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血管内皮生长因子(VEGF)对培养内皮细胞VEGF受体表达的影响 被引量:5
1
作者 郝亚荣 李庚山 +2 位作者 杨波 赵志明 黄从新 《微循环学杂志》 2001年第2期9-11,共3页
目的 :为探讨VEGF对培养内皮细胞 (EC)VEGF受体表达的影响。方法 :将培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)随机分为 4组 :( 1)正常对照组 ;( 2 )低氧培养组 ;( 3)VEGF 10ng/ml组 ;( 4)低氧 +VEGF10ng/ml组。HUVEC低氧培养参照Kuwara等介绍的... 目的 :为探讨VEGF对培养内皮细胞 (EC)VEGF受体表达的影响。方法 :将培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)随机分为 4组 :( 1)正常对照组 ;( 2 )低氧培养组 ;( 3)VEGF 10ng/ml组 ;( 4)低氧 +VEGF10ng/ml组。HUVEC低氧培养参照Kuwara等介绍的方法并加以改进。HUVECVEGF受体的检测采用免疫组织化学方法。结果 :采用简易低氧培养法 ,48h内培养液氧分压维持在 5 8mmHg ;与对照组相比 ,低氧培养组、VEGF组和低氧 +VEGF组HUVECVEGF受体Flk 1/KDR阳性细胞数增多 ,强度增加 ;但未检测到VEGF受体Flt 1表达。结论 :低氧可使HUVEC表面的VEGF受体Flk 1/KDR表达增加 ,VEGF同源上调其受体Flk 1/KDR ,低氧和VEGF在调节VEGF受体Flk 1/KDR方面有协调作用。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 培养内皮细胞 VEGF受体 表达
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下丘脑-垂体条件培养基对培养内皮细胞一氧化氮合酶的影响
2
作者 吴开云 魏波 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期147-150,共4页
为了探讨下丘脑 -垂体内分泌轴对动脉粥样硬化形成的影响 ,本文取 5月龄水囊引产胚胎的下丘脑、垂体组织分别进行细胞培养 ,并按下丘脑、垂体、下丘脑 +垂体 3组收集条件培养基。用条件培养基分别作用于用联胺诱导的和未用联胺诱导的内... 为了探讨下丘脑 -垂体内分泌轴对动脉粥样硬化形成的影响 ,本文取 5月龄水囊引产胚胎的下丘脑、垂体组织分别进行细胞培养 ,并按下丘脑、垂体、下丘脑 +垂体 3组收集条件培养基。用条件培养基分别作用于用联胺诱导的和未用联胺诱导的内皮细胞后 ,检测其一氧化氮合酶 ( NOS)含量的变化 ,目的在于阐明下丘脑 -垂体内分泌轴在动脉粥样硬化形成过程中对内皮细胞的调控作用。结果表明 :下丘脑、垂体、下丘脑 +垂体三组条件培养基对正常内皮细胞 NOS的影响无显著性差异 ( P>0 .0 5 ) ;但当内皮细胞受到联胺脂质过氧化损伤时 ,NOS不但不下降反而有所增加 ,其中下丘脑 +垂体组尤为明显 ( P<0 .0 5 )。结果提示 ,内皮细胞受到脂质过氧化伤害时 ,下丘脑 -垂体内分泌轴可通过上调内皮细胞 NO的代谢来保护其内皮细胞 ,说明下丘脑 展开更多
关键词 下丘脑-垂体条件培养 培养内皮细胞 一氧化氮合酶 联胺 动脉粥样硬化 人胎儿
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高压氧对体外培养的内皮细胞和口腔粘膜角朊细胞分泌VEGF的影响 被引量:2
3
作者 李霞 凌天牖 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期284-286,共3页
目的 探讨高压氧治疗OSF的机理。方法 通过体外培养内皮细胞和口腔粘膜角朊细胞,经高压氧处理后收集培养上清,用ELISA方法测定培养上清中的VEGF水平。结果 经高压氧处理后,口腔粘膜角朊细胞分泌VEGF的量增加,内皮细胞分泌VEGF的水平... 目的 探讨高压氧治疗OSF的机理。方法 通过体外培养内皮细胞和口腔粘膜角朊细胞,经高压氧处理后收集培养上清,用ELISA方法测定培养上清中的VEGF水平。结果 经高压氧处理后,口腔粘膜角朊细胞分泌VEGF的量增加,内皮细胞分泌VEGF的水平无明显变化。结论 高压氧对OSF起治疗作用的主要因素之一可能是通过促进口腔粘膜角朊细胞分泌VEGF导致病人口腔粘膜下组织血管新生,似乎与内皮细胞分泌的VEGF无关。 展开更多
