维及其酶在胃癌浸润转移中的作用

采用ＩＶ型胶原纤维单抗和ＩＶ型胶原酶多抗检测７６例胃癌。发现ＩＶ型胶原纤维染色所示基底膜明显缺损，在分化较差者及浸润型胃癌中（＞７５％）明显高于分化较好者及膨胀型胃癌（Ｐ＜０．００５）。ＩＶ型胶原酶明显增加在分化较差者，浸润型及有淋巴结转移者（８０％左右）显著高于分化较好者，膨胀型及无淋巴结转移者（Ｐ＜０．０５）。说明分化程度低的胃癌产生更多ＩＶ型胶原酶，严重破坏基底膜，促进浸润和淋巴结转移。其可作为恶性程度指标。

Ⅲ型胶原纤维在实验性特发性肺纤维化早期的动态研究

目的 通过动物实验的方法 ,动态地观察Ⅲ型胶原在平阳霉素诱导的兔肺纤维化中的变化。方法 12只新西兰白兔 ,在经支气管内灌注平阳霉素诱导纤维化模型之后的第 7、14、2 1和 2 8天 ,分别随机取 3只处死 ,分离两侧肺组织取材进行免疫组化染色分析。结果 与正常对照组比较 ,尽管第 1、2周时肺内的改变均以炎性渗出和实变为主 ,但可在增厚的肺泡隔内发现散在的点状、线状红棕色增生Ⅲ型胶原。 3、4周后随炎性反应进行性减弱 ,被染色的Ⅲ型胶原反而显著地进行性增多 ,在病变区形成杂乱的网格样分布。而且Ⅲ型胶原免疫组化染色对胶原显示的敏感性显著高于VG染色。结论 纤维化的早期胶原沉积以Ⅲ型胶原的增生为主 ,大量Ⅲ型胶原的沉积表明纤维化处于活动阶段或早期状态 ,从此意义上这个观察过程均可称作早期阶段。这对于临床通过穿刺组织分析来评价疾病的发展是非常有价值的。

牛跟腱Ⅰ型胶原纤维的微观结构与理化性能分析

采用酸酶结合法成功制备了牛跟腱Ⅰ型胶原纤维,其二级结构与Ⅰ型胶原的结构特征相符;AFM结果发现,胶原纤维粗细均匀,具有D周期横纹结构,直径为(135±0.20)nm,在溶液中分散均匀且呈现多孔的微观网络结构;其抗张强度与拉断伸长率分别达到1.293 MPa、93.77%;其疏水性能较纯Ⅰ型胶原有所提高,接触角为68.9°,吸水倍率、保水率与透水汽率分别为37.13%,19.44%和2749.77 g/(m2/d);其孔隙率为89.54%,平均累积吸附与累积解吸附的比表面积分别为8.4251和12.8046 m2/g,表现出孔体积大、比表面积小和孔尺寸大的特点。牛跟腱Ⅰ型胶原纤维的微观结构与理化性能分析对天然胶原纤维的深度加工、成型及应用提供了新的、可靠的理论依据。

川芎嗪干预早期膝骨关节炎大鼠软骨Ⅱ型胶原纤维α1基因与血管内皮生长因子mRNA及miR20b的表达

背景:课题组前期研究发现川芎嗪能明显降低骨关节炎关节液中NO、前列腺素E2水平,对减轻骨性关节炎的炎症有一定作用,但具体机制还不清楚。目的:观察川芎嗪治疗膝骨关节炎模型关节软骨中Ⅱ型胶原纤维α1基因、血管内皮生长因子mRNA及miR20b表达水平,并探讨川芎嗪治疗早期膝骨关节炎大鼠的作用机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、川芎嗪高剂量组、川芎嗪低剂量组、阳性对照组,后4组通过木瓜蛋白酶关节腔注射制作早期膝骨关节炎大鼠模型。造模后川芎嗪高、低剂量组分别灌胃川芎嗪100 mg/kg和50 mg/kg,阳性对照组灌服塞来昔布24 mg/kg;正常组、模型组灌服等量生理盐水。干预6周后取材,分别行鼠软骨大体组织学评分、qR T-PCR检测软骨Ⅱ型胶原纤维α1基因、血管内皮生长因子mRNA及miR20b的表达水平。结果与结论:(1)软骨Mankin评分:川芎嗪高、低剂量组和阳性对照组均较正常组高(P<0.05),较模型组低(P<0.05),且川芎嗪高剂量组<阳性对照组<川芎嗪低剂量组;(2)川芎嗪各剂量组和阳性对照组的Ⅱ型胶原纤维α1基因、血管内皮生长因子mRNA表达较正常组上调(P<0.05),较模型组下调(P<0.05),且川芎嗪高剂量组<阳性对照组<川芎嗪低剂量组;(3)川芎嗪各剂量组、阳性对照组及正常组的miR20b表达均较模型组上调(P<0.05),其中川芎嗪低剂量组<阳性对照组<川芎嗪高剂量组;(4)提示:川芎嗪对早期膝骨关节炎大鼠治疗具有积极作用,可能通过上调软骨中miR20b从而抑制血管内皮生长因子mRNA的表达,促进软骨的修复。

