黄瓜未授粉子房离体培养体系影响因素

为筛选出适合黄瓜多种基因型的胚诱导体系,以‘翡翠’‘津优35’‘瑞光2号’‘京丰268’等4种不同基因型的黄瓜为试材,对黄瓜未授粉子房离体培养的影响因素进行研究。结果表明,在不同组合处理中,4种基因型的试材均表现为花前2 d的黄瓜未授粉子房采用MS培养基中添加0.07 mg·L^(-1)噻苯隆(TDZ),35℃热激处理2 d的胚发生率最高,分别为60.8%,20.8%,43.3%,65.0%。不同基因型间胚发生率差异显著,其中,‘京丰268’胚发生率最高,为18.04%,‘瑞光2号’胚发生率最低,为5.23%。35℃热激处理2 d的效果最好,开花前2 d的未授粉子房胚发生率最高。‘翡翠’以0.09 mg·L^(-1) TDZ处理时胚发生率最高,‘瑞光2号’‘津优35’‘京丰268’以0.07 mg·L^(-1) TDZ处理时胚发生率最高。

一种产氢产乙酸菌互营共培养体的筛选及其群落结构解析

厌氧消化系统中的产氢产乙酸菌在营养生态位上位于产酸发酵菌群和产甲烷菌群之间,在功能上起着承上启下的重要作用。该菌群具有与耗氢菌互营共生的特性,其分离纯化非常困难。为了深入了解其生理生态特性,为开发高效的厌氧生物处理技术提供理论基础,采用丙酸和丁酸混合培养基,以具有甲烷发酵功能的厌氧活性污泥为出发菌群,进行了产氢产乙酸菌互营共培养体的选育,并借助于PCR-DGGE技术对其菌群结构进行了解析。经过选择培养基的不断传代培养,最终筛选到2个产氢产乙酸互营共培养体7-m-2a和11-O-1。这2个共培养体不仅对丙酸和丁酸具有很强的降解和产乙酸能力,而且不产甲烷和硫化氢。在这种非产甲烷菌和非硫酸盐还原菌与产氢产乙酸菌组成的互营共培养体中,含有专性的互营产乙酸菌Desulfotomaculum sp.Iso-W2及其伴生菌,其中的伴生菌是能利用甲酸盐和H2/CO2的Uncultured bacterium 054E12_B_DI_P58和Sedimenti bactersp.JN18_A14_H。对这一新的产氢产乙酸菌互营共培养体的发现和选育成功,为更全面地研究产氢产乙酸菌的生理生态特性提供了样本。

组培平贝母不同阶段培养体淀粉酶同工酶电泳及其活力的研究

以平贝母为供试材料,研究了组培平贝母培养过程中不同发育时期培养体的淀粉酶同工酶及其活力的变化,可为进一步深入研究贝母器官发生机理和以后的分子研究提供参考。结果表明:在发育过程中各培养体的淀粉酶同工酶在Rf=0.167处产生了平贝母α-淀粉酶的特征性酶带,在Rf=0.250时,4个时期都有浅蓝色的R-淀粉酶的表达;而β-淀粉酶酶带在小鳞茎膨大阶段进行表达,而在其他3个时期没有该酶的表达。在淀粉酶活力方面,培养体内总淀粉酶活力整体呈下降-上升-下降的趋势,不同发育时期的α-淀粉酶变化趋势与总淀粉酶变化趋势相似,其活力始终高于β-淀粉酶,推测α-淀粉酶在组培平贝母不同发育时期培养体的淀粉代谢中作用比较重要。

一个产氢产乙酸菌互营共培养体的培养基优化

营养生态位位于产酸发酵菌和产甲烷菌之间的产氢产乙酸菌,其分离培养困难,种子资源匮乏,限制了基于强化产氢产乙酸功能作用的高效厌氧生物处理技术的开发.在前期获得对丙酸具有较强降解能力的产氢产乙酸菌互营共培养体7-m-2a的基础上,探讨了丙酸质量浓度、氮源、Ca2+、Fe2+、Mg2+和泛酸等对其生长代谢的影响.结果表明,培养基中适宜的丙酸钠和Fe2+、Mg2+、泛酸质量浓度分别为10 g/L和88、38、30 mg/L,最佳氮源是由质量浓度为0.33 g/L的酵母膏、胰蛋白胨和NH4Cl组成的复合氮源.在优化条件下38℃培养30 d,7-m-2a对丙酸的降解速率和乙酸产量分别可达998 mg/(L.d)和3 947 mg/L.