关键词 VEGF 口腔粘膜 体外培养 内皮细胞分泌 ELISA方法 培养内皮细胞 培养上清 高压氧治疗 粘膜下组织 角朊细胞 血管新生 治疗作用 OSF 水平
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氢过氧化亚油酸对整装培养人内皮细胞的损伤作用
4
作者 才越 陈铁镇 +1 位作者 宋继谒 董玉兰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1991年第S1期17-20,共4页
本实验用氢过氧化亚油酸作用于整装培养的人脐带静脉内皮细胞,采用高锰酸钾固定液固定。结果表明:高锰酸钾固定液提取了内皮细胞的线粒体、内质网;并显示氢过氧化亚油酸引起生物膜系统主要是线粒体和内质网损伤的整体结构图像。为阐明... 本实验用氢过氧化亚油酸作用于整装培养的人脐带静脉内皮细胞,采用高锰酸钾固定液固定。结果表明:高锰酸钾固定液提取了内皮细胞的线粒体、内质网;并显示氢过氧化亚油酸引起生物膜系统主要是线粒体和内质网损伤的整体结构图像。为阐明脂质过氧化引起的内皮细胞损伤及其在动脉粥样硬化发病机理中的作用提供了新资料。 展开更多
关键词 整装培养内皮细胞 脂质过氧化 动脉粥样硬化
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脐血来源的两种内皮祖细胞的分离、培养和鉴定 被引量:10
5
作者 段华新 卢光琇 程腊梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期387-391,共5页
为了建立从人脐血分离培养两种内皮祖细胞的方法和培养体系,从脐血分离单个核细胞,在含有内皮细胞条件培养液的体系中培养得到两种细胞,利用摄取乙酰化低密度脂蛋白(acetylated low-density lipoprotein,DiI-Ac-LDL)和结合欧洲荆豆凝集... 为了建立从人脐血分离培养两种内皮祖细胞的方法和培养体系,从脐血分离单个核细胞,在含有内皮细胞条件培养液的体系中培养得到两种细胞,利用摄取乙酰化低密度脂蛋白(acetylated low-density lipoprotein,DiI-Ac-LDL)和结合欧洲荆豆凝集素(Ulex European Agglutinin1,UEA-1)进行鉴定,并进一步用免疫细胞化学、RT-PCR、流式细胞术对它们进行内皮细胞相关的表型检测。结果表明,这两种细胞均能摄取DiI-Ac-LDL和结合UEA-1,表达内皮细胞的标志如CD31、CD144和血管假性血友病因子(von Willebrand Factor,vWF),有CD31、酪氨酸激酶受体(kinase tyrosine insert domain receptor,KDR)、CD144和内皮一氧化氮合成酶(endothelial NO synthase,ENOS)的基因转录。但是,它们的增殖能力明显不同,分别称为循环成血管细胞和高增殖潜能内皮祖细胞。流式细胞计数结果显示,这两种细胞在一些表面标志表达方面也存在明显的差异。结论:利用含内皮细胞条件培养液的培养体系,成功地从脐血分离的单个核细胞中培养得到了两种内皮祖细胞。 展开更多
关键词 内皮细胞 脐血 内皮细胞条件培养 细胞培养
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小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液代替刺激因子培养BF-UE和CFU-Meg 被引量:1
6
作者 黄艳红 谭孟群 +1 位作者 谢祁阳 王绮如 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第5期474-476,共3页
关键词 骨髓内皮细胞条件培养 BFU-E CFU-Meg 小鼠
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内皮祖细胞培养条件的正交设计研究 被引量:6
7
作者 张怀勤 季亢挺 +4 位作者 杨德业 黄晓燕 林捷 黄伟剑 徐力辛 《温州医学院学报》 CAS 2005年第4期261-264,共4页
