不同培养载体对小麦条锈菌夏孢子人工萌发的影响

为探索适合小麦条锈菌寄主体外萌发的载体,并建立基于不同研究目的的小麦条锈菌夏孢子人工萌发技术,采用超声波水雾培养法,以小麦条锈菌生理小种CYR32为供试材料,探讨了不同培养载体对小麦条锈菌夏孢子萌发特性的影响。在最适温度和湿度条件下,以4种不同材料为培养载体,小麦条锈菌夏孢子的萌发率、芽管生长率和外观显示情况有显著差异。在尼龙纱网上的夏孢子萌发速度和芽管伸长速度最快,12h内萌发率最高可达93.40%,芽管最长可达446.71μm;亲水滤膜上夏孢子的萌发率和芽管长仅次于纱网;亲水塑料膜和PVDF膜上夏孢子的萌发率均高于普通亲水载玻片,而芽管长度低于普通亲水载玻片。采用侧光照明时,在亲水滤膜和PVDF膜上极易清晰观测到夏孢子及其芽管内的黄色颗粒物。在亲水塑料膜上,还可观察到夏孢子萌发12h后,芽管尾部膨大形成类似附着胞的结构。结果显示,超声波水雾可使条锈菌夏孢子处于水分饱和的环境,而纱网纤维组成的小格具有很好的保水结露功能,能使夏孢子萌发快,萌发效率高,芽管生长快;另一方面,使用其他培养载体还可满足观测条锈菌夏孢子内黄色颗粒物向芽管内转移和芽管尾部形成类似附着胞结构的目的。

甘薯脱毒苗不同培养载体比较试验

以鲁薯 7号和鲁薯 8号脱毒甘薯试管苗为材料 ,进行了不同载体培养技术研究。试验采用棉纤维 (液固相 )、固体 (固相 )和液体 (液相 ) 3种培养基 ,在以棉纤维为载体的培养体系中 ,试管苗生长速度快 ,植株生长健壮 ,整个生长状况明显高于液相和固相 ,相对于固相而言 ,可节约 3 0 %以上的成本。

探析高校学生创新能力及其课外培养载体的构建

在我国建设创新型国家和构建社会主义和谐社会的伟大进程中,加强大学生创新能力培养,造就新时期创新型人才,是高校全面推进素质教育的核心任务。大力开展第二课堂活动,积极构建以科技活动、艺术体育活动、社会实践活动为主要课外培养载体,并建立相应保障体系的举措,能有效促进大学生创新能力的提高。

不同培养载体及温度对小麦叶锈菌夏孢子萌发的影响

旨在探索小麦叶锈菌寄主体外萌发的适宜载体及温度,并为小麦叶锈菌的孢子萌发阶段RNA转录组分析提供优良的试验材料。采用高湿度黑暗培养法,以新鲜小麦叶锈菌致病类型FHJT的夏孢子为供试材料,测试不同载体对小麦叶锈菌夏孢子萌发特性的影响。在所测最适温度20℃下,以6种不同材料为培养载体,小麦叶锈菌夏孢子的芽管生长率和芽管生长长度均有显著差异,在无纺布上的夏孢子的芽管长度最长达到465.85μm,微孔滤膜上的夏孢子芽管伸长速度最快,而在这6种材料上夏孢子12 h的萌发率基本相同。微孔滤膜更利于萌发孢子的收集,因此,微孔滤膜是最适宜的萌发载体。

Vero细胞微载体悬浮培养制备人用狂犬病疫苗的研究

将“北京”及“CTN”两株中国分离的狂犬病病毒毒株适应于Vero细胞,病毒滴度可达10^(7.5)LD_(50)/ml。应用Veto细胞微载体反应器系统培养病毒,经丙内酯灭活,超滤浓缩制备的疫苗,其效力试验(NIH法)结果优于现行原代地鼠肾细胞培养疫苗。

用微载体系统培养PK15细胞生产猪圆环病毒2型

研究了生物反应器、转瓶、方瓶3种不同培养系统生产PCV2,对转瓶不同参数下的病毒效价情况进行了比较和优化,最终确定培养参数为:以1:10稀释种毒后接种、接种24 h的PK15细胞、5～7 mg/mL微载体浓度和维持液低糖DMEM+2 g/L水解乳蛋白(LH)的培养方式效果最为理想;采用微载体和反应器系统生产PCV2,病毒效价可达10^(5.0)TCID_(50)/mL以上。