设置“工程硕士”专业学位完善高级工程技术人才培养体系

设置“工程硕士”专业学位完善高级工程技术人才培养体系吴振一，刘颖，郑燕康，罗燕春，王孙禺一、引言当今世界，科技发展日新月异，国际竟争日趋激烈，中华民族能否在未来世纪中屹立于世界民族之林，关键在于综合国力的强弱。高级专门人才的数量和质量，是衡量一个国家...

奶牛乳腺上皮细胞体外培养体系的建立

通过乳汁中提取细胞进行传代培养获得增殖且可分泌特异性酪蛋白的奶牛乳腺上皮细胞,细胞形态以鹅卵石型和多角型为主,逐渐趋于多角型。当多角型细胞增殖融合到一定阶段,会出现乳头状和圆顶型结构。并进一步对泌乳中后期乳汁分离的细胞做细胞生物学性状检测:细胞接种存活率达到81%;细胞生长曲线呈典型的“S”形,符合细胞生长的一般生物学规律;细胞群体倍增时间最短达48.7 h;经过对乳腺上皮细胞特异性分泌蛋白-酪蛋白的检测,证明培养获得的细胞为乳腺上皮细胞,且具有正常分泌乳蛋白功能。试验初步建立了奶牛乳腺上皮细胞的体外培养体系。

不同基因型沙梨带芽茎段无菌培养体系建立研究

为探讨不同基因型沙梨Pyrus pyrifolia外植体无菌培养体系建立方法,以沙梨品种'金水1号''金水2号''鄂梨1号''鄂梨2号''圆黄''翠冠'的当年生带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基进行离体培养,就外植体消毒时间、植物生长调节剂组合、茎段切割方式、控制褐变方法、外植体采集时间等因素对培养效果的影响进行研究。结果表明,沙梨带芽茎段以75%酒精处理30s,0.1%HgCl2处理7min消毒效果最好,茎段消毒后接种在含6-BA 1.0~2.0mg/L、IBA 0.1~0.2mg/L的MS培养基上,接种后10d芽开始萌动,接种后20d嫩茎开始生长,萌芽率22.22%~37.78%。当年生枝切割成4~5cm带部分叶柄的带芽茎段消毒处理后分割成1.5cm单芽茎段接种,萌芽率高,萌芽时间短,获得的无菌芽苗生长健壮。培养基中添加0.25mg/L维生素C的带芽茎段褐化率较对照低4.44个百分点,萌芽率较对照高3.02个百分点。4月中旬到5月中旬为采集带芽茎段的最佳时间,褐变率低,污染率较低,萌芽率达31.48%和30.77%。

体外培养体系对牛体外受精胚胎性比的影响

研究了不同体外培养体系对牛体外受精胚胎性比的影响。结果表明,添加血清的2组培养系统中所得雄性囊胚与雌性囊胚的性比虽偏离了1∶1,但差异不显著(P>0.05),而总的体外胚胎的性比则显著偏离了1∶1(P<0.05)。这说明在体外培养系统中雄性胚胎比雌性胚胎发育能力更强,并且血清的存在对于雄性胚胎的发育有明显的促进作用。

■木新芽变离体培养体系研究

为保存和加快繁殖(?)木新芽变材料,采用离体培养技术对外植体进行了愈伤组织诱导,分化,丛芽增殖和生根培养的研究．结果表明：叶片形成的愈伤组织都不分化,而茎段愈伤组织在含细胞分裂素 BA,KT 的培养基中均可分化,以 MS+KT0．6+IBA0．5培养基分化效果好,分化率达3．0个芽/块．1/2MS+IBA 2 mg/L 培养基最适合生根培养；芽变材料在黑暗条件下生根率达100%．

高职电子商务专业群人才培养体系协同改革研究

高水平专业围绕产业高端和高端产业,面向国家战略性新兴产业和支柱产业,高水平专业群的建设基础在于专业群人才培养体系的协同发展。传统专业建设思路是做大做强某一专业,扶优扶强,弱化各专业之间的共通性和内在联系,难以形成专业群合力。高职电子商务专业群人才培养是一项系统工程,需要站在电子商务生态圈的高度来审视专业群建设,把握专业群人才培养体系协同改革的目标、改革的依据、改革的总体思路及实施路径,进而获取改革预期的综合效益。

牛胚胎在BRL/mTCM199和HECM-6/mTCM199培养体系中发育潜能的探讨

在两种培养体系下对牛胚胎早期发育进行了比较研究。把屠宰场收集的牛卵体外培养至成熟 ,然后进行体外受精。将受精卵置于下列两种培养体系中进行体外培养 :①Buffaloratliver细胞与改进的TCM199培养液共同培养系统 (BRL/mTCM199) ;②半确定培养液两步培养系统 [无血清的金黄地鼠培养液与改进的TCM 199培养液 (HECM - 6 /mTCM 199) ]。结果表明 :后者的囊胚率 (5 0 % )明显高于前者的囊胚率 (4 1% ,P<0 0 1)。表明牛胚胎早期分裂可在无蛋白培养条件下进行 ,并且在此培养条件下有良好的后续发育能力。这可能与两步培养体系中葡萄糖和氨基酸浓度不同有关。