糖尿病大鼠骨折愈合早期局部骨痂组织中Ⅰ型胶原纤维表达和骨密度的变化

背景:糖尿病患者骨折愈合过程中局部骨痂形成较差,成骨细胞增殖能力下降,骨折延迟愈合或者不愈合,而Ⅰ型胶原纤维和钙质成分是骨痂的主要成分。目的:观察糖尿病大鼠骨折愈合早期过程中骨痂组织中Ⅰ型胶原纤维含量和骨密度的变化,分析糖尿病大鼠骨折愈合过程中骨折延迟愈合,或者不愈合的原因。方法:10只腹腔内注射链脲佐菌素破坏胰岛细胞诱导为糖尿病大鼠,10只为正常对照大鼠,腹腔内注射等容量生理盐水。2组大鼠均造成右胫骨斜形骨折,于伤后第1,2,4,6周取骨痂组织进行检测。结果与结论:正常对照组X射线片显示骨痂生成量多,骨折愈合程度明显优于模型对照组(P<0.01),各组Ⅰ型胶原纤维表达均呈上升趋势,在第2周达到峰值,第4周下降,至第6周进一步下降。模型对照组骨痂中Ⅰ型胶原纤维表达和骨密度升高幅度明显低于正常对照组(P<0.01)。提示糖尿病大鼠骨折愈合过程中较正常大鼠骨痂生成下降,骨痂中Ⅰ型胶原纤维表达和骨密度升高幅度同步下降。

复方中药青光安对兔慢性高眼压筛板结构及Ⅳ型胶原纤维含量的影响

目的:探讨复方中药青光安混悬液对慢性高眼压兔筛板结构及功能的影响。方法:健康白兔30只,体质量2.5～3.0kg,雌雄不拘。每组6只12眼,分为5组,A为正常空白组、B为模型组、C为青光安组、D为噻吗心安组、E为青光安联合噻吗心安组,建立慢性高眼压模型前、后第1wk内3d测1次眼压,2,5wk各测1次眼压。5wk处死家兔取视乳头及周围组织然后修剪得筛板组织,用免疫组化方法测Ⅳ型胶原纤维平均吸光度值,并在光镜及电镜下观察组织结构的变化。结果:40眼成功造模后当时;1,2,5wk眼压均>22mmHg。造模后5wk时各组眼压进行比较:青光安组眼压与模型组相比无明显差异(P>0.05),与其他治疗组及正常组相比有极显著差异(P<0.01);噻吗心安组与联合组眼压相比无明显差异,并且两组与正常组眼压相比亦无明显差异。造模后5wk正常组Ⅳ型胶原纤维平均吸光度值与联合组相比无显著差异,与其他3组相比有极显著差异(P<0.01);联合组与青光安组、噻吗心安组及模型组相比有极显著差异(P<0.01)。光镜、电镜结果表明,与模型组比较,治疗组巩膜筛板部纤维走向基本有序,无断裂、水肿,神经细胞胞质内线粒体大致正常,其中各组筛板结构病理改变程度由大到小依次为:噻吗心安组、青光安、联合治疗组。结论:青光安混悬液对慢性高眼压通过改善视网膜微循环起到筛板组织保护的作用,青光安联合噻吗心安明确降压后对筛板组织结构保护作用更为明显。