微载体培养PK-15细胞试验条件的优化

为了优化PK-15细胞在微载体上的生长条件,在微载体浓度5 mg/mL、低糖DMEM+100 mL/L NBS培养液条件下,观察4.5×104cells/mL和8.7×104cells/mL的细胞接种密度对细胞生长的影响;在低糖DMEM+100 mL/L NBS培养液、接种密度5×104cells/mg条件下,观察3、5、10 mg/mL微载体浓度对细胞生长的影响;在3 mg/mL微载体浓度条件下、接种密度25×104cells/mL,观察MEM、高糖DMEM和低糖DMEM培养基对细胞生长的影响。结果表明,以微载体接种细胞密度4.5×104cells/mg、微载体浓度5 mg/mL在低糖DMEM培养基中培养方式效果最为理想。优化的培养工艺适用于PK-15细胞的生产。

微载体培养技术的研究进展

本文对近年来广泛用于动物细胞培养的微载体技术的特点、培养过程的优化作了较为详细的评述。

微载体技术在动物细胞培养中的应用进展

荷兰学者A．L．Vanwezel于1967年首先创立了微载体培养动物细胞技术，为贴壁依赖性细胞的高产培养提出了“微载体”培养系统的新技术概念。在微载体表面，培养细胞可以在较短时间内得到大量的细胞，且细胞传代只需要添加新的微载体，基本上可避免细胞在胰酶消化过程中受到的损伤，因此微载体培养细胞技术是非常方便和有意义的。经过几十年的研究改进，微载体培养技术现已广泛地应用于动物细胞的培养。本文将对近年来微载体技术的研究进展作一综述。

鸡胚细胞的微载体培养

国外有许多利用微载体培养各种贴壁细胞的报道。鸡胚细胞(CEF cells)是最早用于体外培养的细胞之一,用它可生产多种鸡的疫苗,如法氏囊、新城疫、马立克疫苗等。我国生产上多采用滚瓶法,近年来才有微载体法培养的探索。要进行细胞的大规模培养,转瓶是有效的模拟。

斜纹夜蛾细胞的微载体悬浮培养

当微载体浓度３ｍｇ／ｍＬ、细胞接种浓度１．８０×１０５细胞／ｍＬ时，细胞培养８ｄ达最大生长密度１．２０×１０６细胞／ｍＬ，细胞群体倍增时间５６．２ｈ，葡萄糖的浓度随细胞培养时间的延续逐渐减小；氨的浓度随细胞培养时间的延续逐渐递增．

商品化适合于CHO细胞和杂交瘤培养的大孔径载体

瑞典Pharmacia Biotech公司开发适合于培养作为产生重组蛋白的CHO细胞(中国仓鼠 卵巢细胞)和产生抗体的杂交瘤等悬浮细胞的载体“Cytoline”,于95年春商品化。另外。

微载体细胞培养技术在兽医领域的应用

人们不但已知活细胞是构成所有活的有机体的基本单位,而且对其结构、功能、生命活动,以及在机体内不同细胞间构成的细胞社会、各种细胞与细胞周围环境间的关系等方面,进行了不同水平、不同层次、不同深度的探索,并随着科学技术水平的不断提高而向纵深发展.1885年Roux最先开始尝试使组织脱离机体而生存.1907年Harrison开始把组织培养作为一种方法,用于研究离体动物细胞.组织培养是一个通用名词,其实际内容可概括为三个不同概念,也就是包括有三种主要方法:(1)器官培养,培养物保持全部或部分体内组织结构,培养于液体与气体的交界;(2)原代外植块培养,将一小片组织放在玻璃的或塑料培养器皿与液体的交界处,待组织块粘着后,沿底平面移动生长;(3)细胞培养,将原代外植块生长晕用机械法或酸法分离细胞,作成细胞悬液,再培养于固体基质上,或单层细胞生长,或在培养液中呈悬浮状态培养.微载体细胞培养技术的诞生,为那些在悬浮培养条件下受限制的细胞可以大规模培养,把细胞培养提到崭新的高度.微载体细胞培养技术使细胞培养量在单位体积中可增加数倍甚至10倍以上.

微载体粘附培养的肝细胞腹腔内移植治疗急性肝功能衰竭大鼠的实验研究

目的 评价微载体粘附培养的肝细胞腹腔内移植对D 氨基半乳糖盐酸盐诱导的大鼠急性肝功能衰竭的治疗作用。方法 胶原酶灌注分离大鼠肝细胞 ,行Cytodex 3粘附培养 ,移植 1× 10 7个微载体粘附肝细胞至D 氨基半乳糖盐酸盐诱导的急性肝功能衰竭大鼠腹腔内 ,比较各组间生存率、肝功能及肝脏病理改变情况以评估疗效。结果 微载体移植组大鼠存活率明显高于空载体组 ,移植 5d后两组比较差异显著 (P <0 .0 5 ) ;空载体组大鼠肝功能及肝脏修复明显迟于微载体组。结论 微载体粘附培养的肝细胞腹腔内移植可对急性肝衰竭大鼠提供代谢支持作用 ,提高急性肝衰竭大鼠存活率。