滑膜细胞原代体外培养体系的建立

目的:改善体外分离、培养滑膜细胞的方法,并对其鉴定。方法:取人滑膜组织采用机械分离、复合酶消化后再将组织块塑料孔板倒贴法,差速贴壁法纯化后培养,倒置显微镜观察生长情况,HE染色,细胞活力测定,免疫组化鉴定。结果:分离培养的滑膜细胞呈梭形或柱形,核呈卵圆形位于细胞中央,生长好、纯度高。细胞活力测定大于95%,免疫组化鉴定:波形蛋白vimentin(+),CD68(-)。结论:成功分离了人滑膜细胞,方法简便易行,为进一步研究提供良好的实验模型。

幼龄羊的周龄及卵母细胞体外培养体系对JIVET技术的影响

为了探讨周龄及卵母细胞体外培养体系对幼龄羊胚胎体外生产技术（JIVET）的影响,试验对10只5-10周龄杜寒杂种羔羊进行激素诱导,获取卵母细胞,分别在基础成熟液和含200μmol/L半胱氨酸的成熟液里成熟,再分别在含2%发情羊血清（ESS）的Ⅰ受精液和含3 mg/m L牛血清白蛋白（BSA）的Ⅱ受精液里受精,测定不同周龄羔羊的采卵数量、卵母细胞成熟率和卵裂率。结果表明：5,7,8,10周龄羔羊获得卵母细胞数分别为（111.00±16.97）枚/只、（139.50±28.99）枚/只、（108.50±17.68）枚/只、（42.00±11.31）枚/只,5,7,8周龄羔羊显著高于10周龄羔羊（P〈0.05）;而5，7，8周龄羔羊之间差异不显著（P〉0．05）；试验成熟液获得的卵母细胞成熟率比基础成熟液高3.64百分点;Ⅰ受精液获得的卵母细胞卵裂率极显著高于Ⅱ受精液（P〈0.01）。说明选择5-8周龄羔羊、卵母细胞体外成熟液添加一定量半胱氨酸和体外受精液含一定量ESS可以改善JIVET体系。

产氢产乙酸互营共培养体7-m-2a的生长代谢特性

为了对产氢产乙酸互营共培养体的扩大培养和应用奠定基础,采用静态培养实验,考察了碳源、氮源、温度和pH等因素对前期分离得到的新型共培养体7-m-2a的生长代谢特性的影响.结果表明,产氢产乙酸互营共培养体7-m-2a对丙酸、丁酸和苯甲酸都具有很高的转化率,其最适宜碳源为丁酸,不易利用葡萄糖和蔗糖;以蛋白胨和酵母粉混合物为氮源时,其生长代谢活动最旺盛,适宜的pH和温度分别为8.0和45℃.

新生猪胰岛细胞团的体外培养体系

目的分离纯化新生猪胰岛细胞团(NPCCs),以不同的体外培养方式促进NPCCs成熟,筛选最佳方案。方法利用供龄分别为3天的新生猪,参考Bonner-Weir法和Hill法分离纯化NPCCs,分别以培养体系Ⅰ(90%DMEM、10%胎牛血清、双抗、2 mmol/L谷氨酰胺+0.01%大豆胰酶抑制剂)和培养体系Ⅱ(90%DMEM、10%胎牛血清、双抗、2 mmol/L谷氨酰胺+0.01%大豆胰酶抑制剂、10 mmol/L烟碱、10 ng/mL表皮细胞生长因子、15 ng/mL胰岛素样生长因子)体外培养14天,进行抗胰岛素、抗CK7双荧光染色和胰岛素刺激释放实验。结果应用培养体系Ⅰ的NPCCs体外培养14天时,抗胰岛素阳性细胞(β细胞)百分比为(28.6±5.3)%,显著低于培养体系Ⅱ的(62.1±9.0)%(P(0.01);培养体系Ⅰ的抗CK7阳性细胞(原始导管细胞)百分比为(52.8±7.2)%,显著高于培养体系Ⅱ的(21.5±6.9)%(P(0.01)。培养体系Ⅰ的NPCCs体外培养14天时胰岛素刺激释放量为:低糖:(14.3±4.8)mU/L,高糖:(23.9±6.2)mU/L,高糖+茶碱:(38.5±8.2)mU/L,显著低于培养体系Ⅱ的释放量:(26.2±5.1)mU/L、(46.3±7.0)mU/L、(81.5±10.4)mU/L(P(0.01)。结论培养体系Ⅱ较培养体系Ⅰ更能促进NPCCs中β细胞发育成熟及CK7阳性细胞向β细胞转化,并使胰岛素刺激释放量提高。培养体系Ⅱ是微囊和移植前体外培养NPCCs的理想方案之一。