目的:研究内皮祖细胞(EPCs)培养的适宜条件。方法:以L827正交表安排影响FPCs扩增贴壁的几个主要因素,光镜下观察集落形成,流式细胞术分析CD34、VE-Cadherin双阳性细胞,以此为指标分析各因素对EPCs培养的影响。结果:血管内皮生长因子(VE... 目的:研究内皮祖细胞(EPCs)培养的适宜条件。方法:以L827正交表安排影响FPCs扩增贴壁的几个主要因素,光镜下观察集落形成,流式细胞术分析CD34、VE-Cadherin双阳性细胞,以此为指标分析各因素对EPCs培养的影响。结果:血管内皮生长因子(VEGF)及接种密度对集落形成影响显著, 内皮细胞生长添加剂(ECGS)及纤维连接蛋白皿底包被无影响。4个因素对EPCs得率均有影响,且VEGF 及接种密度之间尚有交互作用。结论:EPCs培养的适宜条件为:皿底包被纤维连接蛋白,5×106/cm2接种密度,VEGF 10 ng/ml及ECGS 150μg/m1。 展开更多
关键词 内皮细胞细胞培养正交设计
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普伐他汀对内皮祖细胞培养中扩增及黏附能力的影响 被引量:1
8
作者 季亢挺 张怀勤 +4 位作者 杨德业 黄小燕 黄伟剑 林捷 徐力辛 《温州医学院学报》 CAS 2005年第4期265-267,共3页
目的:观察普伐他汀对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)培养中扩增及黏附能力的影响。方法:采用密度梯度离心法分离人脐血单个核细胞,接种到包被有人纤维连接蛋白的培养皿,分为对照组(未加细胞因子)、V组(加VEGF10 ng/m1)... 目的:观察普伐他汀对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)培养中扩增及黏附能力的影响。方法:采用密度梯度离心法分离人脐血单个核细胞,接种到包被有人纤维连接蛋白的培养皿,分为对照组(未加细胞因子)、V组(加VEGF10 ng/m1)、P0.1组(加普伐他汀0.1 μmol/L)、P0.01组(加普伐他汀0.01μmol/L),培养6d后,采用流式细胞术PE-CD34及FITC-VE-Cadherin双标法测定各组扩增细胞数, 采用黏附能力测定试验测定黏附能力。结果:V组、P0.1组、P0.01组的扩增EPCs数显著高于对照组(P< 0.01),且P0.1组、P0.01组均显著高于V组(P<0.001)。P0.1组、P0.01组的黏附EPCs数显著高于对照组(P<0.001)。结论:普伐他汀可显著提高培养EPCs的扩增能力及黏附能力。 展开更多
关键词 他汀类药内皮细胞细胞培养
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晚期内皮祖细胞条件培养液对阿霉素诱导的心肌细胞凋亡的影响 被引量:2
9
作者 唐艳 邓苏辛 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期1239-1245,共7页
目的观察晚期内皮祖细胞条件培养液对阿霉素诱导心肌细胞凋亡的影响。方法分离培养并鉴定内皮祖细胞和心肌细胞,制作晚期内皮祖细胞条件培养液以及阿霉素诱导的心肌细胞凋亡模型,实验分3组:对照组、模型组及实验组。Hoechest33342/PI及A... 目的观察晚期内皮祖细胞条件培养液对阿霉素诱导心肌细胞凋亡的影响。方法分离培养并鉴定内皮祖细胞和心肌细胞,制作晚期内皮祖细胞条件培养液以及阿霉素诱导的心肌细胞凋亡模型,实验分3组:对照组、模型组及实验组。Hoechest33342/PI及Annexin-FIFC/PI双染法检测各组心肌细胞凋亡率。MTT法检测心肌细胞存活率。qRT-PCR以及Western Blot法检测心肌细胞中脑钠肽(BNP)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA及蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组的心肌细胞凋亡率升高,与模型组相比,实验组的心肌细胞凋亡率下降,差异均有统计学意义(P <0.05)。与对照组相比,模型组的BNP的mRNA及蛋白的表达均下调,TGF-β1的mRNA及蛋白的表达上调,与模型组相比,实验组的BNP的mRNA及蛋白的表达均上调,TGF-β1的mRNA及蛋白的表达均下调,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论晚期内皮祖细胞条件培养液抑制了阿霉素诱导的心肌细胞凋亡,其可能是通过抑制TGF-β1及上调BNP的表达所实现的。 展开更多