Vero细胞在气升式反应器中的微载体培养

哺乳动物细胞的大规模培养是生产许多医学上重要生物制品的一种主要方法之一。很多有工业价值的动物细胞都是贴壁细胞,必须附着在一定的表面上才能生长,微载体培养是一种有效的体系。用于微载体培养的反应器多为搅拌式反应器,近年来,流化床式反应器越来越引起生化工程学家的重视。有希望用于大规模动物细胞培养的主要是液升和气升式。液升式反应器的优点是培养液可以间接氧饱和,气泡和细胞不直接接触。在气升式流态反应器中,气泡与细胞直接接触,其优点是操作方便,设备简单。本文报道通过气升流态化反应器实现高密度贴壁细胞培养工艺条件的研究。

乳鼠心肌细胞在旋转生物反应器中的微载体培养初探

实验尝试在旋转生物反应器(RCCS)中采用微栽体培养技术对心肌细胞进行快速培养.采用顺序消化和差速贴壁法分离纯化1～2日龄新生大鼠的心肌细胞,并将其在RCCS内应用Cytodex-3微载体进行培养,于倒置显微镜和扫描电镜下对微栽体表面的细胞进行动态观察,同时测定细胞的代谢活性.结果表明,心肌细胞可快速贴附于微栽体表面,细胞伸展后生长加速,并可形成心肌细胞-微栽体团块,细胞代谢旺盛,说明在RCCS内应用微载体培养技术可简便、快速地在体外培养心肌细胞,是心肌细胞培养的一条可行途径.

微载体规模化培养草鱼鳔细胞以增殖Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒的工艺研究

为优化草鱼(Ctenopharyngodon idella)鳔细胞(CiSB)细胞悬浮培养工艺,以提高基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)含量,利用Cytodex 1微载体悬浮培养系统规模化培养CiSB和Ⅱ型GCRV,对CiSB细胞初始接种密度、搅拌转速和微载体浓度等工艺参数进行摸索和优化。结果显示,在CiSB细胞贴壁期,以转速30 r·min^(-1)、每静置30 min搅拌2 min的间歇搅拌方式培养最佳,4 h后细胞贴附率可达96%以上;在微载体密度2 g·L^(-1)、细胞初始接种密度2×10^(5)个·mL^(-1)、搅拌速度30 r·min^(-1)的条件下,初始培养血清浓度设定为10%,培养3 d后更换50%的培养基并使血清浓度达到5%,可获得最佳的细胞生长效能。CiSB经消化转移放大至1 L,微载体上细胞贴附均匀、生长良好。接种Ⅱ型GCRV至规模化培养的CiSB细胞,拷贝数最高达6.2×10^(5)拷贝数·μL^(-1)。研究结果可为草鱼出血病疫苗的规模化生产工艺研究提供依据。

MDCK细胞微载体培养条件优化研究

研究细胞接种量、搅拌转速和微载体浓度对MDCK细胞微载体培养时的影响,以合理优化MDCK细胞微载体培养最大增殖时期的最优条件,对疫苗和病毒分离具有重要意义,以期达到在疫苗和病毒分离领域提高生产效率。采用微载体培养MDCK细胞,在不同搅拌转速、微载体浓度和细胞接种量进行培养,每隔24 h取样计数,确定最优的培养条件。结果表明,细胞接种量在20个/球、搅拌转速45 r/min和载体浓度在2 g/L时,MDCK细胞的增殖较快,细胞密度较大,细胞的密度最大可达15.6×106个/mL,适合MDCK细胞增殖生长。

聚合物微载体及其在细胞培养方面的应用

微载体培养系统是当前贴壁依赖型细胞大规模培养的主要方法。介绍了微载体系统培养细胞的优越性 ,评述了近年来常用的几种制备微载体的天然聚合物材料 ,较为详尽地总结了微载体特别是大孔微载体的制备方法和微载体的改性方法。目前关于用微载体培养细胞来生产生物医药制品的研究较多 。

角膜缘干细胞不同载体培养的研究进展

角膜缘干细胞缺乏所致眼表疾病已成为重要的致盲角膜病之一,而体外培养的角膜缘干细胞移植是治疗眼表疾病的重要途径。其中载体的选择是成功的关键。本文将从不同载体的生物特性,用于培养干细胞的可行性及优缺点等方面,阐述选择合适的载体培养角膜缘干细胞的研究进展。