根霉液态发酵产生纤溶酶的培养条件优化

目的:目前临床使用的溶栓药物疗效肯定,但还存在许多缺陷,而且价格昂贵,因此研制新型溶栓药物的需求迫切。方法:研究了根霉Rhizopus chinensisYY-15液体摇瓶发酵产生纤溶酶的工艺条件。采用单因素试验对液体发酵培养基的碳源、氮源、碳氮比、初始pH进行了优化;采用正交试验对发酵时间、接种量进行了研究。结果:实验范围内菌株液体发酵产纤溶酶的适宜培养基组成为:麸皮水浓度3%(w/v),豆粕浓度5%(w/v),初始培养基pH5.0。适宜培养条件为接种量6%,培养时间72h。优化条件下的摇瓶液体发酵纤溶酶产量平均达98.31 U/ml。

营养和培养参数对深层培养灵芝生产多糖的影响

研究了各种营养成分和培养参数（pH,温度,氮源可利用性,C∶N,搅拌速度,接种量）对在生物反应器可控条件下利用合成培养基深层培养灵芝生产多糖的影响。所生产的多糖大部分（通常80%以上）为胞外多糖（EPS）,分泌到培养液中,菌丝多糖（MAP）只占不到20%。在pH5.0条件下,总多糖（EPS和MAP）生产量和菌丝生长量最高。在28~34℃范围内,多糖产量在34℃培养条件下最高,并随着温度降低而下降。低氮条件下,菌丝生长较弱,多糖产量较低。多糖生产量（主要是胞外多糖）随着接种量的增加而提高,菌丝多糖的生产则相反。利用高效液相色谱（HPLC）凝胶层析法分离出两个胞外多糖组分,其洗脱时间为26.5和36.5 min,分子量分别为137和4.7 kDa;菌丝多糖有一个大的峰（40 min）和一个很小的峰（28 min）,其分子量分别为1.57和76.6 kDa。菌丝多糖的HPLC凝胶层析色谱和从灵芝子实体中提取的多糖相似。本研究所采用的各种培养条件下生产的多糖（EPS和MAP）具有可重复性的HPLC色谱。

华根霉固态发酵产纤溶酶的工艺优化和初步提纯

采用华根霉TK317(Rhizopus chinensis)进行固态放大发酵实验,发酵培养基初始含水量为0.75 mL/g,固体发酵罐中湿度控制在70%,发酵前期30 h通风量为640 L/min,后30 h 通风量变为560 L/min,酶活力最高,达到706.3 U/g干基。研究并确定了中空纤维超滤浓缩,硫酸铵盐析的分离提取工艺,经过纯化,酶的比活力达23.32 U/mg,比浸提液提高11.05倍,酶活力回收率为70.2%。

根霉12号固体发酵产生纤溶酶工艺条件的研究

研究了根霉12号固体发酵产生纤溶酶的工艺条件。采用单因素试验、均匀设计方法对固体发酵培养基的碳源、氮源、碳氮比、初始pH、加水量、无机盐加量进行了优化;采用正交试验对发酵时间、接种量进行了研究。结果表明,实验范围内根霉12固体发酵产纤溶酶的适宜培养基组成为:麸皮∶豆粕=1∶2,初始pH5.0,加水量0.75ml/g物料, MnSO4H2O和 (NH4)2SO4加量分别为0.25%和 1.42%(对物料)。适宜培养条件为接种量107个孢子/g物料,培养时间72h。优化条件下的纤溶酶产量平均达791.81u/g物料。

华根霉产纤溶酶液体发酵条件的研究

研究了华根霉TCCC41014产纤溶酶液态发酵的工艺条件，采用单因素实验对液态发酵培养基的碳源、氮源、初始pH值、温度和装液量进行了优化。结果表明，实验范围内华根霉TCCC41014液态发酵产纤溶酶的适宜培养基组成（g/L）：糊精80，蛋白胨60，豆粕60，初始pH为4．5。适宜培养条件：培养温度为29℃，装液量为50／500mL三角瓶，接种量5×10^5个孢子／mL，培养时间为60h。优化条件下的纤溶酶产量达64．64U／mL。

大豆为原料的根霉纤溶酶固态发酵工艺条件

研究了以大豆为原料华根霉TK317产纤溶酶固态发酵的工艺条件。采用单因素试验对固态发酵培养基的碳源、碳氮比、初始pH、加水量和温度进行了优化;采用正交试验对接种量和培养基厚度进行了研究。结果表明,实验范围内华根霉TK317固态发酵产纤溶酶的适宜培养基组成:m(面粉)∶m(大豆)=1∶9,初始pH为5.0,加水量为0.75 mL/g。适宜培养条件:培养温度为28℃,培养基厚度为15 g/250 mL三角瓶,接种量1×107个/g,培养时间为60 h。优化条件下的纤溶酶产量平均达480.52 U/g。