关键词 内皮细胞条件培养 阿霉素 心肌细胞
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新生大鼠心脏微血管内皮细胞的分离培养及鉴定 被引量:6
10
作者 周燕琼 郭福晓 +4 位作者 贾强用 张艳美 郑燕珊 李乐娜 石刚刚 《汕头大学医学院学报》 2008年第3期135-136,139,F0002,共4页
目的:介绍一种改良的心脏微血管内皮细胞(CMECs)的分离培养及鉴定方法。方法:应用酶消化法分离大鼠CMECs,再用差速贴壁进行纯化。结果:用光学显微境、免疫细胞化学法进行第Ⅷ因子相关抗原染色来鉴定CMECs,其纯度约98%。结论:该法简单且... 目的:介绍一种改良的心脏微血管内皮细胞(CMECs)的分离培养及鉴定方法。方法:应用酶消化法分离大鼠CMECs,再用差速贴壁进行纯化。结果:用光学显微境、免疫细胞化学法进行第Ⅷ因子相关抗原染色来鉴定CMECs,其纯度约98%。结论:该法简单且经济。 展开更多
关键词 新生大鼠 心脏微血管内皮细胞 分离 培养 鉴定
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两组内皮细胞培养液对离体大鼠心功能及部分生化指标的影响
11
作者 向继洲 吴基良 +3 位作者 胡清华 胡本容 罗启发 卢中举 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 1997年第4期258-262,共5页
采用两组猪肺动脉内皮细胞培养液(甲组:内皮细胞缺氧再给氧前tritonX-100处理;乙组:内皮细胞缺氧再给氧的模拟缺血再灌注)灌注离体大鼠Langendorff心脏,分别观测冠脉灌注压(CPP)、心率(HR)、心律、左室内收缩压(LVSP)[并... 采用两组猪肺动脉内皮细胞培养液(甲组:内皮细胞缺氧再给氧前tritonX-100处理;乙组:内皮细胞缺氧再给氧的模拟缺血再灌注)灌注离体大鼠Langendorff心脏,分别观测冠脉灌注压(CPP)、心率(HR)、心律、左室内收缩压(LVSP)[并计算其微分(±dp/dtmax)]以及冠脉流出液中乳酸脱氨酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CPK)和心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和ATPase的变化。结果显示:经缺氧再给氧处理的内皮细胞培养液可使大鼠心功能发生异常并加重心肌损伤,进一步证实冠脉内皮细胞在心脏病理生理中起重要作用。 展开更多
关键词 内皮细胞培养 心脏功能 心肌损伤 磷酸肌酸激酶 超氧化物歧化酶
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小鼠骨髓高增殖潜能内皮祖细胞的培养与纯化(简报)
12
作者 朱文彪 朱海林 +2 位作者 吴晶晶 汪保和 王绮如 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期237-243,共7页
1997年Asahara等在人外周血中发现内皮祖细胞(endothelial progenitorcell.EPC),随后有文献报道,从骨髓中分离出EPC.异体骨髓移植研究显示成体外周血EPC来源于骨髓。许多作者报告EPC参与生理性和病理性血管新生.具有潜在的临床... 1997年Asahara等在人外周血中发现内皮祖细胞(endothelial progenitorcell.EPC),随后有文献报道,从骨髓中分离出EPC.异体骨髓移植研究显示成体外周血EPC来源于骨髓。许多作者报告EPC参与生理性和病理性血管新生.具有潜在的临床应用前景。目前关于EPC的不少基本生物学问题尚不完全清楚,其生理和病理意义也有争议。 展开更多
关键词 内皮细胞 内皮细胞条件培养 体外培养 骨髓 小鼠
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人脐静脉内皮细胞的原代培养及鉴定 被引量:5