要以“三个面向”为指导 构建高校创造型人才培养体系

邓小平教育思想,是邓小平理论的重要组成部分,是中国教育改革和发展的指导思想。“三个面向”是邓小平教育思想中最富于时代特征,最具有现实和历史意义的精髓。坚持“三个面向”培养创造型人才,是我国发展教育事业的根本指导方针,也是21世纪中华民族实现伟大复兴的战略要求。 21世纪是知识经济时代。经济、社会的发展主要以知识、信息的应用、传播为基础,推动社会文明进步的核心动力是知识创新、技术创新、制度创新、组织创新等系列化国家创新能力。江泽民同志指出:“

仔猪胰腺细胞体外培养体系的建立

为了研究体外培养仔猪胰腺细胞的适宜条件,试验选取1日龄的仔猪胰腺组织置于冰上清洗、修剪,对消化酶、离心方式、培养皿铺被方式、培养液及添加不同促生长因子等多种因素进行筛选和优化。结果表明:0.25%胰酶消化所获得的细胞强于0.1%胶原酶消化获得的细胞,细胞清亮,易于生长;采用500 r/min离心5 min、多次离心所获得的细胞较Percoll不连续密度梯度离心和5%BSA等密度梯度离心所获得的细胞贴壁率高,生长能力强,易于培养传代;采用0.1%明胶或20μg/mL的层黏连蛋白铺被培养皿均比无铺被的培养皿获得更多的贴壁细胞;以RPMI 1640、M199、F12、L-DMEM多种培养液培养仔猪胰腺细胞,表现出多种细胞形态和生长趋势;在基础培养液中添加上皮生长因子、角质化生长因子、β-巯基乙醇和白血病细胞抑制因子、转铁蛋白与亚硒酸盐混合试剂等促干细胞增殖因子可促进不同形态细胞的增殖。说明按此方式培养可获得大量、多种细胞形态的仔猪胰腺祖/干细胞。

小鼠植入后胚胎体外延时培养体系的应用进展

小鼠是研究哺乳动物中一种小型的模式生物,在研究非人灵长类以及人类胚胎之前,需要先在小鼠体内确定实验能否进行再转移到高等哺乳动物。现有体系的限制使小鼠胚胎只能在体外培养至E6.5,小鼠胚胎体外延时培养体系的建立对于理解胚胎植入后的关键事件以及分子机制有着非常重要的作用,更为人胚胎的发育研究提供有效平台。单细胞测序技术的发展为小鼠胚胎体外延时培养提供了新的可能,在这里我们介绍了小鼠植入后胚胎的普通体外延时培养体系、3D培养体系、单细胞测序技术在胚胎领域的应用,以及其未来可能的发展方向。

黄樟茎段离体培养体系的建立

以黄樟秋稍带腋芽茎段为外植体,建立并优化了黄樟组培繁育体系,研究基本培养基、不同激素及配比对黄樟茎段不定芽诱导、组培苗增殖及生根的影响。结果表明:黄樟带腋芽茎段最佳启动培养基配方为改良MS+4.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,在此培养基中不定芽培养7 d开始萌动,诱导率可达76.67%;不定芽继代培养基的最适宜配方为改良MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,在此培养基中不定芽生长健壮,增殖系数为3.78;幼苗生根培养基的最适宜配方为改良1/2 MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L IAA,在此培养基中幼苗培养13 d开始发根,生根率达85.56%。上述组织培养技术条件,可有效提高黄樟茎段的不定芽诱导率和生根率,为黄樟优良品系的工业化育苗奠定了基础。

桂花茎尖离体培养体系的建立

以桂花(Osmanthus fragrans Lour.)的休眠芽?萌动芽和嫩枝的茎尖为外殖体,进行离体培养研究,筛选其最适培养基。结果表明:3种外殖体的适宜初代培养基不同,其中:休眠芽为B5+7.0 mg.L-16-BA+0.05 mg.L-1NAA+3%蔗糖;萌动芽为B5+5.0 mg.L-16-BA+0.05 mg.L-1NAA+3%蔗糖;嫩枝为B5+3.0 mg.L-16-BA+0.05 mg.L-1NAA+3%蔗糖;但适宜的继代培养基(B5+2.0 mg.L-16-BA+0.05 mg.L-1NAA+3%蔗糖)和生根培养基(B5+2.0 mg.L-1NAA+3%蔗糖)相同。