虫草培养基添加剂对Wistar大鼠生长发育和繁殖性能的影响

目的探讨虫草培养基添加剂对Wistar大鼠生长发育和繁殖性能的影响。方法将虫草培养基添加在正常大鼠饲料中进行大鼠喂养试验,观察Wistar大鼠的生长发育和交配以及产仔情况进行统计分析。取大鼠卵巢和睾丸组织进行病理组织学观察。结果虫草培养基添加剂饲喂大鼠后,大鼠增重缓慢,雄性大鼠的饲料利用率有所增加,大鼠交配成功率和窝产仔数基本与对照组没有差异,大鼠卵巢和睾丸组织未受到器质性显微损伤。结论虫草培养基添加剂对大鼠生长发育和繁殖性能无特殊影响。

培养基添加剂促进重组大肠杆菌胞外分泌β-环糊精葡萄糖基转移酶的工艺优化

随着对β-环糊精的需求的增加,开发提高β-环糊精葡萄糖基转移酶产量成为主要焦点之一。为了克服重组质粒pET28a-DacD-cgt-his胞外产酶量低的缺陷,研究了培养基添加剂对β-环糊精葡萄糖基转移酶胞外分泌的影响,提高胞外表达量。首先通过向培养基中分别添加表面活性剂(Tween-80、Triton X-100)、氨基酸(天冬氨酸、甘氨酸)、渗透调节剂(L-脯氨酸、山梨醇、甜菜碱)和环糊精(α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精)4种类型添加剂以确定对重组大肠杆菌胞外分泌β-环糊精葡萄糖基转移酶的有益添加剂;其次对Tween-80、Triton X-100、甘氨酸和L-脯氨酸进行单因素试验和正交试验以确定培养基添加剂的组合条件。结果表明,各因素对胞外产β-环糊精葡萄糖基转移酶的影响顺序依次是:Tween-80>Triton X-100>甘氨酸>L-脯氨酸;培养基添加剂促进胞外分泌β-环糊精葡萄糖基转移酶的最优组合是:Triton X-1000.5%、Tween-802%、甘氨酸30 mmol/L、L-脯氨酸80 mmol/L,胞外产酶量达50.3 U/mL,是对照组的2.04倍。

培养条件及添加剂对重组荧光藻蓝蛋白β亚基胞外分泌的影响

为促进重组藻蓝蛋白的胞外分泌,该研究探索温度、诱导剂[异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isoprpyl-β-Dthiogalatopyranoside,IPTG)和乳糖],以及培养基添加剂(甘氨酸、Triton X-100、十二烷基硫酸钠和Tween-80)对大肠杆菌胞外分泌重组螺旋藻荧光藻蓝蛋白胞β亚基(β-subunit of C-phycocyanin,CpcB)荧光强度的影响。结果表明,在25℃的条件下,重组体系表达24 h胞外培养基具有明显的CpcB荧光,且荧光强度随着表达时间的增加而逐步升高,温度是影响胞外分泌的关键因素。添加乳糖可显著增加胞外培养基CpcB的荧光强度,当用10 g/L的乳糖作为诱导剂时,荧光强度达到最大值,比未加诱导剂高5. 1倍;而用IPTG作诱导剂,培养基没有明显的CpcB荧光。添加25 g/L的甘氨酸可使得胞外CpcB的荧光强度提高6. 3倍,添加1. 5%(体积分数)的Tween-80也可使其荧光强度提高2. 5倍。荧光藻蓝蛋白的胞外分泌为改善其异源生产的效率提供便利。