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作者 张嘉锋 郑见宝 《陕西医学杂志》 CAS 2011年第3期264-266,共3页
目的:探讨新生儿脐静脉内皮细胞的培养及鉴定方法,建立血管内皮细胞培养模型,为体外研究血管内皮细胞提供实验手段。方法:采用0.1%Ⅱ型胶原酶分离脐静脉内皮细胞,于M199培养基(含15%胎牛血清,促内皮生长因子1%,青霉素100u/ml,链霉素100m... 目的:探讨新生儿脐静脉内皮细胞的培养及鉴定方法,建立血管内皮细胞培养模型,为体外研究血管内皮细胞提供实验手段。方法:采用0.1%Ⅱ型胶原酶分离脐静脉内皮细胞,于M199培养基(含15%胎牛血清,促内皮生长因子1%,青霉素100u/ml,链霉素100mg/ml)内培养,待细胞80%融合后,以0.25%胰蛋白酶和0.02%EDTA消化传代,并以倒置光显微镜观察内皮细胞生长情况,以免疫荧光方法对内皮细胞进行鉴定。结果:原代培养细胞在接种2h后开始贴壁生长,倒置光显微镜下观察细胞呈鹅卵石状排列,免疫荧光显示细胞胞浆内Ⅷ因子相关抗原阳性。结论:用胶原酶灌注消化脐静脉是获得内皮细胞的一种较可靠的方法。 展开更多
关键词 细胞培养内皮 血管脐静脉婴儿 新生
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视网膜血管内皮细胞的体外培养 被引量:4
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作者 钱勇 高健生 张励 《中国中医眼科杂志》 1999年第3期186-187,共2页
综述了视网膜微血管内皮细胞的体外培养过程和影响因素,对明确某些视网膜病的发病原因、预防和治疗具有重要意义。
关键词 视网膜血管内皮 内皮细胞培养 视网膜病
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人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型的建立及鉴定 被引量:7
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作者 陈威中 吴满平 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期768-775,共8页
目的建立人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型,以体外模拟人动脉壁,为动脉粥样硬化及炎症等疾病的发病机制和治疗研究打下基础。方法采用胶原酶灌注消化法从人脐动脉中原代培养获得人脐动脉内皮细胞(human umbilical artery endothel... 目的建立人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型,以体外模拟人动脉壁,为动脉粥样硬化及炎症等疾病的发病机制和治疗研究打下基础。方法采用胶原酶灌注消化法从人脐动脉中原代培养获得人脐动脉内皮细胞(human umbilical artery endothelial cell,HUAEC),采用组织块贴块法从人脐动脉中原代培养获得人脐动脉平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cell,HUASMC)。用含有抗坏血酸(≥50μg/mL)的培养基孵育平滑肌细胞,使之合成并分泌胶原蛋白,形成内皮细胞的生长基质;然后将内皮细胞以饱和密度接种到平滑肌细胞上,使内皮细胞和平滑肌细胞直接接触并整合形成内皮细胞-平滑肌细胞共培养(EC-SMC co-culture)模型。分别用免疫荧光染色和Dil-Ac-LDL吞噬实验对共培养模型进行形态学和功能学的鉴定。结果形态学鉴定结果显示,两种细胞已成功整合,模拟出体内动脉壁的形态。Dil-Ac-LDL吞噬实验的结果显示共培养模型的内皮细胞中有荧光信号,并且共培养模型中内皮细胞Dil-Ac-LDL的内吞量显著高于单纯内皮细胞(EC monoculture or ECmonolayer),证明共培养模型中内皮细胞与平滑肌细胞已建立联系。结论本实验成功建立人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型,可在体外更好地模拟人动脉壁形态和基本功能。 展开更多