运动训练对大鼠房室结Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维组织结构及MMP-13表达的影响

目的:探讨有氧训练和大强度疲劳训练对大鼠房室结(AVN)Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维及基质金属蛋白酶13(MMP-13)表达的影响。方法:3月龄雄性Sprague-Dawley大鼠36只,随机分为安静对照组、有氧训练组和疲劳训练组3组。采用跑台训练方式分别建立大鼠有氧训练和疲劳训练模型,采用苦味酸-天狼猩红染色和透射电镜观察AVN区Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,免疫组织化学SABC法观察AVN区MMP-13表达的变化。结果:与安静对照组比较,有氧训练组AVN组织结构正常,Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维分布均匀且显著增多(P<0.05),Ⅰ/Ⅲ型胶原纤维比值无明显变化;MMP-13表达显著高于安静对照组(P<0.05)。与安静对照组和有氧训练组比较,疲劳训练组AVN区Ⅰ型胶原纤维增生异常,区域减少和扭曲,且I型胶原纤维显著增多(P<0.05),Ⅲ型胶原纤维超微结构出现断裂,且Ⅲ型胶原纤维显著减少(P<0.05),Ⅰ/Ⅲ型胶原纤维比值升高;MMP-13表达均显著高于安静对照组和有氧训练组(P<0.05)。结论:不同强度运动训练可使大鼠AVN区Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的形态结构和MMP-13的表达发生不同程度的变化,有氧训练可保护大鼠AVNⅠ、Ⅲ型胶原纤维结构正常,疲劳训练可造成AVN区Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维发生病理改变,推测可能与疲劳训练诱导MMP-13表达增加有关。

应用原子力显微镜对不同种属Ⅰ型胶原纤维微观结构的研究

目的 :利用原子力显微镜 (AFM)对猪和牛的Ⅰ型胶原蛋白在溶液中的聚集行为进行微观结构的形态学研究。方法 :将Ⅰ型胶原蛋白溶液 ,滴至新鲜剥离的云母片上 ,空气中干燥后 ,用原子力显微镜观察。结果 :发现来自猪和牛的I型胶原蛋白在浓度为 3 2 μg ml时以单体形式和聚集体形式混合存在 ,在浓度为 4mg ml时两种I型胶原蛋白自发装配成胶原纤维 ,形成多孔网状结构 ,孔隙大小为 :牛 ,10 0～ 15 0nm ;猪 ,170～ 2 0 0nm。孔隙率 :牛 ,5 75个 μm2 ;猪 ,193个 μm2 。平均粗糙度为 :牛 ,3 1nm ;猪 ,8 7nm。均方根粗糙度为 :牛 ,4 0nm ;猪 ,11 4nm。平均高度 :牛 ,5 0 9nm ;猪 ,5 2 3nm。Rp v :牛 ,72 1nm ;猪 ,10 2 7nm。结论 :利用原子力显微镜能够准确直观地观察到Ⅰ型胶原蛋白形成的胶原纤维的种属差异性 。

壮骨止痛方对去势雌鼠转化生长因子β1 mRNA及Ⅰ型胶原纤维mRNA表达的影响

目的:观察壮骨止痛方对去势雌鼠转化生长因子β1(Transforming growth factor-β,TGF-β1)mRNA及Ⅰ型胶原纤维mRNA表达的影响,并探究其治疗骨质疏松的具体机制。方法:将75只健康雌性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、壮骨止痛方组、无水乙醇提取A部位组,每组15只。除空白组、假手术组外,其余各组建立绝经后骨质疏松病理模型,假手术组去除卵巢周围相应体积脂肪。造模后5 d开始给药,13周后取股骨,原位杂交法检测分析骨组织中Ⅰ型胶原纤维mRNA和TGF-β1 mRNA的表达。结果:模型组TGF-β1 mRNA和Ⅰ型胶原mRNA表达明显低于空白组(P<0.05),壮骨止痛方组、无水乙醇提取A部位组TGF-β1 mRNA和Ⅰ型胶原纤维mRNA表达明显高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:壮骨止痛方可能是通过提高TGF-β1 mRNA和Ⅰ型胶原纤维mRNA的表达,促进成骨细胞分化,发挥改善骨质疏松的效应。

米非司酮对早孕妇女血清层粘连蛋白及Ⅳ型胶原纤维的影响

目的探讨服用米非司酮后早孕妇女血清层粘连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原纤维(Ⅳ.C)水平变化及其意义。方法采用放射免疫分析法对20例早孕妇女口服米非司酮前后血清中LN和Ⅳ.C进行检测。结果20例早孕妇女口服米非司酮后血清中LN的含量[(78.78±27.00)ng/ml]高于服药前[(70.04±21.79)ng/ml,P<0.05];服药后血清中Ⅳ.C的含量[(35.20±12.58)ng/ml],与服药前[(36.03±12.30)ng/ml]比较,差异无统计学意义(P=0.578)。结论口服米非司酮可使早孕妇女血清中LN的含量升高,而对Ⅳ.C的含量无影响。LN可能参与米非司酮引起的流产机制,并在早期妊娠的持续中起重要的作用。

nm23基因产物、Ⅳ型胶原纤维蛋白、LN和FN表达与喉癌颈淋巴结转移的关系

目的探讨nm23基因产物和细胞外基质抗原的表达与声门上型喉鳞癌颈淋巴结转移的关系。方法分别应用nm23/NDPK多克隆抗体、抗Ⅳ型胶原纤维(Type IV Collagen,CTⅣ)单克隆抗体、抗层粘连蛋白(Laminin,LN)单克隆抗体、抗纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)单克隆抗体以链霉素亲生物素过氧化酶免疫组织化学法观察nm23/NDPK和这三种抗原在72例声门上型喉鳞癌中的表达分布情况及其与颈淋巴结转移的关系。统计学处理采用x2检验。结果声门上型喉鳞癌中nm23/NDPK阴性者发生颈淋巴结转移率高于表达阳性者,二者之间有较强相关性(P<0.01)。CTⅣ、LN、FN表达弱阳性者发生颈淋巴结转移率高于强阳性表达者,也表明其间有较强相关性(P<0.01)。结论nm23/NDPK、CTⅣ、LN、FN表达情况可作为预测声门上型喉鳞癌发生颈淋巴结转移的重要参数之一。

豚鼠近视模型中屈光度眼轴长度及巩膜Ⅰ型胶原纤维变化的研究

目的研究豚鼠近视模型中屈光度眼轴长度变化及后极部巩膜中Ⅰ型胶原纤维的变化。方法取出生1周的豚鼠75只,利用6号半透明乳胶气球作为头套诱导形觉剥夺性近视(FDM)动物模型。随机分为空白对照组、形觉剥夺(FDM)组和自身对照组。分别测量记录实验豚鼠不同时空点的双眼屈光度及眼轴长度。形觉剥夺实验组分为遮盖2周、遮盖4周、遮盖4周去遮盖1周及遮盖6周4个亚组,左眼为遮盖眼(FDM组),采用半透明面罩遮盖诱导形觉剥夺性近视,右眼不予处理(自身对照组)。对遮盖前后实验组和对照组双眼屈光度、眼轴长度进行测量,并对后极部巩膜中Ⅰ型胶原进行免疫组化分析。结果 FDM组由遮盖前远视(+2.09±0.31)D逐渐变成遮盖6周时近视(-7.07±0.56)D,眼轴也由遮盖前(5.93±0.39)mm到6周时(7.99±0.32)mm,且后极部巩膜中Ⅰ型胶原含量也逐渐降低。结论形觉剥夺法可成功制造豚鼠实验性近视模型,在豚鼠形觉剥夺性近视的形成过程中伴随着眼球近视度数逐渐增加和眼轴长度不断增长,且后极部巩膜中Ⅰ型胶原随着近视度数加深逐渐降低。

怡肾汤对肾间质纤维化大鼠TGF-β_1及Ⅲ型胶原纤维表达的影响

目的研究怡肾汤对肾间质纤维化大鼠TGF-β1和ColⅢ表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法 32只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、怡肾汤组和依那普利组,每组8只。适应性饲养1周后,除正常对照组外其余均采用腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾间质纤维化动物模型。第1、2、3周末采血分离血清测定肌酐、尿素氮含量。第21天处死大鼠,分离肾脏,应用HE及Masson染色,观察肾脏组织病理学改变,免疫组化方法检测肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和Ⅲ型胶原(ColⅢ)的表达,结果应用图像分析系统进行半定量分析。结果模型组、怡肾汤组及依那普利组与正常组比较均呈现程度不同的病理损害。免疫组化半定量分析显示怡肾汤组肾间质TGF-β1、ColⅢ的表达量均少于模型组(P<0.05)。此外,怡肾汤还能降低血BUN、Scr水平。结论怡肾汤可能通过下调TGF-β1、ColⅢ水平,减少ECM沉积,从而达到防止肾间质纤维化的作用。