关键词 人脐动脉内皮细胞 人脐动脉平滑肌细胞 动脉内皮细胞-平滑肌细胞培养模型 免疫荧光染色 Dil-Ac-LDL吞噬
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掺锶聚磷酸钙共培养成骨细胞与内皮细胞:行为和功能蛋白的变化 被引量:4
16
作者 彭红 顾志鹏 +2 位作者 黄程程 徐源廷 余喜讯 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第3期365-370,共6页
背景:前期实验发现掺锶的聚磷酸钙材料对单独培养内皮细胞或成骨细胞的行为有显著促进作用。目的:观察掺锶聚磷酸钙对共培养下成骨细胞与脐静脉内皮细胞行为和功能蛋白表达的影响。方法:取第3代人脐静脉内皮细胞与人成骨肉瘤细胞MG63以2... 背景:前期实验发现掺锶的聚磷酸钙材料对单独培养内皮细胞或成骨细胞的行为有显著促进作用。目的:观察掺锶聚磷酸钙对共培养下成骨细胞与脐静脉内皮细胞行为和功能蛋白表达的影响。方法:取第3代人脐静脉内皮细胞与人成骨肉瘤细胞MG63以2∶1的浓度比接种于24孔板中,然后再分别加入掺锶聚磷酸钙、聚磷酸钙与羟基磷灰石,共培养7 d后。采用ELISA法检测细胞血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达,采用MTT法检测细胞活性。结果与结论:与聚磷酸钙与羟基磷灰石相比,在掺锶聚磷酸钙表面生长的细胞呈现更加良好的形态,细胞融合生长形成单层覆盖在材料表面,并且在材料表面有一定的跨度生长,说明掺锶聚磷酸钙材料能促进内皮细胞在其上黏附、伸展,有利于细胞的生长和增殖。掺锶聚磷酸钙组细胞分泌的血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子明显高于聚磷酸钙组和羟基磷灰石组(P<0.05),说明掺锶聚磷酸钙可上调血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达。 展开更多
关键词 生物材料 骨生物材料 掺锶聚磷酸钙 内皮细胞与成骨细胞培养体系 血管内皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子
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烧伤后PMN粘附对肺微血管内皮细胞单层通透性的影响
17
作者 方勇 陈玉林 +2 位作者 葛绳德 刘世康 朱世辉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期64-66,共3页
目的:观察烧伤后中性粒细胞(PMN)对肺微血管内皮细胞单层通透性的影响,分析PMN粘附及其粘附分子CD11b/CD18在该影响中的介导作用。方法:建立培养肺微血管内皮细胞(PMEC)单层通透性测定的方法,根据处理内皮... 目的:观察烧伤后中性粒细胞(PMN)对肺微血管内皮细胞单层通透性的影响,分析PMN粘附及其粘附分子CD11b/CD18在该影响中的介导作用。方法:建立培养肺微血管内皮细胞(PMEC)单层通透性测定的方法,根据处理内皮细胞单层的不同成分,将实验分为7组,用含FITC-清蛋白的灌流液灌流后,测定液体滤过系数(Kf)和渗透压反射系数(δ)。结果:烧伤后PMN能使反映小分子物质通透性的Kf值明显增加,使δ显著下降。用单抗封闭PMN膜上CD11b/CD18能使δ值的变化得到纠正;用孔径0.2μm的滤膜阻断PMN与内皮细胞单层的粘附则使Kf值和δ值均接近正常水平。结论:白细胞与内皮细胞的粘附是介质类物质发生作用的前提条件,这些物质主要影响肺血管对小分子物质的通透性。粘附分子CD11b/CD18本身可能具有生物学信号调控的作用。 展开更多
关键词 中性粒细胞 粘附分子 内皮细胞 培养内皮细胞单层 通透性 烧伤
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蒲黄单体对内皮细胞的保护作用——形态学研究 被引量:5
18
作者 黄桂秋 徐德敏 +3 位作者 张彩英 徐也鲁 赵基 王振义 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1991年第3期185-188,共4页
体外培养血管内皮细胞。模拟体内纤维蛋白予以损伤,并给予中药蒲黄单体以观察其对内皮细胞的保护作用,实验借助扫描电镜观察内皮细胞形态变化。结果表明:(1)内皮细胞与纤维蛋白接触48小时后,细胞明显皱缩,多数细胞脱落或解体;(2)同时加... 体外培养血管内皮细胞。模拟体内纤维蛋白予以损伤,并给予中药蒲黄单体以观察其对内皮细胞的保护作用,实验借助扫描电镜观察内皮细胞形态变化。结果表明:(1)内皮细胞与纤维蛋白接触48小时后,细胞明显皱缩,多数细胞脱落或解体;(2)同时加入蒲黄单体组,细胞损伤明显减轻,脱落减少,多数细胞排列规则,形态正常,尤以单体Y_4的保护作用更显著;(3)血管平滑肌细胞在同样纤维蛋白作用条件下,其形态无明显改变。 展开更多
关键词 内皮细胞培养 蒲黄单体 保护作用
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雌激素处理的hBMSC对高糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用 被引量:1
19
作者 张晓东 孙石磊 +5 位作者 王冠 李霄凌 姚立杰 徐浩 张鹏 沈雷 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期289-294,共6页
目的:探讨雌激素处理人骨髓间充质干细胞(hBMSC)对高糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及机制。方法:采用30 mmol/L葡萄糖刺激hBMSC细胞建立高糖模型并分组:以无刺激者为高糖对照组(HG组)、以20μmol/L雌激素处理者为... 目的:探讨雌激素处理人骨髓间充质干细胞(hBMSC)对高糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及机制。方法:采用30 mmol/L葡萄糖刺激hBMSC细胞建立高糖模型并分组:以无刺激者为高糖对照组(HG组)、以20μmol/L雌激素处理者为高糖雌激素组(HG+E2组)、以5μmo/L蛋白激酶B(PKB/Akt)抑制剂Triciribine预处理45 min后,再以20μmol/L雌激素处理者为高糖Akt抑制剂组(HG+E2+Triciribine组)和正常条件培养的hBMSC为正常对照组(NG组)。分别于处理12 h后,采用CCK8法检测各组hBMSC的细胞活力,硝酸还原酶法和ELISA法检测各组培养基上清中NO、VEGF和IL-8的含量(n=6),48 h后采用Western blot检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达水平(n=3)。此外,提取各组hBMSC的培养基上清作为条件培养基(CM)培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)并分组为:HG-CM组(HG组条件培养基处理)、HG+E2-CM组(HG+E2组条件培养液处理)、HG+E2+Triciribine-CM组(HG+E2+Triciribine组条件培养基处理)和HG-H组(高糖对照组,30 mmol/L葡萄糖终浓度处理),分别于12 h后,采用CCK8法检测各组HUVEC的细胞活力(n=6),24 h后采用流式细胞术检测各组HUVEC细胞的凋亡率(n=3);48 h后采用划痕实验观察各组HUVEC细胞的迁移率(n=3)。结果:与NG组相比,HG组中hBMSC细胞活力和细胞内eNOS蛋白磷酸化水平降低(P<0.05),细胞培养液上清中NO、VEGF和IL-8含量减少(P<0.05);与HG组相比,HG+E2组中hBMSC的细胞活力和细胞中eNOS蛋白磷酸化水平显著增加(P<0.05),细胞培养基上清中NO、VEGF和IL-8含量增加(P<0.05),而当hBMSC细胞中Akt蛋白活性被抑制后,HG+E2+Triciribine组中上述结果指标呈反向变化(P<0.05)。此外,与HG-CM组相比,HG+E2-CM组中HUVECs的细胞活力和迁移能力显著增加(P<0.05),细胞凋亡比例降低(P<0.05),而与HG+E2-CM组相比,HG+E2+Triciribine-CM组中HUVECs的细胞活力和迁移能力降低(P<0.05),细胞凋亡比例增加(P<0.05)。结论:雌激素可能通过激活hBMSC细胞Akt/eNOS信号通路,促进NO、VEGF和IL-8的分泌,进而增加HUVECs的细胞活力和迁移能力,并抑制细胞凋亡的发生,对高糖诱导的HUVECs细胞损伤发挥保护作用。 展开更多