Ⅲ型胶原纤维肾小球病的临床及病理特征分析

目的:分析Ⅲ型胶原纤维肾小球病患者的临床和病理资料,提升该病诊治水平。方法:回顾性分析2007年3月至2015年6月肾活检患者的病例资料,进一步分析其中Ⅲ型胶原纤维肾小球病患者的临床和病理资料。结果:共4例Ⅲ型胶原纤维肾小球病患者,其中2例男性,2例女性;年龄(45.5±10.7)岁。4例患者均无家族史,均无肾外累及。就诊时最常见临床表现为蛋白尿、高血压、肾功能不全。肾活检病理改变多样,可表现为膜增生样改变、结节性病变、局灶性节段性肾小球硬化;其中1例同时伴有IgA肾病。1例患者肾功能轻度减退伴少量蛋白尿,肾功能及尿蛋白定量长期稳定;2例患者糖皮质激素联合免疫制剂治疗有效,肾功能较前好转,蛋白尿部分缓解;1例患者进展至终末期肾病,接受血液透析治疗。结论:Ⅲ型胶原纤维肾小球病呈散发性,可表现为蛋白尿、高血压、肾功能减退;肾活检光镜病理表现多样,容易漏诊;免疫组织化学和电镜检查有助于确诊。

不同运动训练对大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,闰盘及血管组织结构的影响

采取跑台训练方式,建立大鼠有氧运动和疲劳运动模型,采用苦味酸—天狼猩红染色及透射电镜法探讨有氧训练和大强度疲劳训练对大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,闰盘及毛细血管组织结构的影响.结果显示:对照组和有氧训练组心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,闰盘及毛细血管组织结构良好;疲劳训练组心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维发生扭曲、溶解及过度增生等病理改变,同时,其闰盘发生断裂、扩张和局部溶解,血管管壁增厚,管腔变窄,内皮细胞结构紊乱.统计结果表明,与安静对照组相比,有氧运动可增加大鼠心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的量(P<0.05),而疲劳训练组胶原纤维增长失衡,Ⅰ型胶原纤维显著增加,Ⅲ型胶原纤维显著减少(P<0.05～0.01).以上结果说明,不同强度运动训练影响大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的空间分布和量的变化,并且影响闰盘和毛细血管的形态结构,疲劳运动造成的心脏组织结构病理改变可能与运动实践中的心率失常及运动猝死关系密切.

Ⅳ型胶原纤维和P_(53)蛋白在喉癌和不典型增生上皮中的表达

目的：探讨 Ｐ５３基因对Ⅳ型胶原纤维（ ＣｏⅣ）的影响及临床诊断意义。方法：用免疫组化方法观察 ＣｏⅣ和 Ｐ５３蛋白在１９ 例喉癌（ Ｃ Ａ）和３４ 例不典型增生（ Ｄ Ｓ）中的表达。结果： ＣｏⅣ表达呈线型， Ｐ５３ 蛋白表达呈核型，两者在 Ｃ Ａ 中呈负相关性。在 Ｄ Ｓ中 ＣｏⅣ表达率为 ４４％ ， Ｐ５３蛋白表达率为５８％ 。结论： ＣｏⅣ和 Ｐ５３蛋白在喉癌中均有表达，当 Ｐ５３蛋白超表达时， ＣｏⅣ的量明显减少； ＣｏⅣ免疫组化可以做为 Ｐ５３蛋白在 Ｄ Ｓ诊断中的辅助指标。

VI型胶原纤维蛋白型先天性肌营养不良的治疗进展

VI型胶原纤维蛋白型先天性肌营养不良是一种罕见的肌肉疾病,目前缺乏特异性、针对性的治疗方法,该文从药物治疗、基因治疗、干细胞移植、低蛋白饮食治疗等方面综述了该病治疗方向的研究进展、不足与挑战。

阴茎组织剪切波超声弹性量化测值与Ⅲ型胶原纤维含量的相关性分析

目的:探讨阴茎组织剪切波超声弹性量化测值(SWQ)与阴茎组织Ⅲ型胶原纤维含量的相关性。方法:选用20只健康雄性SD大鼠(5~60周龄)进行实验研究。麻醉大鼠后,对大鼠阴茎进行实时剪切波超声弹性成像(RT-SWE)检查。成像仪器选择Aixplorer超声诊断仪,测量指标为SWQ(单位:kPa)。在完成RT-SWE检查后,即刻对大鼠实施安乐死,剪取阴茎组织进行免疫组化分析,测量阴茎组织内Ⅲ型胶原纤维的含量。采用Ⅲ型胶原纤维阳性区域百分比(PAP)作为含量的定量指标,并对阴茎组织的SWQ与PAP的相关性进行统计学分析。结果:大鼠阴茎组织的SWQ与PAP具有显著相关性(P<0.001),相关系数为-0.771。结论:大鼠阴茎组织的SWQ与阴茎组织内Ⅲ型胶原纤维含量具有相关性,RT-SWE有望成为一种定量评价阴茎组织胶原纤维含量的无创新方法。