关键词 雌激素 人骨髓间充质干细胞 细胞损伤 高糖条件 人脐静脉血管内皮细胞 细胞培养
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细胞信号转导抑制因子-1表达下调对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 丁浩 万磊 +3 位作者 李菊香 孙国芳 洪葵 程晓曙 《岭南心血管病杂志》 2011年第S1期227-228,共2页
目的大量研究表明,内皮细胞的凋亡参与了动脉粥样硬化的发生与发展。另外有研究表明,细胞信号转导抑制因子-1(SOCS1)的表达下调可促进某些细胞的凋亡。然而,SOCS1表达下调是否与内皮细胞的凋亡有关,目前未见相关报道。为此,本研究利用RN... 目的大量研究表明,内皮细胞的凋亡参与了动脉粥样硬化的发生与发展。另外有研究表明,细胞信号转导抑制因子-1(SOCS1)的表达下调可促进某些细胞的凋亡。然而,SOCS1表达下调是否与内皮细胞的凋亡有关,目前未见相关报道。为此,本研究利用RNA干扰沉默SOCS1的表达,然后观察内皮细胞凋亡的变化,探讨SOCS1与动脉粥样硬化之间的关系。方法 (1)培养人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cel,HUVEC),利用RT-PCR和Western Blotting检测SOCS1在HUVEC中的表达。(2)设计并化学合成4对靶向SOCS1的siRNA:siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3、siRNA-4。(3)将带有荧光标记的阴性对照siRNA配制成25、50、75、100 nmol/L的4组,利用脂质体转染细胞,并在荧光显微镜下观察转染效率,得出有最佳转染效率的浓度。(4)HUVEC根据不同的处理因素分成8组:siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3、siRNA-4和阳性对照组、阴性对照组、转染试剂组、空白对照组。将均为有最佳转染效率浓度的各组siRNA转染细胞,48小时后收获细胞。利用RT-PCR和Western Blotting,筛选出1对对SOCS1沉默效率最高的siRNA。(5)将筛选出来的沉默效率最高的siRNA和阴性对照siRNA以有最佳转染效率的浓度转染细胞,转染24小时后分为4组:①阴性对照siRNA;②阴性对照siRNA+缺氧20小时/复氧4小时;③SOCS1 siRNA;④SOCS1 siRNA+缺氧20小时/复氧4小时。最后,利用Western Blot检测Caspase3和Bax的表达,利用流式细胞仪检测凋亡。结果 (1)siRNA在50 nmol/L时有较高的转染效率。(2)4对siRNA干扰后,SOCS1的表达水平与四个对照组相比明显下调(P<0.05),其中siRNA-3的沉默效率最高(P<0.05)。(3)对HUVEC进行RNA干扰和缺氧复氧处理后,SOCS1 siRNA+缺氧复氧组的Caspase3、Bax蛋白表达水平与其它3组相比明显升高(P<0.05),阴性对照siRNA+缺氧复氧组的Caspase3、Bax蛋白表达水平与阴性对照siRNA组相比明显升高(P<0.05),阴性对照siRNA+缺氧复氧组的Caspase3蛋白表达水平与SOCS1 siRNA组相比明显升高(P<0.05),而阴性对照siR-NA组与SOCS1 siRNA组之间的Caspase3蛋白表达水平差别无统计学意义(P>0.05),SOCS1 siRNA组的Bax蛋白表达水平与阴性对照siRNA组相比明显升高(P<0.05)。(4).对HUVEC进行RNA干扰和缺氧复氧处理后,SOCS1siRNA+缺氧复氧组的凋亡率与其它3组相比明显升高(P<0.05)。阴性对照siRNA+缺氧复氧组的凋亡率与阴性对照siRNA组、SOCS1 siRNA组相比明显升高(P<0.05)。而阴性对照siRNA组与SOCS1 siRNA组之间的凋亡水平差别无统计学意义(P>0.05)。结论 (1)RNA干扰能有效抑制SOCS1在内皮细胞中的表达。(2)沉默SOCS1表达可加剧缺氧复氧导致的内皮细胞凋亡。 展开更多
关键词 阴性对照 培养人脐静脉内皮细胞 缺氧复氧 动脉粥样硬化 内皮细胞凋亡 转染效率 凋亡率 表达下调 转染细胞 表达水平
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